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  • 简介:摘要目的探讨周期素结合蛋白(CacyBP)对非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其分子机制。方法选取2016年于济南市中心医院行手术治疗的非小细胞肺癌患的肺癌组织和正常癌旁组织标本各6例,采用Western blot法检测肺癌和正常癌旁组织中CacyBP蛋白的表达水平,Western blot和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常支气管上皮细胞16HBE和不同非小细胞肺癌细胞系(A549、H1299、H460和H1975)中CacyBP蛋白和mRNA的表达水平。将siRNA、siCacyBP-1、siCacyBP-2、慢病毒包装质粒shNC和shCacyBP转染至A549细胞(分别记为siNC组、siCacyBP-1组、siCacyBP-2组、shNC组和shCacyBP组),将对照质粒和Flag-CacyBP质粒转染至A549细胞(分别记为NC组和Flag-CacyBP组)。采用细胞计数试剂盒8法、平板克隆实验以及流式细胞术检测细胞增殖能力以及细胞周期情况,细胞划痕和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot法检测敲低或过表达CacyBP A549细胞中E-cadherin、N-cadherin、Snail1、Vimentin和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)的表达。结果CacyBP蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达水平为0.41±0.23,高于正常癌旁组织(0.11±0.04,P<0.05)。不同非小细胞肺癌细胞系(A549、H1299、H460和H1975)CacyBP蛋白的表达水平分别为0.35±0.01、0.38±0.01、0.32±0.01和0.41±0.01,均高于16HBE细胞(0.03±0.01,均P<0.05);RT-PCR结果与Western blot结果一致。与siNC组[吸光度(A)值为1.54±0.03]比较,siCacyBP-1组和siCacyBP-2组细胞增殖能力降低(分别为1.38±0.04和1.34±0.03,均P<0.05)。shNC组细胞克隆形成数为(41.33±3.21)个,高于shCacyBP组[(22.00±3.61)个,P<0.05]。shCacyBP组细胞G1期占比为(61.35±5.45)%,高于shNC组[(49.61±1.54)%,P<0.05];S期占比为(25.41±3.21)%,低于shNC组[(38.68±0.46)%,P<0.05]。shCacyBP组细胞迁移率为(12.67±0.71)%,低于shNC组[(35.50±2.07)%,P<0.05]。shNC组细胞迁移和侵袭的数量分别为(406.33±7.37)个和(92.33±8.50)个,高于shCacyBP组[分别为(224.67±10.01)个和(66.00±7.94)个,均P<0.05]。与siNC组相比,敲低CacyBP的表达,E-cadherin的表达水平升高,N-cadherin、Vimentin、Snail1和p-Akt的表达水平降低(均P<0.05)。与NC组相比,Flag-CacyBP组E-cadherin的表达水平降低,N-cadherin、Vimentin、Snail1和p-Akt的表达水平升高(均P<0.05),PI3K/Akt通路抑制剂LY294002可逆转上述结果。结论CacyBP通过调控Akt通路的活性促进非小细胞肺癌细胞的增殖和侵袭。

