简介：目的：观察储存血中自然杀伤细胞（NK）细胞在不同储存时间功能变化。方法：留取10份健康自愿献血者外周静脉血各20ml,ACD-B抗凝,4℃保存。分别于储存第0、1、2、3、4、6天各取血2ml,用淋巴细胞分离液分离单个核细胞（PBMC）;用博纳无血清选择性培养液培养NK细胞;乳酸脱氢酶释放法检测不同储存时间培养的NK细胞对K562细胞杀伤活性;流式细胞术测定不同储存时间培养的NK细胞穿孔素、颗粒酶B和CD107a的表达率。结果：我们在预试验中对储存血NK细胞进行长达30d的对比观察,发现血液储存第6天之后所有的NK细胞已经不能被激活。因此本研究仅观察储存≤6d的NK细胞功能变化。储存2d后的NK细胞激活率和功能有明显下降趋势,随着储存时间延长,NK细胞激活的百分率逐渐减低,至第6天时细胞激活率只达第0天的11.2%（P〈0.01）。储存6d后诱导培养的NK细胞杀伤活性（28.73%）明显低于诱导前（杀伤活性44.45%）（P〈0.05）;血液储存时间对NK细胞穿孔素、颗粒酶B和CD107a的表达有明显影响,储存前穿孔素、颗粒酶B和CD107a分别为：（33.94±2.92）%、（77.11±6.87）%和（80.97±7.76）%,显著高于储存6d后[分别为：（24.53±2.83）%、（63.93±6.56）%和（73.84±7.21）%]（P〈0.05）。结论：储存血中能保持NK细胞功能和活性最长时间为6d;在≤6d时间内NK细胞功能随着存放时间延长而变弱。

简介：目的：研究捐献单采血小板的血液初筛过程中,最佳血小板检测时间。方法：运用瑞典进口CA620血细胞分析仪,分别于采集后1min、5min、10min及30min检测40例静脉血标本的血小板（PLT）和血小板体积（MPV）。结果：在标本采集后的1min、5min、10min及30min进行检测,PLT的检测结果差异无统计学意义（P〉0.05）;但是MPV的检测结果差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：捐献单采血小板的献血者,最佳血小板检测时间为10min。既可以满足血小板检测的准确性,又能缩短献血者的等候时间,提高献血者的献血体验。

简介：目的：对细菌内毒素运用凝胶定性法和动态浊度定量法的检查进行比较。为血站提供在原辅材料内毒素检测时更适合的方法。方法：用鲎试剂凝胶定性法分别做灵敏度复核、干扰试验、供试品的检测,方法用药典规定的生物制品细菌内毒素试验规程。动态浊度定量法分别做标准曲线检验试剂的灵敏度、回收率判断干扰试验、供试品的检测,方法药典规定仪器试验。结果：动态浊度定量法结果易保存,在临界状态下,更容易进行结果的判断。结论：血站在进行细菌内毒素检测时,最好选用定量法。

简介：目的：研究无偿献血拔针后皮下淤血率与按压针眼时间长短的关系,旨在寻求最佳按压时间且有效降低皮下淤血率,减轻献血者的痛苦。方法：将2140例无偿献血者随机分为5组,按压时间分别为3min、4min、5min、6min、10min,观察每组皮下淤血的例数并做记录。结果：5组不同按压时间的效果比较,皮下淤血率3min组与其他4组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,而4min组、5min组、6min组、10min组4组之间比较均差异无统计学意义（均P〉0.05）。结论：无偿献血拔针后按压针眼4～5min较为合适,不但能够有效防止皮下淤血,而且时间不太长,献血者很容易坚持。

简介：目的：明确两种不同检测系统凝血酶原时间-区域性国际敏感度指数（PT-localISI）,并观察localISI对不同检测系统凝血酶原时间-国际标准化比率（PT-INR）可比性的影响。方法：分别采用贝克曼-库尔特ACL-9000和赛科希德SF-8000检测PT,使用国际标准化比率标准血浆对2种检测系统的ISI进行标定,确定其localISI,并分别利用localISI和厂家提供的ISI计算患者和健康志愿者的PT-INR。结果：ACL-9000检测系统的PT-localISI为1.18,SF8000检测系统的PT-localISI为1.11,与厂家提供的ISI存在差异;对口服抗凝剂患者,使用厂家提供的ISI,ACL-9000检测系统和SF-8000检测系统报告的PT-INR差异有统计学意义,而使用PT-localISI,则PT-INR差异无统计学意义。结论：为了保证不同检测系统PT-INR的可比性,必须确定不同检测系统的PT-localISI。

