简介：目的探讨变形链球菌（S．mutans）荧光素酶（luc）基因报告株构建方法，拟为探讨抗菌剂对多菌种生物膜中S．mutans的作用提供研究基础。方法将S．mutansUA159乳酸脱氢酶（ldh）基因及其上游部分约1100000片段克隆至自杀质粒pFW5-luc的多克隆位点，构建重组质粒．并经酶切和测序证实。采用自然转化的方法，实现重组自杀质粒和S．mutansUA159同源序列的单次交换。结果经过聚合酶链反应（PCR）和测序分析，筛选出具有报告活性的S．mutansldh-luc基因荧光报告株。结论成功构建了S．mutansldh-luc基因荧光报告株。

简介：目的：研究生物膜内变异链球菌及其欺骗株密度感应社会欺骗行为的规避模式。方法：通过接种不同比例的欺骗株与野生株进行共同培养构成生物膜,以及将不同细胞量的欺骗株接种入由野生株结成的生物膜中,在混合群体中观察欺骗株定植情况,从而了解欺骗株对整个群体的影响程度。结果：按1∶1000、1∶100、1∶10、1∶1的比例接种欺骗株与野生株菌液,共同培养构成的生物膜中各菌株的活菌计数之比分别为1∶10477、1∶36、1∶28、1∶11;选择细菌密度约为2×106、2×107、2×108、2×109CFU/ml的欺骗株,接种80μl菌液至野生株已形成的生物膜中,共培养24h后欺骗株与野生株的活菌计数之比分别为1∶29878、1∶15、1∶13、1∶8。结论：变异链球菌的欺骗株未能在自然生态中获得定植,该菌形成的生物膜种群可有效规避社会欺骗行为。

简介：目的探讨变异链球菌生物膜成熟初期可溶性蛋白表达情况。方法采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）技术，分析变异链球菌生物膜成熟初期不同时间点（16、18、20、22、24h）菌体可溶性蛋白的表达情况．并通过光学显微镜观察各时间点菌斑生物膜的形态和结构特征。结果镜下见16h形成的生物膜主要由散在微菌落构成．随时间延长其菌落逐渐变大并与相邻菌落融合（18～22h）．最终相互重叠（24h）。比较5个时间点变异链球菌生物膜中菌体可溶性蛋白未见特异表达的蛋白条带．且相同位置的蛋白条带在蛋白表达量上差异无统计学意义。结论本研究条件下，可观察到变异链球菌菌落从聚集到重叠形成成熟生物膜的过程．16-24h成熟初期变异链球菌生物膜中菌体可溶性蛋白表达差异无统计学意义。

简介：目的：研究磁性附着体静磁场对口腔变形链球菌生长的影响。方法：将口腔变形链球菌分为12.5mT和120mT强度的静磁场加载组以及未加载磁场对照组,厌氧培养20h,从培养后第8h开始,每2h进行活菌计数。结果：12.5mT静磁场组变形链球菌活菌数与对照组相比未见显著差异（P〉0.05）,120mT静磁场组细菌活菌数低于对照组（P〈0.05）。结论：12.5mT静磁场对口腔变形链球菌生长无影响,120mT静磁场抑制变形链球菌的生长。

简介：目的：观察变异链球菌在模拟微重力环境下形态学的变化,及对其葡糖基转移酶基因（gtfs）mRNA表达的影响。方法：采用旋转培养系统（rotarycellculturesystem,RCCS）建立模拟微重力细菌培养模型,将变异链球菌分为模拟微重力组和对照组。在37℃厌氧环境（80%N2,20%CO2）下培养24h,收集模拟微重力组及对照组菌体,通过扫描电镜、透射电镜观察细菌的形态学变化;并通过Q-PCR方法检测模拟微重力对变异链球菌gtfB,gtfC,gtfDmRNA表达的影响。结果：扫描电镜图片显示,模拟微重力组细菌之间的不定形胶冻样物质明显少于对照组;透射电镜观察显示模拟微重力组细菌的荚膜部分减少,分裂状态下的细菌两极不对称。模拟微重力条件下变异链球菌gtfB、gtfC、gtfDmRNA表达水平呈下降趋势,与对照组之间差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论：模拟微重力环境下变异链球菌的超微结构有显著改变,对其gtfB、gtfC、gtfDmRNA表达有明显的抑制作用。

