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  • 简介:木糖还原是酵母代谢木糖发酵的关键之一。根据已报道的木糖还原基因的全序列设计引物,从休哈塔假丝酵母中克隆得到1110bp大小的片段。将木糖还原基因亚克隆到酿酒酵母的整合表达载体p406ADH1中,醋酸锂转化法将线性化重组质粒pYX-AK-xyl1转化到酿酒酵母W5,对阳性转化子进行活测定,结果表明,以辅酶DANH和NADPH为底物诱导,转化子均表现出活性,活分别为6.513U/mg和7.080U/mg,是受体菌W5活的1.4倍(NADH)和1.3倍(NADPH),其活比为0.919。

  • 标签: 休哈塔假丝酵母 木糖还原酶 重组酿酒酵母
  • 简介:由于大麦和麦芽中存在的内潭性氧化还原的作用,使内源性多酚、不饱和脂类等物质被氧化,导致成品啤酒风味稳定性和非生物稳定性的降低。促氧化反应可发生在不同的酿造阶段,包括发芽、焙爆和糖化等环节。五种主要的内源性氧化还原中,超氧化物歧化是最为重要的抗氧化,可防止超氧阴离子自由基的危害;而过氧化氢可催化具有活性的H2O2生成如,由此构成了清除活性氧的初级抗氧化体系。过氧化物酶和多酚氧化分别在H2O2和O2存在的情况下,可催化内源性酚类底物生成具有活性的醌类物质,所产生的次级氧化产物可改变啤酒的品质。脂肪酸氧化可氧化不饱和脂肪酸生成可挥发性的醛类物质,是导致啤酒风味老化的关键促氧化的结果在成品啤酒上主要表现为老化异昧的出现、形成混浊、苦味和收敛性的改变,以及色泽的加深等。本文综述了这五种的基本性质,在制麦和糖化过程中的变化及其影响,并探讨了对啤酒酿造的影响。

  • 标签: 氧化还原酶 超氧化物歧化酶 过氧化氢酶 过氧化物酶 多酚氧化酶 脂肪酸氧化酶
  • 简介:目的了解食源性变形杆菌的氨基糖苷类耐药基因情况。方法收集2011—2014年石家庄市售各类食品中分离到的对阿米卡星和庆大霉素至少有一种耐药的变形杆菌124株,用PCR、测序和基因库在线比对方法分析6种氨基糖苷类修饰基因与3种16SrRNA甲基化基因。结果124株变形杆菌中氨基糖苷类修饰耐药基因aacC2、aacA4、aadA1和aphA6的检出率分别为95.2%(118/124)、80.6%(100/124)、73.4%(91/124)和5.6%(7/124);16SrRNA甲基化耐药基因rmtB检出率为87.1%(108/124)。aacC1、aadB、armA和rmtC基因均未检出。结论aacC2型氨基糖苷类修饰基因与rmtB型16SrRNA甲基化基因流行是食源性变形杆菌对氨基糖苷类抗生素耐药的重要原因。

  • 标签: 变形杆菌 氨基糖苷类 耐药基因 氨基糖苷类修饰酶 16S r
  • 简介:用等体积浸渍法制备CuO/C催化剂,采用FTIR、UV、^1H-NMR光谱和HPLC色谱,分析了以CuO/C为催化剂,以环己烯为还原剂对麦草碱木质素进行催化,研究了碱木质素的化学结构变化。红外光谱表明,还原碱木质素的总羟基(酚羟基和醇羟基)含量增加,羰基含量减少,芳环稳定;^1H-NMR光谱证实,还原碱木质素的羰基质子数呈下降趋势,羰基被还原为羟基;酚羟基和醇羟基质子数增加;高效凝胶渗透色谱分析表明,还原碱木质素的数均分子质量有所增加、重均分子质量减少,活化碱木质素的多分散性小于碱木质素的多分散性。CuO/C催化剂对木质素还原反应具有明显的催化作用,其化学结构发生了改变,活性宫能团增加,苯环结构稳定,木质素的反应活性提高。