简介：目的：通过对不同储存期去白细胞悬浮红细胞（去白悬红）制备的洗涤红细胞中钾离子浓度（K＋）、游离血红蛋白含量（FHb）以及溶血率的检测,了解去白悬红的储存时间对制备洗涤红细胞质量的影响。方法：收集储存期1周（1w组）、2周（2w组）、3周（3w组）、4-5周（4-5w组）的去白悬红各10袋,手工制备成洗涤红细胞,分别于制备后立即（0h）和（4±2）℃保存24h取样测定其K＋、FHb,并计算溶血率。结果：洗涤后0h,4组K＋含量分别为（0.38±0.04）、（0.44±0.08）、（0.53±0.23）、（0.65±0.20）mmol/L,3w组和4-5w组明显高于1w组、2w组（P〈0.05）;洗涤后保存24h,各组K＋分别为（1.89±0.32）、（1.89±0.60）、（2.02±0.45）、（2.62±0.31）mmol/L,4-5w组明显高于前3组（P〈0.05）,但均低于人体正常K＋上限。无论是洗涤后0h,还是保存24h,FHb、溶血率4-5w组明显高于前3组（P〈0.05）,。而且4-5w组洗涤红细胞保存24h,FHb为（0.90±0.32）g/L,明显高于国标水平。结论：建议尽量避免使用保存期4-5w的去白悬红制备洗涤红细胞,而且制备好的洗涤红细胞应尽快输注,减少红细胞在生理盐水中的悬浮时间。

简介：目的：探讨用法国Sebia公司Capillarys2全自动毛细管电泳（CZE）对血红蛋白定性与定量分析的准确性。方法：采集205例广东地区成人EDTA-K2抗凝血2ml,分别采用高效液相色谱法（HPLC）和capillarys方法各自测定血红蛋白含量。结果：两种方法测定HbA2的准确度,在205例样本中,CZE测定有93%的测定结果与HPLC测定值的百分差异在±20%范围内,与95%相比较,P值为0.1944,差异无统计学意义。其中CZE测得的HbA2异常21例,HbF增高5例,HbA2＋HbF同时增高12例;用HPLC对这205例样本进行复检对照,结果基本一致。检测出HbH7例,HbE7例,HbNewYork5例,HbG-thailand3例,HbBart＇s3例,HbS2例。但是,对于HbA2的定量,用CZE测得的水平高于HPLC。同时,我们观察到CZE较HPLC对HbH和HbBart＇s的检测更为敏感。结论：HPLC和CZE都能能够分离和量化出HbA2和HbF异常增高,是一种快速、准确、可靠的筛查地中海海贫血实验方法,但是两者在鉴定异常血红蛋白时存在区别。

简介：目的：探讨红细胞抗原浓度对固相法ABO血型正定型及Rh（D）血型鉴定的影响。方法：随机选取健康成人O型Rh（D）阴性和AB型Rh（D）阳性个体各5例,采集静脉血3~5ml置于EDTA抗凝管中,将O型和AB型血液配制成不同高低浓度的红细胞悬液,并用固相法进行ABO血型正定型及Rh（D）血型鉴定,同时以10%浓度的红细胞浓度作为对照参考,观察假阳性和假阴性出现的情况及假性结果出现时的红细胞抗原浓度。结果：红细胞抗原浓度超过25%易出现假阳性;红细胞抗原浓度低于2%易出现假阴性;低浓度红细胞抗原对抗B、抗D的影响更明显;高浓度红细胞抗原对抗A的影响更明显。结论：红细胞浓度对对固相法ABO血型正定型及Rh（D）血型鉴定有影响,且高、低浓度对不同单克隆抗体结合抗原的能力影响不尽相同。

简介：目的：探索应用免疫磁珠法富集母体外周血DNA并预测其胎儿RHD血型。方法：采集96例来自武汉大学中南医院产前诊断确诊为RHD阴性孕妇外周血,使用免疫磁珠法和血液DNA提取试剂盒（QIAgeneDNA法）抽提母体外周血DNA用以提取胎儿DNA。通过测定母体血浆中的SRY和STR来证实是否获得胎儿DNA,同时使用荧光定量PCR（RQ-PCR）扩增胎儿RHD基因外显子7,预测胎儿RHD血型。结果：通过免疫磁珠法,胎儿DNA的总提取量提高了1.8倍。配对四格表2检验结果显示免疫磁珠法在准确度方面与QIAgeneDNA法相较,妊娠早期（≤14周）2种方法差异有统计学意义（P〈0.05）,而妊娠中晚期（〉14周）2种方法差异无统计学意义。另外,使用免疫磁珠法提取DNA预测胎儿RHD血型时,有86例结果与胎儿RHD血清学方法鉴定一致,使胎儿RHD血型预测的准确率高达89.6%。结论：使用免疫磁珠法提取胎儿DNA不仅能够改善胎儿DNA的总提取量,同时还可以提高妊娠早期胎儿RHD血型预测的准确率,为RHD血型不合导致的新生儿溶血病的早期诊断和治疗提供更好的试验基础。