简介：龋病是一种慢性进行性疾病,牙菌斑生物膜是龋病发生所依赖的微环境,是龋病的始动因子。变形链球菌是目前公认的主要致龋菌,寻找有效的对抗变链菌生物膜的方法成为目前研究的热点。本文主要在物理、化学及生物三个层面对变形链球菌生物膜的清除方法加以综述,旨在为龋病的防治提供新的思路和手段。

简介：目的探讨htrA、clpP基因缺失对变异链球菌耐酸性的影响。方法变异链球菌标准株及htrA缺陷株、clpP缺陷株培养至对数中期分成两组,一组作为实验组进行5h预酸化处理（pH=5.5）,一组作为对照组在普通乳酪消化胨酵母（TPY）培养液中处理5h,然后将两组菌株在致死性酸环境（pH=3.0）处理3h,每隔1h取菌液采用平板活菌计数法测定活菌数,计算得到生存率,统计学分析。结果3h内,未经预酸化处理三种菌株生存率相比差异无统计学意义（P〉0.05）,预酸化处理后,与标准株相比htrA缺陷株和clpP缺陷株生存率都有下降（P〈0.05）,两种缺陷株相比生存率差异无统计学意义（P〉0.05）,预酸化处理的标准株和htrA缺陷株生存率均明显高于未经预酸化处理（P〈0.05）,预酸化处理对生存率的影响大于两种基因分别缺失（P〈0.05）。结论与变异链球菌标准株相比,htrA缺陷株和clpP缺陷株耐酸能力有不同程度的下降。

简介：目的研究口腔医院颌面外科患者检出细菌的分布和耐药情况，为临床抗菌药物的选用和多重耐药菌的目标监测提供依据。方法收集中山大学附属口腔医院2012年1月至2014年12月颌面外科感染患者检出的菌株，对检出病原菌的分布和耐药情况进行回顾性分析，各年份间耐药率的差异性应用卡方检验统计分析，P＜0.05为差异有统计学意义。结果共检出病原菌689株，革兰阳性菌占31.8%（219/689），革兰阴性菌占68.2%（470/689）。检出总量排名前3位的病原菌为铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯菌和草绿色链球菌，检出量分别为96、67和51株。3个年份所分离的铜绿假单胞菌对头孢二代、三代的耐药率低于10%，对限制级抗菌药物美洛培南（χ2=2.675，P=0.229）、氨曲南（χ2=0.469，P=0.791）的耐药率低于8%。3个年份分离的金黄色葡萄球菌对青霉素的耐药率分别为90.0%、66.7%、95.2%，均高于60%（χ2=7.212，P=0.024）。2012、2013年所分离的阴沟肠杆菌对四环素类、磺胺类、部分头孢菌素类的耐药率超过20%。结论2012—2014年口腔医院颌面外科检出的铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌数量最多，金黄色葡萄球菌和阴沟肠杆菌的耐药情况最为严重。应着重加强对铜绿假单胞菌和肺炎克雷伯菌的感染控制，重点监测金黄色葡萄球菌和阴沟肠杆菌的耐药情况。

简介：目的：比较新型根管冲洗剂MTAD与传统冲洗剂对粪肠球菌的抗菌作用。方法：在离体牙上建立粪肠球菌根管内感染模型,实验组用新型冲洗剂MTAD及3种常用的冲洗剂（2.5%NaClO、3%双氧水、0.2%浓替硝唑含漱液）、对照组用0.9%NaCl溶液冲洗根管。冲洗前、后用吸潮纸尖进行细菌取样培养计数,并做统计学分析。结果：细菌培养计数结果显示,各组根管内细菌数量的差异在冲洗前无统计学意义（P〉0.05）。经过冲洗MTAD组与其他三组相比较,根管内细菌数量最少,有统计学差异（P〈0.05）。结论：MTAD冲洗剂较2.5%NaClO、3%双氧水、0.2%浓替硝唑含漱液对根管内的粪肠球菌有更优异的抗菌效果。

