Cox-2、VEGF和MVD与转移性骨肿瘤患者的预后

Cox-2、VEGF和MVD与转移性骨肿瘤患者的预后

聂富祥1上官峰1李伟1赵峰子1梁辉1陈

聂富祥1上官峰1李伟1赵峰子1梁辉1陈根元2

（1义马煤业集团总医院骨科河南义马472300；2兰州大学第一医院骨科甘肃兰州730000）

【中图分类号】R730.5【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2010)19-0117-02

【摘要】目的探讨COX-2、VEGF和MVD三者的表达与转移性骨肿瘤患者预后的关系。方法采用免疫组化法检测64例转移性骨肿瘤手术标本COX-2、VEGF、CD34和MVD的表达，根据CD34染色结果测定计数MVD值，并分析以上指标与术后中位生存时间的关系。结果COX-2、VEGF在转移性骨肿瘤组的阳性表达率分别为59％（38/64）和77％（49/64）；MVD平均值为(42.68±5.67)个/200倍视野；COX-2和VEGF阳性组术后中位生存时间均高于阴性组,低MVD组的术后生存时间高于高MVD组；COX多因素分析表明，年龄、综合治疗、发病时间、VEGF阳性表达、高MVD表达（p<0.05）为影响预后的独立因素。结论VEGF和MVD是影响转移性骨肿瘤预后的独立因素，在预后判断上有指导意义。

【关键词】环氧化酶-2血管内皮生长因子微血管密度值转移性骨肿瘤预后

引言

转移性骨肿瘤是恶性肿瘤经血道转移至骨骼形成，是最常见的恶性骨肿瘤。其疾病过程呈现出极大的“个体化”特点。随着人们对其认识的不断深入，其检出率以及生存质量不断提高。本研究应用COX模型分析64例转移性骨肿瘤患者的病理和临床特点，以探讨其与患者预后的关系。

1材料与方法

1.1病例资料

收集兰州大学第一医院和义马煤业集团总医院2000-08/2006-12原发灶明确，且资料完整的转移性骨肿瘤手术切除患者的生存数据，共64(男44，女20)例，年龄15～82岁，平均56.8岁。病例入选标准：原发灶明确，经病理学或细胞学确诊，并经CR、CT、MRI、ECT等辅助诊断确诊，所有患者的标本病理诊断均经复检确诊；所有患者术前无放化疗史。

骨转移诊断标准[1]，符合下列至少1项者诊断为骨转移：（1）核素骨扫描示多发放射性异常浓聚伴或不伴稀疏或缺损区；（2）骨扫描示单发的异常放射性异常浓聚区，追踪观察病灶数增多，病变范围扩大者；（3）经磁共振成像(MRI)、CT、X线拍片确诊。

1.2主要试剂和设备

即用型COX-2及VEGF鼠抗人mAb、CD34mAb（福建迈新公司）。OLYMPUS-VANOX多功能显微镜及DMCⅡ型图像分析系统和Image-Proplusv.4.5软件。

1.3标本制备腊块连续切片，厚4μm，一个腊块捞片5～6个，分别为HE染色复检、COX-2标记、VEGF标记、CD34标记及阴性对照片或备用。采用免疫组化SP法检测标本COX-2、VEGF蛋白及CD34的表达。阴性对照片采用同批PBS为一抗的空白对照片。切片采用OLYMPUS-VANOX多功能显微镜及DMCⅡ型图像分析系统和Image-Proplusv.4.5软件进行分析；定性分析COX-2、VEGF、CD34染色程度及阳性细胞百分比，定量分析肿瘤组织CD34标记的微血管密度。

1.4试验步骤

按照产品说明书操作。VEGF阳性结果判定用已知人低分化胃溃疡侵润性腺癌组织VEGF阳性片为阳性对照（福建迈新编号：MAB-0243），判定方法参考Mattern法[2]，COX-2阳性结果判定用已知人肺腺癌COX-2阳性片为阳性对照（福建迈新编号：RMA-0549），判定方法参考Soslow等方法[3]。CD34标记的MVD分析采用已知人结肠癌内皮细胞CD34阳性片为阳性对照（福建迈新编号：0034），判定方法参考Weidner等[4]的方法。

1.5观察指标

肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移、组织学分型、治疗方法、年龄、性别、淋巴结转移、综合治疗、发病时间、治疗方案、术前健康状况。

1.6随访时间

随访开始时间为手术之日起。

1.7随访方式

存活病例随访至2008年12月，死亡病例随访至死亡之日。

2结果

2.1免疫组化结果

COX-2、VEGF在转移性骨肿瘤的阳性表达率分别为：59％（38/64）、77％（49/64）；MVD值为(42.68±5.67)个/200倍视野；为便于统计分析，把全部病例按照MVD分为两组，MVD≥24.68个/200倍视野为高MVD组，小于此值者为低MVD组。