简介：目的:用全自动微孔法代替传统方法检测梅毒抗体,并对改进法进行对比分析和评价。方法:用全自动酶免分析仪法与传统甲苯胺红卡片试验(TRUST)法对比检测了75例梅毒患者和1061份献血员的血清,不符合者用螺旋体血球凝集试验(TPHA)法验证。对18000份献血员标本用改进的方法检测,并与传统方法对比,用TPHA法验证。结果:改进方法与传统方法相比,75例梅毒患者血清均呈阳性结果,但改进方法比传统法的凝集颗粒大而均匀,更易判读。在1061份献血员血清中,用改进的方法检出2份阳性血清,并经TPHA证实,用传统方法则判为可疑血清。用改进方法在18000份献血员的血清中的7份标本呈阳性,TPHA方法亦为阳性,而传统方法3例呈阳性;2例可疑,2例阴性。结论:改进的全自动微孔板法比传统方法具有敏感性高、特异性好、自动化程度高、易于标准化等优点,适合献血员筛查和临床大批量梅毒患者标本的检验。

简介：目的：分析ELISA法检测HIV抗体的室内质控,总结失控原因,加强实验室管理,保证检验结果准确可靠。方法：运用L-J质控图,结合Westgard多规则质控法,进行室内质控及分析。结果：2013-01-2014-10共检测2033批次,其中警告57次,失控29次,分别占质控总数的2.80%和1.42%。其中随机误差10次,系统误差19次,分别占质控总数的0.49%和0.93%。22个RCV处于9.72%~22.85%,其中21个均处于20.00%以内,1次是22.85%。结论：ELISA法影响因素较多,要严格按照操作规程,加强室内质控,以保证检验结果的准确性。

简介：目的：建立SYBRGreenⅠ实时荧光PCR定量检测人POT1基因的方法。方法：依据人POT1基因及参照基因TBP基因序列设计引物，以人类乳腺癌细胞系MCF-7总RNA逆转录合成的cDNA为模版，以TBP基因为参照基因，应用SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR检测POT1基因的表达。结果：POT1和TBP基因熔解曲线为单峰，无杂峰及二聚体。POT1基因及参照基因TBP基因扩增效率相同（直线斜率0．0171〈0．1）。POT1基因批内变异与批间变异分别为1.3％和2.1％；TBP基因批内变异与批间变异分别为1．2％和2．6％。结论：建立了SYBRGreenⅠ实时定量检测人类POT1基因的方法，该方法简单快速，经济，灵敏度高，特异性和重复性好，可用于人类POT1基因的定量分析。

简介：目的：了解Dombrock血型Do^a和Do^b基因在汉族人群中的分布。方法：采用PCR—SSP技术对Dombrock血型进行Do^a和Do^b基因分型。结果：248例Dombrock血型Do^a的基因频率为0．0867，Do^b的基因频率为0．9133。结论：248例Dombrock血型Do^a及Do^b的基因频率分别为0．0867和0．9133。PCR—SSP技术可以较好的对Dombrock血型进行DO基因分型。

简介：目的：建立并改良磁珠提取基因DNA的方法,以应用于HLA常规测序分型。方法：使用磁珠法自动提取系统从全血中提取基因组DNA,利用DNA定量仪测定DNA浓度与纯度,利用测序仪对PCR扩增产物进行测序及相关的分析软件进行HLA分型结果分析。比较改良前后DNA浓度与纯度、HLA分型结果成功率、信噪比及测序胶图的反应格局。结果：改良后96份DNA浓度的均一性、纯度均优于改良前;32份HLA分型结果中HLA-A、B位点成功率改良后高于改良前,差异有统计学意义（P〈0.01）;改良后32人份HLA-B第二外显子信噪比（N/S）合格率均高于改良前,差异有统计学意义（P〈0.01）;改良后32份分型胶图反应格局均优于改良前。结论：改良磁珠提取DNA法能稳定、可靠地应用于HLA测序分型,具有快速、高通量化的特点和广泛的应用前景。

简介：目的:探讨微柱凝胶抗人球蛋白法(MGT-AGT)替代Coombs试验检测IgG抗体的敏感性和对临床患者血液标本直接抗人球蛋白试验(DAT)阳性检出率。方法:采用MGT-AGT法对不同浓度的DAT阳性标本或IgG抗D致敏红细胞及IgG游离抗D抗体进行实验比较,并用MGT-AGT法、凝聚胺试验(MPT)和Coombs试验,对81例临床患者的血液标本DAT阳性检出率进行了比较。结果:对于DAT阳性标本或IgG抗D致敏的红细胞的检测,MGT-AGT法在1:128稀释时可以检出,MPT法在1:32稀释时可以检出,Coombs试验在1:32稀释时可以检出。对于IgG游离抗D抗体的检测,MGT-AGT法在1:32稀释时可以检出,MPT法在1:16稀释时可以检出,Coombs试验在1:16稀释时可以检出。对于81例临床患者血液标本DAT阳性的检出率,MGT-AGT法为:免疫性溶血性贫血患者87.8%,新生儿溶血病患者68.2%,系统性红斑狼疮患者55.5%;MPT法分别为75.6%、54.5%和33.3%;Coombs试验分别为78.1%、54.5%和11.1%,MGT-AGT法的敏感性高于MPT法和Coombs试验(P<0.01)。结论:MGT-AGT法检测DAT阳性标本、IgG抗D致敏的红细胞、IgG游离抗D抗体的敏感性和对临床患者血液标本DAT阳性的检出率均高于MPT法和传统的Coombs试验。

