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  • 简介:木糖还原是酵母代谢木糖发酵的关键之一。根据已报道的木糖还原基因的全序列设计引物,从休哈塔假丝酵母中克隆得到1110bp大小的片段。将木糖还原基因亚克隆到酿酒酵母的整合表达载体p406ADH1中,醋酸锂转化法将线性化重组质粒pYX-AK-xyl1转化到酿酒酵母W5,对阳性转化子进行活测定,结果表明,以辅酶DANH和NADPH为底物诱导,转化子均表现出活性,活分别为6.513U/mg和7.080U/mg,是受体菌W5活的1.4倍(NADH)和1.3倍(NADPH),其活比为0.919。

  • 标签: 休哈塔假丝酵母 木糖还原酶 重组酿酒酵母
  • 简介:美国加利福尼亚大学里弗赛德分校一个研究小组研究发现,转基因技术可使作物产生大量的DHAR,从而显著提高玉米等谷物中所含维生素C的水平。这一成果为改善某些日常作物的营养保健价值提供了新的手段。在作物中,维生素C的再循环主要受到名为DHAR的控制,这种可使作物中维生素C得到重复利用,缺少这种会使作物中的维生素C很快流失。科研人员由此推测,

  • 标签: 美国 基因技术 谷物 维生素C
  • 简介:以分离筛选、鉴定的假单胞菌为研究材料,提取假单胞菌的基因组为模板基因.设计引物进行PCR扩增。扩增的条件为94℃预变性4min,98℃变性10S,58℃退火1min,72℃延伸2min,35个循环,72℃复性10min。用试剂盒回收PCR产物,以PGEM—TEasyVector为载体。产生重组质粒,转化到大肠杆菌(E’coli)JM109细胞中,于LB平板上进行蓝白筛选阳性克隆。提取阳性克隆的质粒,电泳筛选滞后质粒,EcoRⅠ切验证后进行测序,检测弹性蛋白基因在JM109Ecoli细胞中的表达。结果表明:PCR扩增出1,67kh的基因片段。并成功克隆在EcoliJM109细胞中:挑取白斑提取的质粒,检测有滞后质粒,EcoRⅠ切检测到3.0kh的载体和1,67kb的基因片段;以滞后质粒为模板再次进行PCR扩增,扩增出1.67kb基因片段。证明该质粒为重组质粒,经上海博亚生物技术公司测序为1.67kh的基因片段。并在EcoliJM109细胞中表达。

  • 标签: 胞外弹性蛋白酶 基因克隆 表达
  • 简介:酒酒球菌是与葡萄酒相关的乳酸菌,具有糖苷活性,能够通过水解葡萄衍生的芳香化合物前体以增强葡萄酒香气。采用PCR法从酒酒球菌基因组DNA中克隆得到一个磷酸-β-葡萄糖苷基因。序列分析显示:该基因包含一个完整的开放阅读框,全长1443bp,编码480个氨基酸残基。其编码的氨基酸序列与酒酒球菌PSU-1的磷酸-β-葡萄糖苷序列同源性在99%以上。生物信息学分析显示,该基因编码的蛋白分子质量为55164.4u;理论等电点为6.14,疏水性较弱;无信号肽,无跨膜区,为可溶性,主要存在于细胞质内,属于糖苷家族1,bglB超家族。对酒酒球菌bgl-2基因的克隆与分析,为进一步探究β-葡萄糖苷在酒酒球菌细胞内的代谢研究奠定了理论基础。

  • 标签: 酒酒球菌 磷酸-β-葡萄糖苷酶 基因克隆 生物信息学分析
  • 简介:一个致力于重新改造水稻从而增加水稻产量50%的国际联合研究组织将要进入它的长达数十年的项目的第二阶段。该项目的目标是对水稻进行转基因改造从而使用一种更加高效的光合作用方式。

