简介：摘要目的对1型糖尿病（T1DM）患者含NLR家族CARD域蛋白4（NLRC4）基因外显子及外显子内含子交界区的罕见变异进行鉴定，并探讨其对基因功能的影响。方法选取2017年8月到2020年9月中南大学湘雅二医院代谢内分泌科508例T1DM患者作为病例组，男264例，女244例，年龄［M（Q1，Q3）］为27（11，43）岁。同时选取同期体检科527名健康对照者，男290名，女237名，年龄［M（Q1，Q3）］为47（36，60）岁。对T1DM患者和健康对照者的NLRC4基因的外显子区域进行捕获测序，并进行一代测序验证。构建NLRC4基因野生型和突变型质粒，转染293T细胞，采用免疫印迹试验（WB）检测NLRC4蛋白表达量以及含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶前体（procaspase-1）切割产物含量。在转染野生型或突变型NLRC4质粒的293T细胞中加入放线菌酮（CHX），检测NLRC4蛋白降解情况。使用免疫荧光检测NLRC4蛋白质的定位。酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞上清白细胞介素（IL）-1β浓度。结果测序结果显示，4例患者及2名健康对照者NLRC4基因的3号外显子存在杂合变异c.208C>T；2例患者4号外显子存在杂合变异c.1564T>C，1例患者4号外显子存在c.1219G>C；这3种变异可能为T1DM的致病性变异。NLRC4野生型和c.208>T、c.1564T>C、c.1219G>C突变型质粒转染的293T细胞中，NLRC4蛋白表达水平、降解速率、定位以及procaspase-1的切割产物含量无明显改变；但转染c.1219G>C、c.208C>T突变型质粒的293T细胞分泌的IL-1β浓度［M（Q1，Q3）］分别为15.25（12.98，17.52）、15.44（13.81，17.07）ng/L，均低于野生型质粒的18.70（16.59，20.81）ng/L（P=0.020、0.010）。结论NLRC4基因外显子罕见变异c.208C>T、c.1564T>C和c.1219G>C可能不改变蛋白质的表达水平、蛋白质的降解及定位，但c.208C>T和c.1219G>C错义突变可能抑制了炎症因子IL-1β的产生，从而对基因功能产生影响。

简介：摘要目的探索新辅助免疫治疗对可切除的非小细胞肺癌患者肺功能的影响及疗效。方法回顾性收集2018年3月至2021年9月期间在上海交通大学附属胸科医院术前接受新辅助免疫治疗的30例肺癌患者的资料。对新辅助免疫治疗在围手术期的疗效和安全性进行评估，比较新辅助治疗前后患者肺功能的变化。结果30例患者年龄为（61±8）岁，均为男性。接受新辅助免疫治疗的患者主要病理缓解（MPR）率为43%（13例），完全病理缓解（pCR）率为37%（11例），疾病控制率（DCR）97%（29例），客观缓解率（ORR）67%（20例）。治疗后1秒用力呼气容积（FEV1）为（2.59±0.63）L，FEV1占预计值的比例（FEV1%pred）为85.27%±15.86%，均高于治疗前［分别为（2.48±0.59）L、81.73%±15.94%］（P=0.013、0.022）。治疗后用力肺活量（FVC）为（3.59±0.77）L，高于治疗前［（3.47±0.76）L，P=0.036］，而治疗前后FEV1/FVC和FVC占预计值的比例（FVC% pred）差异均无统计学意义（P=0.084、0.344）。一氧化碳弥散量（DLCO）占预计值的比例（DLCO%pred）由治疗前的83.61%±13.10%下降到治疗后的78.69%±13.85%（P=0.023）；DLCO%pred下降组与未下降组间术后并发症的发生率差异无统计学意义（3/18比0/6；P=0.546）。结论新辅助免疫治疗能够增加MPR和pCR率；明显提高FEV1及FEV1%pred，但也导致DLCO%pred下降；新辅助免疫治疗并没有增加术后并发症的发生率。