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  • 简介:摘要目的探讨去甲斑蝥素(NCTD)体外对骨巨细胞瘤(GCTB)细胞活性、侵袭能力及凋亡的作用及其相关机制。方法收集复旦大学附属华山医院2018年1月—2019年3月骨科3例GCTB患者的术中肿瘤组织标本,其中男2例、女1例,年龄分别为35岁、40岁、27岁,Campanacci影像学分级均为2级。(1)将GCTB标本组织进行原代细胞分离、培养、鉴定。(2)将制备好的GCTB细胞分为对照组及4个浓度NCTD组,其中NCTD组分别加入5、10、20、40 μg/mL的NCTD溶液200 μL;对照组加入α-MEM细胞培养基200 μL。培养后在显微镜下观察各组的细胞形态,采用CCK-8法检测各组细胞的活性。(3)将制备好的GCTB细胞分为对照组、5 μg/mL NCTD组、20 μg/mL NCTD组,采用Transwell实验检测各组细胞的侵袭能力,采用流式细胞术检测各组细胞的凋亡率,采用caspase-3、caspase-9酶活性检测试剂盒检测各组细胞中caspase-3和caspase-9的酶活性,采用DHE染色检测GCTB细胞中活性氧(ROS)水平,采用JC-1染色检测GCTB细胞线粒体膜电位水平,采用Western blot检测相关凋亡蛋白cleaved caspase-3、caspase-3、cleaved caspase-9、caspase-9、B细胞淋巴瘤相关蛋白X(Bax)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)的表达情况。结果(1)GCTB组织标本经体外分离培养、传代后,镜下多为不规则形的间质细胞细胞核周围CD68表达阳性,提示所提取分离细胞为GCTB细胞。(2)GCTB细胞活性检测,显微镜下观察显示,NCTD对GCTB细胞的增殖有抑制作用,随NCTD浓度的增加,细胞逐渐出现皱缩、悬浮,逐渐丧失原有形态;CCK-8检测结果显示,对照组、5 μg/mL NCTD组、10 μg/mL NCTD组、20 μg/mL NCTD组、40 μg/mLNCTD组GCTB细胞的存活率分别为100%、76.45%±9.86%、62.34%±10.21%、39.74%±8.36%、25.54%±7.18%,随着NCTD浓度的增加,细胞存活率逐渐降低,各组间比较差异有统计学意义(F=75.716, P<0.01)。(3)Transwell小室细胞侵袭能力检测,对照组、5 μg/mL NCTD组、20 μg/mL NCTD组侵袭细胞比例分别为49.33%±9.84%、32.84%±2.73%、8.34%±1.41%,各组间比较差异有统计学意义(F=36.034, P<0.01)。细胞凋亡检测,对照组、5 μg/mL NCTD组、20 μg/mL NCTD组细胞凋亡率分别为4.73%±0.05%、14.23%±0.85%、51.21%±10.47%,各组间比较差异有统计学意义(F=49.183, P<0.01)。caspase-3、caspase-9酶活性的检测,对照组、5 μg/mL NCTD组、20 μg/mL NCTD组caspase-3、caspase-9酶活性逐渐增高,各组间比较差异均有统计学意义(F=15.223、30.841, P值均<0.01)。GCTB细胞ROS水平检测,随着NCTD浓度的增加,对照组、5 μg/mL NCTD组、20 μg/mL NCTD组GCTB细胞中ROS的水平明显升高,并呈剂量依赖性。GCTB细胞线粒体膜电位水平检测,对照组、5 μg/mL NCTD组、20 μg/mL NCTD组GCTB细胞胞膜电位的红/绿光强度比分别为2.01±0.11、1.27±0.07、0.79±0.14,各组间比较差异有统计学意义(F=128.641, P<0.01)。凋亡相关蛋白检测,对照组、5μg/mL NCTD组、20μg/mL NCTD组cleaved caspase-3、cleaved caspase-9和Bax蛋白的相对表达量逐渐升高,Bcl-2蛋白的相对表达量则逐渐降低,各组间比较差异均有统计学意义(P值均<0.01);而caspase-3、caspase-9蛋白的表达水平无明显变化,各组间比较差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论NCTD可显著抑制GCTB细胞的体外活性,增加细胞侵袭能力,促进细胞凋亡。其作用机制可能与降低细胞线粒体膜电位、提高细胞活性氧水平、调整凋亡相关蛋白的表达有关。

  • 标签: 骨巨细胞瘤 肿瘤细胞,培养的 去甲斑蝥素 细胞凋亡
  • 简介:摘要目的探讨胰腺血管周上皮细胞肿瘤(PEComa)的影像学表现及临床病理特征。方法收集2013年11月至2017年11月间海军军医大学附属长海医院收治的胰腺PEComa患者的临床资料,检索胰腺PEComa相关文献,分析PEComa相关的影像学表现及临床病理特征。结果长海医院收治胰腺PEComa 2例,文献报道胰腺PEComa 29例,共31例,其中男性3例,女性27例,1例未提及性别。发病年龄为17~74岁,平均48岁。20例病灶位于胰头颈部,11例位于胰体尾部。27例单发,4例多发。病灶长径为1.0~11.5 cm,平均4.1 cm。对病灶囊实性进行描述的23例患者中,18例为实性。对胰管进行描述的21例患者中,14例胰管无扩张。对病灶强化方式进行描述的21例患者中,16例强化程度高于胰腺。结论胰腺PEComas多发生于胰头颈部,病灶偏小,常向胰腺轮廓外突出,边界清,包膜完整,实性多见,增强后强化程度常高于胰腺。

  • 标签: 胰腺 血管周上皮细胞肿瘤 体层摄影术,X线计算机 磁共振成像 诊断
  • 简介:摘要目的用5种细胞遗传学方法对南京192Ir源放射事故患者进行照后第4年随访,筛选回顾性剂量估算指标,为探明电离辐射远后效应提供依据。方法采集事故患者外周血,进行非稳定性染色体畸变(双着丝粒+着丝粒环)、微核和核质桥分析,应用荧光原位杂交技术及G显带方法检测染色体易位,并估算生物剂量。结果荧光原位杂交技术及G显带方法检测染色体易位估算的剂量分别为1.45和1.21 Gy,与事故后短期内估算的生物剂量相近;非稳定性染色体畸变、微核、核质桥估算的剂量分别为0.56、0.45、0.41 Gy,低于事故后短期内估算的生物剂量,其修正系数与时间的变化规律符合幂函数模型。结论荧光原位杂交技术及G显带方法检测染色体易位估算方法,适用于回顾性剂量估算,应用非稳定性染色体畸变进行回顾性剂量估算需用修正系数进行校正。

  • 标签: 染色体畸变 荧光原位杂交 G显带 生物剂量估算 修正系数
  • 简介:摘要:目的:分析人文关怀护理对成人急性淋巴细胞白血病化疗患者负性情绪的改善情况。方法:选取2021年1月-2023年6月我院收治的成人急性淋巴细胞白血病化疗患者80例,分组依据为计算机随机法,对照组实施常规护理、观察组实施人文关怀护理,对比两组负性情绪及遵医行为。结果:护理后观察组负性情绪改善情况显著优于对照组(P<0.05);观察组治疗依从性显著高于对照组(P<0.05)。结论:成人急性淋巴细胞白血病化疗患者在采用人文关怀护理后,可以显著改善其负性情绪,提高治疗依从性,这对于患者的康复进程具有重要的积极影响。

  • 标签: 成人急性淋巴细胞白血病 化疗 人文关怀护理 负性情绪 治疗依从性