  • 标签: 水稻品种 基因改造 时间 商业 研究组织 光合作用
  • 简介:采用木瓜蛋白对罗非鱼进行解,对不同液固比和浓度对水解罗非鱼的影响进行了研究。以总氨基态氮含量作为评价木瓜蛋白水解能力为指标,结果表明木瓜蛋白水解罗非鱼的最适加量为0.6%,水解最经济的固液比在1∶3左右。通过正交实验,得到木瓜蛋白水解罗非鱼的最佳工艺条件为:浓度0.7%、水解温度60℃、水解时间3h、pH值6.0。

  • 标签: 罗非鱼 木瓜蛋白酶 酶浓度 固液比 工艺条件
  • 简介:目的:从海参体壁组织中分离提取蛋白体,研究其学性质。方法:新鲜海参组织经匀浆、Tris-HCl缓冲液浸提后得到粗提物,再经(NH4)2SO4盐析、二乙氨乙基葡聚糖纤维素和丙烯葡聚糖凝胶S-300分离纯化后得到海参蛋白体。经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳分析,其分子质量200ku。结果:海参蛋白体特异性最强的检测底物Boc-GAA-MCA,最适pH8.0,最适反应温度45℃。40℃时蛋白体活性稳定,在1h的孵育过程中呈现一定的热激活效应。在50~60℃,活力随孵育时间的延长迅速下降。K+、Ca2+、Mg2+、Zn2+均可明显抑制其活性。抗痛素、N-甲苯磺酰-L-赖氨酸氯甲基化酮、N-甲苯磺基-L-苯乙胺酰氯甲基酮及E-64均可显著抑制该蛋白体活性。结论:海参体壁蛋白体具有典型的蛋白体的复合型活性,其中胰蛋白样活性较强,之后是糜蛋白样活性,而肽基谷氨酰肽水解样活性最弱。

  • 标签: 海参 蛋白酶体 纯化 酶学性质
  • 简介:氨基甲酸乙酯是发酵食品天然产生的1种2A级致癌物。建立以氨基甲酸乙酯脱氨为基础的生物清除方法,在食品安全方面具有重要意义。利用单因素比较方法,通过测定比活,对氨基甲酸乙酯脱氨的发酵条件和学性质进行研究。结果表明,氨基甲酸乙酯的最适发酵条件是:以15.0g/L麦芽糖为碳源,5.0g/LNH4Cl+5.0g/L酵母膏为氮源,7.5g/L氨基甲酸乙酯,培养温度28℃,起始pH5.5。培养菌株枯草芽孢杆菌ZJ0930h后,氨基甲酸乙酯脱氨的比活达到最大值18.86U/mL。经盐析、离子交换和膜浓缩后,氨基甲酸乙酯脱氨的纯化倍数达到174,冷冻干燥的粉比活力为32186U/g。氨基甲酸乙酯脱氨的最适催化温度45℃,最适反应pH4.0。该具有一定的热稳定性,在酸性环境的催化活力和稳定性较好,适当浓度的Zn2+和Mg2+对活有显著促进作用。菌株ZJ09所产氨基甲酸乙酯脱氨具有良好的催化能力,易于发酵制备,是一种值得深入研究和开发的食品用,具有广泛的产业化应用前景。

  • 标签: 氨基甲酸乙酯 脱氨酶 发酵条件优化 酶学性质
  • 简介:85度C,台湾地区咖啡与烘焙业领域的老大。2004年从台湾起家,以惊人的发展速度,只用了不到三年的时间,便以300多家店,卖出超过1亿杯的咖啡战绩,大大超过在台湾地区打拼8年之久的星巴克。2006年,全台约有五百多家传统糕饼店关闭,虽然不能说全是85度C所致,但是台湾烘焙业冰火两重天的现实无人否认。