  • 标签: 癌,非小细胞肺 钙周期素结合蛋白 增殖 侵袭
  • 简介:摘要目的探讨周期素结合蛋白(CacyBP)对非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其分子机制。方法选取2016年于济南市中心医院行手术治疗的非小细胞肺癌患的肺癌组织和正常癌旁组织标本各6例,采用Western blot法检测肺癌和正常癌旁组织中CacyBP蛋白的表达水平,Western blot和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常支气管上皮细胞16HBE和不同非小细胞肺癌细胞系(A549、H1299、H460和H1975)中CacyBP蛋白和mRNA的表达水平。将siRNA、siCacyBP-1、siCacyBP-2、慢病毒包装质粒shNC和shCacyBP转染至A549细胞(分别记为siNC组、siCacyBP-1组、siCacyBP-2组、shNC组和shCacyBP组),将对照质粒和Flag-CacyBP质粒转染至A549细胞(分别记为NC组和Flag-CacyBP组)。采用细胞计数试剂盒8法、平板克隆实验以及流式细胞术检测细胞增殖能力以及细胞周期情况,细胞划痕和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot法检测敲低或过表达CacyBP A549细胞中E-cadherin、N-cadherin、Snail1、Vimentin和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)的表达。结果CacyBP蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达水平为0.41±0.23,高于正常癌旁组织(0.11±0.04,P<0.05)。不同非小细胞肺癌细胞系(A549、H1299、H460和H1975)CacyBP蛋白的表达水平分别为0.35±0.01、0.38±0.01、0.32±0.01和0.41±0.01,均高于16HBE细胞(0.03±0.01,均P<0.05);RT-PCR结果与Western blot结果一致。与siNC组[吸光度(A)值为1.54±0.03]比较,siCacyBP-1组和siCacyBP-2组细胞增殖能力降低(分别为1.38±0.04和1.34±0.03,均P<0.05)。shNC组细胞克隆形成数为(41.33±3.21)个,高于shCacyBP组[(22.00±3.61)个,P<0.05]。shCacyBP组细胞G1期占比为(61.35±5.45)%,高于shNC组[(49.61±1.54)%,P<0.05];S期占比为(25.41±3.21)%,低于shNC组[(38.68±0.46)%,P<0.05]。shCacyBP组细胞迁移率为(12.67±0.71)%,低于shNC组[(35.50±2.07)%,P<0.05]。shNC组细胞迁移和侵袭的数量分别为(406.33±7.37)个和(92.33±8.50)个,高于shCacyBP组[分别为(224.67±10.01)个和(66.00±7.94)个,均P<0.05]。与siNC组相比,敲低CacyBP的表达,E-cadherin的表达水平升高,N-cadherin、Vimentin、Snail1和p-Akt的表达水平降低(均P<0.05)。与NC组相比,Flag-CacyBP组E-cadherin的表达水平降低,N-cadherin、Vimentin、Snail1和p-Akt的表达水平升高(均P<0.05),PI3K/Akt通路抑制剂LY294002可逆转上述结果。结论CacyBP通过调控Akt通路的活性促进非小细胞肺癌细胞的增殖和侵袭。

  • 标签: 癌,非小细胞肺 钙周期素结合蛋白 增殖 侵袭
  • 简介:摘要:牙膏通常由摩擦剂、保湿剂、防腐剂等构成,摩擦剂是牙膏的主要成分且含量占牙膏质量一半以上,碳酸是最常用的摩擦剂。碳酸含量测定方法有多种,本文简单叙述不同的测定方法,做出分析并提出改进意见。

  • 标签: 碳酸钙含量 测定方法
  • 简介:摘要:园林作为城市绿化的重要组成部分,在现代社会中扮演着极其重要的角色。随着城市化的不断推进,人们对于宜居环境和生活质量的要求也越来越高,而园林作为城市绿色空间的代表,越来越受到人们的关注。然而,要创造出既美丽又实用的园林空间,并非一项简单的任务。园林的设计与施工是实现这一目标的关键环节。

  • 标签: 园林 园林施工 结合研究
  • 简介:【摘要】目的 研究血浆 FIB、 HCY水平与脑小血管病的相关性。方法 对 2019年 1月 -2020年 2月我院的脑小血管疾病患者 165例进行调查研究,以同期检查的体检人群 165例为对照组,按照头颅核磁情况分为腔隙性脑梗死 (LI)组 77例和脑白质病变 (LA)组 88例, LI组根据病灶数量分为单发组( 1个病灶) 41例和多发组( 2个病灶及以上) 36例, LA组根据  Fazekas 量表 [6] (0-3 级 )分级分为 轻度组36例、中度组 30例、重度组 22例。对比疾病组患者与体检组人群的血浆纤维蛋白原( FIB)、同型半胱氨酸水平( HCY); LI单发组和多发组的 FIB、 HCY; LA组轻、中、重度组的 FIB、 HCY水平。结果 检测后,疾病组患者血清 HCY水平、 FIB高于体检组人群,并且平均年龄和高血压比例也较高, LI组中多发组 HCY水平、 FIB、患者年龄、高血压患者比例较高, LA组重度组患者 HCY水平、 FIB、患者年龄、高血压患者比例均最高,数据差异具有统计学意义, P< 0.05。结论 血浆 FIB、 HCY水平、年龄、高血压都会与脑小血管病发生有联系, HCY、血浆 FIB高低和脑小血管疾病的严重程度成正比,血浆 FIB、 HCY水平可以为诊断脑小血管疾病提供依据,在临床中有重要意义。

  • 标签: 血浆纤维蛋白原 同型半胱氨酸 脑小血管病