简介：目的:探讨D-亮氨酸对变异链球菌生物膜形成的影响。方法:分光光度计比浊法检测20mmol/LD-亮氨酸对变异链球菌浮游细菌生长的影响;体外构建变异链球菌生物膜模型,通过MTT法评价5、10、20mmol/LD-亮氨酸对变异链球菌生物膜形成的影响,共聚焦显微镜观察不同浓度D-亮氨酸处理后的生物膜形态结构。结果:20mmol/LD-亮氨酸不影响变异链球菌浮游细菌生长趋势,从3h左右进入其对数生长期,在12h到达平台期。MTT法结果表明浓度为5、10、20mmol/LD-亮氨酸对变异链球菌生物膜均有抑制作用,且随着D-亮氨酸的浓度增加,变异链球菌形成生物膜的量明显降低(P<0.05)。激光共聚焦显微镜观察D-亮氨酸对变异链球菌生物膜作用后,其生物膜结构整体分布稀疏,厚度减少。结论:D-亮氨酸对变异链球菌生物膜形成具有抑制作用。

简介：目的：检测并分析变形链球菌耐氟菌株在氟环境下培养时rpl基因表达的改变。方法：分别将变形链球菌亲代菌株及耐氟菌株置于无氟脑心浸液（BHI）培养基,另将耐氟菌株置于含1g/LNaF的BHI培养基中,均培养至11h（对数生长期）、20h（稳定生长期）后提取总RNA并逆转录,采用实时定量RT-PCR技术检测各组变形链球菌rpl基因的表达。结果：与无氟培养比较,高氟培养的耐氟菌株rpl基因表达在对数期无差异（P〉0.05）,而在稳定期表达升高（P〈0.001）;与亲代菌株比较,耐氟菌株在无氟及高氟培养基中rpl的表达量均明显下降（P〈0.001）。结论：氟可以增加稳定生长期的变形链球菌耐氟菌株rpl基因的表达。

简介：目的探讨本课题组前期所构建的变异链球菌（S.mutans）ldh-luc荧光报告株在浮游态及生物膜状态下的活性及代谢状态的有效性,为探讨抗菌剂对多菌种生物膜中S.mutans的作用提供研究基础。方法采用生长曲线、扫描电子显微镜、活菌菌落计数等方法研究浮游态及生物膜状态下S.mutansldh-luc荧光报告株的生长活性及代谢状态,并测定荧光报告株的荧光活性。结果S.mutansldh-luc荧光报告株和野生株生长趋势一致,生物膜内可培养活菌数无差别（4h：F=2.13,P〉0.05;12h：F=1.45,P〉0.05;24h：F=2.72,P〉0.05;48h：F=1.85,P〉0.05）,SEM检测结果显示4、12和24h生物膜形成能力无差异;S.mutansldh-luc荧光报告株从对数生长早期到平台早期荧光表达稳定,荧光量能实时反映活菌数量。结论S.mutansldh-luc荧光报告株和野生株生长能力相似,具有稳定的荧光活性,荧光量能准确反映细菌活菌数量,提示可用S.mutansldh-luc荧光报告株代替野生菌株进行相关实验研究,并可用于实时观测抗菌剂对其的作用。

简介：目的：探讨与分析三氧疗法辅助治疗慢性牙周炎的临床疗效。方法：收集慢性牙周炎患者80例,将患者随机等分为四组（A、B、C、D组）,进行龈上洁治术、龈下刮治及根面平整术后,A组、B组、C组分别用20.0μg·ml~（-1）三氧水、42.2μg·ml~（-1）三氧水、0.12%醋酸氯己定（洗必泰）行牙周袋内冲洗,D组为空白对照组,采用0.9%生理盐水冲洗,术后连续4周每周冲洗一次,通过治疗前后牙周各临床指标（牙龈指数（GI）、菌斑指数（PLI）、出血指数（BI）、探诊深度（PD）、临床附着丧失（CAL））的变化情况,对比分析不同龈下冲洗液辅助治疗慢性牙周炎的临床疗效。结果：术后A组牙龈指数、探诊深度分别为0.65±0.67、1.70±0.73,均显著优于醋酸氯己定组及生理盐水组,差异有统计学意义（P〈0.05）;出血指数为1.40±1.05,疗效优于生理盐水组但无醋酸氯己定组显著,且差异有统计学意义（P〈0.05）;菌斑指数及临床附着丧失分别为0.70±0.73、0.95±0.69,疗效优于醋酸氯己定组,但差异无统计学意义（P〉0.05）;而不同浓度三氧水辅助治疗慢性牙周炎,治疗后牙周各临床指标差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：使用三氧水作为龈下冲洗液有利于改善牙周组织的炎症状态,增强牙周基础治疗在慢性牙周炎中的疗效。