  • 标签: 台湾地区 发展速度 烘焙业 星巴克 咖啡
  • 简介:以蓝色刺孢霉为出发菌株,利用复合(紫外和硫酸二乙酯)诱变处理出发菌株,筛选凝乳酶高产菌株,并对其做遗传稳定性试验,研究蓝色刺孢霉产学性质。研究表明,先UV后DES复合诱变初筛,最可能为正突变株的有AI,A7,A15和A18;先DES后UV复合诱变初筛,最可能为正突变株的有B9,B12,B20,B22和B27。通过对上述菌株进行复筛,A18,B9和B20的凝乳酶活比出发菌株分别提高了20.80%,104.32%和37.51%,其中以先DES后UV诱变的菌株B9相对活最大,达到(115.95±7.20)SUmL~.活增加104-32%。遗传稳定性试验表明B9具有较好的遗传稳定性。通过抑制剂试验,确认蓝色刺孢霉所产为天冬氨酸蛋白。采用SDS—PAGE电泳,制定标准曲线,由其方程得出该凝乳酶相对分子质量为32400ku。通过与小牛皱胃酶切位点比较.得出水解产物和小牛皱胃的基本相同。

  • 标签: 蓝色刺孢霉 凝乳酶 诱变选育 酶学性质
  • 简介:由于传统面制品在品质和营养方面并非十分理想,如果在生产过程中适当添加一些,对提高产品的品质,合理利用食品资源是非常经济有效而且健康的。本文简要介绍焙烤食品和蒸煮食品中一些常用的种类、特点及应用。

  • 标签: 焙烤制品 蒸煮制品 应用
  • 简介:日本味之素公司在研究核酸系鲜味调味料的过程中,找到能进行特异位置磷酸化反应的微生物,从而发现了由这种微生物产生的能适应生产核酸系鲜味调味料需要的鲜味物质,使生产这类核酸系调味料的技术取得新的突破。此项研究成果已经于今年3月31日在广岛大学举行的日本农业化学学会研讨会上发表。味之素公司在研究中首先进行微生

  • 标签: 调味料 鲜味 磷酸化反应 微生物 核酸 产生
  • 简介:采用超声波、加热、酸、碱等处理方法研究改善玉米蛋白可溶性的问题,探讨法制备具有抗氧化活性的玉米肽的方法。结果表明:调节玉米蛋白悬浮液pH值为11,在超声功率45W,超声温度60℃条件下超声30min,可显著提高玉米可溶性蛋白得率;比较6种蛋白解产物的抗氧化能力,确定Alcalase为制备玉米抗氧化肽的最佳水解用;通过单因素试验和响应面分析得出最适解工艺是:底物质量浓度10.0g/100mL、加量2806U/g、反应pH值9.0、反应温度56.0℃、反应时间185min。在该条件下制备的玉米解产物的DPPH自由基清除率为(85.40±0.27)%,与理论预测值的相对误差在±l%内。

  • 标签: 玉米蛋白 酶解 抗氧化肽 响应面分析
  • 简介:采用生物传感器-人工神经网络建立基于游离氨基酸含量对胶原蛋白胰解进程的预测模型,以实现对解进程的在线监控,获得最大量的目标活性肽。以大马哈鱼皮为原料制备胶原蛋白,对其解,建立不同条件下的解动力学曲线。结果显示:解液中游离氨基酸含量随解时间的延长而增加,与胶原蛋白的水解度呈良好的线性关系。以浓度、底物浓度、游离谷氨酸含量、赖氨酸含量、谷氨酸和赖氨酸含量为输入参数,水解度DH为输出参数,建立基于谷氨酸含量、赖氨酸含量以及谷氨酸赖氨酸含量的蛋白传感器-人工神经网络预测模型。对3个模型的水解度样本值与拟合值进行比较分析,R2分别为0.98,0.9805和0.981,对样本值拟合度很高。利用模型进行独立试验验证,理论值与实验值相符合,水解度实验的相对误差范围分别为0.404%~6.45%,0.76%~2.27%和1.67%~2.72%。3个模型在一定程度上实现了仿真监控,可用来在线预测水解反应的动态进程。

  • 标签: 大马哈鱼皮 胶原蛋白 酶解进程 预测模型 BP神经网络