COX-2、VEGF和MVD与预后的关系

COX-2阳性组的中位生存时间为8个月，COX-2阴性组的中位生存时间为12月，差异具有显著性（p<0.05）。VEGF阳性组的中位生存时间为7月，VEGF阴性组的中位生存时间为14月，差异具有显著性（p<0.05）。高MVD组的中位生存时间为7月，低MVD组的中位生存时间为13月，差异有显著性（p<0.05）。

2.2COX模型分析

采用COX多元模型分析肿瘤分化程度、浸润深度、淋巴结转移、组织学分型、治疗方法、年龄、性别、淋巴结转移、综合治疗、就诊早晚、术前健康状况、COX-2、VEGF和MVD表达等多种因素与预后的关系。结果表明：年龄（p=0.02）、综合治疗（p=0.04）、就诊早晚（p=0.02）、VEGF阳性表达（p=0.01）、高MVD表达（p=0.01）为影响预后的独立因素。

3讨论

骨骼是转移性肿瘤的好发部位。常常引起骨痛、病理性骨折、高钙血症、椎管受压等并发症，严重影响患者生活，降低生活质量，缩短患者寿命，给患者本人、家庭和社会带来巨大损失。

COX-2是催化花生四烯酸转化为前列腺素关键限速酶，抑制细胞凋亡、促进VEGF的表达有关。PGE2通过活化磷脂酰肌醇3激酶/蛋自激酶B途径经PP4受体促进细胞生长和运动[5],在介导生长因子和癌基因的生长促进作用中起决定作用[6],COX-2通过降低花生四烯酸的水平等途径抑制细胞凋亡。其尚可诱导VEGF表达而促进肿瘤的新生血管生成[7]。VEGF在人类胚胎时期和多种肿瘤生长过程中均呈高表达，能促进血管内皮细胞的分裂和增殖，从而诱导肿瘤组织不断生长。VEGF是最主要的血管生成促进因子，其高表达是多种肿瘤转移和预后的独立指标。MVD是反映肿瘤组织血管生成数目与多种肿瘤的进展和预后有关，与多种肿瘤的进展和预后有关[8]。

COX-2及VEGF在转移性骨肿瘤、原发性骨肿瘤和良性骨肿瘤组织的阳性表达率依次降低[9]，说明两者与肿瘤细胞的恶性程度相关。本组资料的生存分析表明COX-2、VEGF阳性组，及高MVD组的表达与转移性骨肿瘤的预后有关，但多因素分析表明COX-2不是影响预后的独立因素。

4结论

VEGF和MVD是影响转移性骨肿瘤预后的独立因素，在预后判断上有指导意义。

参考文献

[1]邓豪余,段华新,邱娟.乳腺癌患者腋窝淋巴结转移与骨转移关系[J].湖南医科大学学报,2001,26（3）：269-270.

[2]MatternJ,KoomagiR,VolmM.Associalionofvascularendothelialgrowthfactorexpressionwithintratumoralmicrovesseldensilvandtumourcellproliferationinhumanepidermoidlungcarcinoma[J].BrJCancer,1996,73(7):931一934.

[3]SoslowRA,DannenbergAJ,RushD,eta1.COX-2isexpressdinhumanpulmonary,colonic,andmammarytumors[J].Cancer,2000,89(12):2637-2645.

[4]WeidnerN,FolkmanJ,PozzaF,etalTumorangiogenesis:Anewsignificantandindependentprognosticindicatorinearlystagebreastcarcinoma[J].JNatlCancerInst,1992,84(24):1875-1887.

[5]ShengH,ShaoJ,WashingtonMK,etal.Prostaglandin.E2increasesgrowthandmotilityofcolorectalcarcinomacells[J].JBiolChem,2001,276(21):18075-18081.

[6]DermottJMReddyMR,OnesimeD,etal.OncogenicmutantofGalphal2stimulatescellproliferationthroughcyclooxygenase-2signalingpathway[J].Oncogene,1999,18(51):7185-7189.

[7]WilliamsCS,TsujiiM,ReeseJ,etal.Hostcyclooxygenase-2modulatescarcinomagrowth[J].JClinInvest,2000,105(11):1589-1594.

[8]WeidnerN.Intrtumourmicrovesseldensityasaprogosticfactorincancer[J].AmJPathol,1995,147(1):9-19.

[9]聂富祥,陈根元.转移性骨肿瘤中COX-2、VEGF及微血管密度的关系[J].第四军医大学学报,2007,28(9):846-848.