  • 标签: CuO/C催化剂 碱木质素 还原反应 化学结构
  • 简介:美国加利福尼亚大学里弗赛德分校一个研究小组研究发现,转基因技术可使作物产生大量的DHAR,从而显著提高玉米等谷物中所含维生素C的水平。这一成果为改善某些日常作物的营养保健价值提供了新的手段。在作物中,维生素C的再循环主要受到名为DHAR的控制,这种可使作物中维生素C得到重复利用,缺少这种会使作物中的维生素C很快流失。科研人员由此推测,

  • 标签: 美国 基因技术 谷物 维生素C
  • 简介:目的通过测定转基因食品的胰蛋白抑制剂活性,为建立转基因食品营养评价标准提供数据。方法首先通过探讨胰蛋白-底物-胰蛋白抑制剂的剂量反应关系,建立转基因食品胰蛋白抑制荆活性测定的最佳反应体系,并以此为基础分析了部分转基因玉米、大豆的胰蛋白抑制剂活性及与亲本食品的差别。结果所检转基因食品胰蛋白抑制剂活性大多与亲本食品差别不大,尽管个别产品出现胰蛋白抑制剂活性增高或降低现象,但都在可接受范围。结论在规范检测技术前提下加强对非转基因食品基础数据建设对制定转基因食品营养评价标准十分必要。

  • 标签: 转基因 食品 基因修饰 胰蛋白酶抑制剂 营养评价
  • 简介:以蛋白高产菌株B.subtilisML为供体菌,提取其染色体DNA,经限制性内切BamHI完全酶切后,插入枯草杆菌载体pNQ122的相同酶切位点,连接后转化中性碱性蛋白基因双缺陷型菌株B.subtilisDB104。从含有氯霉素的酪蛋白平板上获得了20个具有蛋白活性的克隆。

  • 标签: 枯草芽孢杆菌 中性蛋白酶 基因 基因克隆 制草
  • 简介:以分离筛选、鉴定的假单胞菌为研究材料,提取假单胞菌的基因组为模板基因.设计引物进行PCR扩增。扩增的条件为94℃预变性4min,98℃变性10S,58℃退火1min,72℃延伸2min,35个循环,72℃复性10min。用试剂盒回收PCR产物,以PGEM—TEasyVector为载体。产生重组质粒,转化到大肠杆菌(E’coli)JM109细胞中,于LB平板上进行蓝白筛选阳性克隆。提取阳性克隆的质粒,电泳筛选滞后质粒,EcoRⅠ切验证后进行测序,检测弹性蛋白基因在JM109Ecoli细胞中的表达。结果表明:PCR扩增出1,67kh的基因片段。并成功克隆在EcoliJM109细胞中:挑取白斑提取的质粒,检测有滞后质粒,EcoRⅠ切检测到3.0kh的载体和1,67kb的基因片段;以滞后质粒为模板再次进行PCR扩增,扩增出1.67kb基因片段。证明该质粒为重组质粒,经上海博亚生物技术公司测序为1.67kh的基因片段。并在EcoliJM109细胞中表达。

  • 标签: 胞外弹性蛋白酶 基因克隆 表达
  • 简介:酒酒球菌是与葡萄酒相关的乳酸菌,具有糖苷活性,能够通过水解葡萄衍生的芳香化合物前体以增强葡萄酒香气。采用PCR法从酒酒球菌基因组DNA中克隆得到一个磷酸-β-葡萄糖苷基因。序列分析显示:该基因包含一个完整的开放阅读框,全长1443bp,编码480个氨基酸残基。其编码的氨基酸序列与酒酒球菌PSU-1的磷酸-β-葡萄糖苷序列同源性在99%以上。生物信息学分析显示,该基因编码的蛋白分子质量为55164.4u;理论等电点为6.14,疏水性较弱;无信号肽,无跨膜区,为可溶性,主要存在于细胞质内,属于糖苷家族1,bglB超家族。对酒酒球菌bgl-2基因的克隆与分析,为进一步探究β-葡萄糖苷在酒酒球菌细胞内的代谢研究奠定了理论基础。

