不同氧分压对大鼠PC12细胞生存的影响

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摘要 摘要目的观察不同氧分压对大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤(pheochromocytoma, PC12)细胞生存的影响,探讨可能的机制。方法PC12细胞长满培养瓶底70%~80%时随机分为0.1 MPa组、0.2 MPa组和0.4 MPa组,分别置于实验舱中,0.1 MPa组常压下呼吸纯氧,另2组升压速度0.03 MPa/min,稳压在相应压力下予纯氧1 h。用四甲基偶氮唑[3-(4, 5-dimethylthiazol-2yl)-2, 5-diphenyl tetrazolium bromide,MTT]比色法测定细胞存活率、培养液中乳酸脱氢酶(L-lactate dehydrogenase,LDH)水平,流式细胞仪检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)及线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)。结果(1)0.2 MPa组较0.1 MPa组细胞存活率升高[(118.35±5.42 )%vs. (100.38±5.08)%),差异具有统计学意义(P<0.01),而0.4 MPa组的细胞存活率[(83.50±7.11)%]较0.1 MPa组及0.2 MPa组降低,差异有统计学意义(P<0.01)。(2)0.4 MPa组内的LDH水平(1 071.67±35.36)明显增加,与0.1 MPa组(959.19±34.06)和0.2 MPa组(966.66±31.38)比较,差异均具有统计学意义(P<0.01)。(3)ROS水平随着压力的增加而上升,0.1 MPa组(97.48±6.08)和0.2 MPa组(112.48±3.14)、0.1 MPa组和0.4 MPa组(148.62±4.79)、0.2 MPa组与0.4 MPa组的ROS水平差异均具有统计学意义(P<0.01)。(4)Rh123的荧光强度与MMP负相关,3组分别为(797.63±60.05)、(798.20±58.54)、(1 362.32±40.68),0.2 MPa组的MMP与0.1 MPa组相比,差异无统计学意义(P=0.79),0.4 MPa组的MMP较0.1 MPa组及0.2 MPa组降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论适当的氧分压增加PC12细胞的存活率,过高的氧分压对细胞产生毒性作用,产生过量ROS,引起MMP降低可能是机制之一。
出版日期 2020年08月10日(中国期刊网平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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