简介：目的：评价一种直接从标本中快速检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的实时荧光PCR方法。方法：临床送检标本中筛选出46份金黄色葡萄球菌阳性的标本,进行实时荧光聚合酶链反应（PCR）检测,并与全自动细菌鉴定仪（VITEK-2Compact）/头孢西丁纸片扩散法进行比较,评价实时荧光PCR方法的敏感性及特异性。结果：VITEK-2Compact分离出金黄色葡萄球菌46株,其中MRSA12株,与头孢西丁纸片扩散法结果一致。实时荧光PCR法检测出金黄色葡萄球菌46株,其中MRSA13株,敏感性及特异性分别为100%（95%CI,75.75,100）,97.06%（95%CI,85.08,99.48）。2种方法有很好的一致性[Kappa=0.945（95%CI,0.839,1.000）]。结论：实时荧光PCR法是一种能从标本中直接检测MRSA的快速,敏感的方法。

简介：目的：为了评价微柱凝胶技术（MGCT）检测抗-D效价。方法：用MGCT和试管抗球蛋白实验（TCT）同时检测38例孕妇血清抗-D效价。结果：MGCT检测抗-D效价高于TCT2～6滴度（平均提高3～4个滴度），MGCT检测抗-D效价灵敏度显著高于TCT，差异有统计学意义（P〈O．01）结论：MGCT法检测抗-D效价是一种灵敏度较高的方法。

简介：目的：探讨玻璃珠柱凝集法在临床应用中鉴定血型的准确性。方法：用全自动血型及配血分析系统和传统试管法分别对我院住院患者22919例抗凝样本进行血型鉴定并比较检测结果的符合率。结果：两种方法的检测结果一致，全自动血型及配血分析系统鉴定血型的准确率达到100％，鉴定结果中Rh（D）阴性为70例，阴性率为0．3％，且鉴定出1例弱D。结论：全自动血型及配血分析系统将血型鉴定从加样到判读整个过程实现了标准化和自动化，能消除许多人为因素造成的错误判定，为安全输血提供了保障。

简介：目的：应用PCR-SSP法对吉林省汉族人群人血小板同种抗原系统（HPA）1～6进行基因及其多态性分布特征研究。方法：用DNA试剂盒提取外周血标本中DNA，通过特异性引物（PCR—SSP）扩增HPA等位基因。检测200名HPAl～6抗原系统共12个抗原的基因分型。结果：200名无偿献血并无血缘关系的吉林省汉族人群HPA基因频率为：HPA-1a0．9900、Ib0．0100；2a0．9300、2b0．0700；3a0．5575、3b0．4425；4a1．0000、4b0．0000；5a0．9900、5b0．0100；6a0．9875、6b0．0125。结论：吉林地区血小板志愿捐献者HPAl～6抗原系统的基因频率符合Hardy-Weinberg遗传定律，与其他地区和国家的同类资料相比显示出种族和地域性差异，由此建立起了吉林地区已知HPA基因型的血小板捐献者资料库。

简介：目的：比较微柱凝胶法与试管法对母婴血型不合新生儿溶血病（HDN）免疫性抗体的检出率。方法：对临床表现为高胆红素血症、疑似HDN的患儿血标本同时用微柱凝胶法和试管法进行直接抗人球蛋白试验、抗体游离试验及抗体放散试验,并对患儿阳性血标本进行血型不规则抗体特异性鉴定及其效价测定。结果：在275例临床表现为高胆红素血症、疑似HDN的患儿血标本中,用试管法检出直接抗人球蛋白试验阳性180例（65.5%）,抗体游离试验阳性197例（71.6%）,抗体放散试验阳性210例（76.4%）;用微柱凝胶法检出直接抗人球蛋白试验阳性224例（81.5%）,抗体游离试验阳性238例（86.5%）,抗体放散试验阳性251例（91.3%）。微柱凝胶法比试管法的凝集强度高1＋～2＋。结论：微柱凝胶法的敏感性略高于试管法,具有操作简便,影响因素少,易于标准化,结果客观及保存时间长等优点。