  • 标签: 酒酒球菌 磷酸-β-葡萄糖苷酶 基因克隆 生物信息学分析
  • 简介:乙醛脱氢Ald6是啤酒酵母乙醛代谢途径的关键,它能催化乙醛脱氢,生成乙酸。设计引物,RT-PCR扩增得到啤酒酵母CRB2菌株Ald6基因,在大肠杆菌中进行克隆、表达、测序,并对表达产物的学性质进行了研究。结果表明,Ald6基因的大小为1503bp,编码的乙醛脱氢由500个氨基酸组成,与其它菌株的乙醛脱氢相比,核苷酸序列的同源性为7%-100%。乙醛脱氢以乙醛为底物时的Km值为28.14μmol/L,Vmax为98.03μmol·min^-1mg^-1,最适反应条件为15℃,pH8.0。中试酿造试验发现K^+、Mg^2+、Fe^2+对降低乙醛含量有显著作用。

  • 标签: 乙醛脱氢酶Ald6 KM DNA测序 表达
  • 简介:目的探讨富含黄酮类物质的果蔬汁对大鼠肝脏内氧化损伤相关Ⅱ相代谢基因表达的影响。方法SPF级雄性成年大鼠54只按体重随机分为对照组、低剂量果蔬汁干预组和高剂量果蔬汁干预组,对照组每日给予生理盐水灌胃、干预组给予低剂量和高剂量果蔬汁灌胃。干预5周后,腹主动脉采血用于生化指标检测;取肝脏组织检测基因表达情况。RT-PCR方法检测肝脏中氧化损伤相关Ⅱ相代谢mRNA的表达情况;试剂盒法测定血清总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)含量。结果与对照组相比,低、高剂量果蔬汁饮食干预组大鼠的血清抗氧化能力增强,同时上调肝脏中药物代谢Ⅱ相人醌NADH脱氢(NQO1)和谷氨酰-半胱氨酸连接催化亚基(GCLC)mRNA的表达(P〈0.05),但对GSTP1、GCLM、GSTM2、GSTA2Ⅱ相代谢基因mRNA表达无影响。结论富含黄酮类物质果蔬汁可以增强大鼠血清抗氧化能力,同时诱导肝脏中抗氧化Ⅱ相代谢NQO1及GCLC基因mRNA的表达。

  • 标签: 果蔬汁 抗氧化 Ⅱ相代谢酶 大鼠 肝脏 氧化损伤
  • 简介:一个致力于重新改造水稻从而增加水稻产量50%的国际联合研究组织将要进入它的长达数十年的项目的第二阶段。该项目的目标是对水稻进行转基因改造从而使用一种更加高效的光合作用方式。

  • 标签: 水稻品种 基因改造 时间 商业 研究组织 光合作用
  • 简介:用复合纤维索对杨木磨石磨木浆(SGW)进行处理,探讨处理条件对扬木SGW浆滤球性能和物理性能的影响。结果表明.最佳处理条件为:温度45℃,对样A的pH为5.4,对样B的pH为4.8,浆浓度3%.在用量为0.1-0.5IU/g.作用时间为2h时。浆的滤水性能有明显提高,纸浆强度性能和白度有所改善。

  • 标签: 理条 酶处理 磨石磨木浆 杨木 酶改性 滤水性能
  • 简介:采用木瓜蛋白对罗非鱼进行解,对不同液固比和浓度对水解罗非鱼的影响进行了研究。以总氨基态氮含量作为评价木瓜蛋白水解能力为指标,结果表明木瓜蛋白水解罗非鱼的最适加量为0.6%,水解最经济的固液比在1∶3左右。通过正交实验,得到木瓜蛋白水解罗非鱼的最佳工艺条件为:浓度0.7%、水解温度60℃、水解时间3h、pH值6.0。

  • 标签: 罗非鱼 木瓜蛋白酶 酶浓度 固液比 工艺条件
  • 简介:目的:从海参体壁组织中分离提取蛋白体,研究其学性质。方法:新鲜海参组织经匀浆、Tris-HCl缓冲液浸提后得到粗提物,再经(NH4)2SO4盐析、二乙氨乙基葡聚糖纤维素和丙烯葡聚糖凝胶S-300分离纯化后得到海参蛋白体。经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,其分子质量200ku。结果:海参蛋白体特异性最强的检测底物Boc-GAA-MCA,最适pH8.0,最适反应温度45℃。40℃时蛋白体活性稳定,在1h的孵育过程中呈现一定的热激活效应。在50~60℃,活力随孵育时间的延长迅速下降。K+、Ca2+、Mg2+、Zn2+均可明显抑制其活性。抗痛素、N-甲苯磺酰-L-赖氨酸氯甲基化酮、N-甲苯磺基-L-苯乙胺酰氯甲基酮及E-64均可显著抑制该蛋白体活性。结论:海参体壁蛋白体具有典型的蛋白体的复合型活性,其中胰蛋白样活性较强,之后是糜蛋白样活性,而肽基谷氨酰肽水解样活性最弱。

  • 标签: 海参 蛋白酶体 纯化 酶学性质
  • 简介:本文用凝胶色谱法,离子交换色谱法研究了静置三月后的糖还原铬铝鞣液的组份以及醋酸钠作掩蔽剂对它们的影响.凝胶色谱法分离出五个组份.各组份中铬的分布比较均匀,但以分子大小为中等的组份中含量较多.铝则集中于分子大小为中等的组份中.含有醋酸钠的同样鞣液分离出三个组份。铬和铝都大部份存在于分子大小为中等的组份中.但大分子组分和小分子组分中的铬含量较铝多.醋酸钠有使组份简并.使络合物分子大小均匀化的作用.醋酸钠对铬络合物的影响较大.离子交换色谱法分离出七个组份.它们所带的电荷由负一价到正六价。高电荷效组份的分子较大可能是多核络合物.各组份中铬的分布比较均匀.铝则集中于电荷效为中等的组份中。加有醋酸钠的鞣液也分离出类似的七个组份,低电荷数组份中的铬置增多,中等电荷数的组份中铬量增加最多,离电荷数组份中的铬量明显减少,铝的分布也有类似的倾向,但变化不明显,与凝胶色谱法所得结果相似,醋酸钠有使络合物电荷数均匀化的作用,这种作用对铬络合物较明显,对铝络合物则不大.

  • 标签: 原铬铝 液组份 糖原铬
  • 简介:对麦草法化学浆的漂白性能进行了研究,结果表明,无论是采用有氯漂白,还是采用TCF漂白,麦草法化学浆均具有良好的漂白性能,且漂白法浆有较好的强度性质;采用XHP漂白程序,当有效氯用量为7%和H2O2用量为1%时,漂白法浆的白度可超过90%ISO,裂断长达到5010m;漂白前对浆料进行木聚糖酶预处理可以改善后续漂白段的漂白效率,提高漂白浆白度,同时对漂白浆的物理性能也会产生一定的影响.

  • 标签: 漂白性能 麦草 漂白浆 化学浆 化学制浆 酶法
  • 简介:氨基甲酸乙酯是发酵食品天然产生的1种2A级致癌物。建立以氨基甲酸乙酯脱氨为基础的生物清除方法,在食品安全方面具有重要意义。利用单因素比较方法,通过测定比活,对氨基甲酸乙酯脱氨的发酵条件和学性质进行研究。结果表明,氨基甲酸乙酯的最适发酵条件是:以15.0g/L麦芽糖为碳源,5.0g/LNH4Cl+5.0g/L酵母膏为氮源,7.5g/L氨基甲酸乙酯,培养温度28℃,起始pH5.5。培养菌株枯草芽孢杆菌ZJ0930h后,氨基甲酸乙酯脱氨的比活达到最大值18.86U/mL。经盐析、离子交换和膜浓缩后,氨基甲酸乙酯脱氨的纯化倍数达到174,冷冻干燥的粉比活力为32186U/g。氨基甲酸乙酯脱氨的最适催化温度45℃,最适反应pH4.0。该具有一定的热稳定性,在酸性环境的催化活力和稳定性较好,适当浓度的Zn2+和Mg2+对活有显著促进作用。菌株ZJ09所产氨基甲酸乙酯脱氨具有良好的催化能力,易于发酵制备,是一种值得深入研究和开发的食品用,具有广泛的产业化应用前景。

  • 标签: 氨基甲酸乙酯 脱氨酶 发酵条件优化 酶学性质