简介：目的：探讨羟基红花黄色素A（HSYA）对骨髓间充质干细胞（BMSCs）体外多潜能性及成骨分化能力的影响。方法：组织贴壁培养法分离培养女性下颌骨来源BMSCs,CCK-8法检测不同浓度的HSYA对BMSCs生长的影响;Westernblot及RTPCR方法检测加入HYSA的BMSCs的多潜能转录因子NANOG、SOX2、OCT4的表达,比较两组细胞的克隆形成率;茜素红染色、Westernblot、实时定量RT-PCR检测空白组、阳性对照组及实验组的体外成骨分化能力。结果：与对照组相比,实验组多潜能因子NANOG、SOX2及OCT4蛋白及mRNA表达水平升高,差异具有统计学意义;体外成骨诱导7d后,实验组BMSCs中Runx2等成骨分化基因表达上升,诱导14d后,钙结节形成较空白组及标准组多。结论：HYSA能促进BMSCs的增殖,同时在Runx2、OCN、OSX、OPN的参与下,诱导其向成骨方向分化。

简介：目的：探讨密度感应拮抗剂呋喃C-30对变异链球菌生物膜早期形成的影响。方法：将体外合成的密度感应拮抗剂呋喃C-30按终浓度10、100μmol/L分别配制于含变异链球菌的牛心脑浸液培养基,37℃微需氧培养24h,形成生物膜后,用生物膜定量分析仪检测生物膜形成的量。结果：100μmol/L呋喃C-30组变异链球菌生物膜的形成受到显著抑制,磁珠成像开始减弱和完全消失的时间均迟于对照组;生物膜开始形成后,其生物膜形成指数低于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：呋喃C-30在100μmol/L浓度时能有效抑制变异链球菌生物膜的形成,其应用可能为龋病防治提供新的思路。

简介：难治性根尖周炎以骨吸收为主要特征之一。粪肠球菌是治疗后根管再感染的重要致病菌，脂磷壁酸（lipoteichoicacid，LTA）是其主要免疫原。本文对近年国内外粪肠球菌诱导骨破坏信号通路的新进展作出综述。

简介：目的探讨口腔变形链球菌（S．mutans）密度感应系统信号蛋白的体外合成及其生物活性。方法采用化学合成法口腔S．mutans密度感应感受态刺激因子（CSP）信号蛋白，通过高效液相色谱仪纯化合成蛋白．质谱分析结构．通过扫描电镜对比观察CSP信号蛋白对S．mutans生物膜形成的影响．分析CSP信号蛋白的生物活性。结果化学合成纯化S．mutansCSP蛋白分子．加入CSP信号肽后．S．mutans生物膜呈团状密集分布．细菌之间存在厚实的黏性胞外分泌物．细菌黏连呈链团状。结论成功合成口腔S．mutansCSP信号蛋白．该蛋白肽具备促进S．mutans生物膜形成的生物活性。

简介：龋病是一种以变形链球菌为主的致龋菌引起的感染性疾病,起始于变形链球菌在牙面的黏附和聚集。使用疫苗诱导机体产生抗体,阻止细菌与宿主细胞受体的黏附和细菌在口腔内定植,可能是防止致龋菌感染的最有效手段。变链菌的黏附相关因子主要有葡萄糖基转移酶（GTFs）,葡聚糖结合蛋白（Gbps）和变形链球菌表面蛋白（PAc）等,针对这些黏附因子设计的防龋疫苗具有广阔的前景。本文就变形链球菌黏附相关分子的特点及其针对性防龋疫苗的研究进展做一综述。

简介：目的通过比较在不同条件培养基中变形链球菌IngbrittC国际标准株及luxS基因缺陷株24h生物膜形成的厚度及平均荧光强度,探讨luxS基因在变形链球菌生膜形成中的硫代谢作用。方法建立以圆形玻片为载体的生物膜模型,通过营养补充实验培养两菌株生物膜,利用激光共聚焦扫描显微镜观察测定两菌株生物膜厚度和平均荧光强度。结果当分别加入一定浓度半胱氨酸、蛋氨酸时,缺陷株生物膜厚度有明显增长,但未恢复至标准株水平;加入半胱氨酸,标准株生物膜厚度有所增加;当加入S-腺苷甲硫氨酸时,缺陷株与标准株生物膜的厚度均降低。结论在变形链球菌生物膜形成中,luxS基因不但具有密度感应功能,在硫代谢中也起着重要作用。

简介：目的：研究不同根管冲洗液残余药量抗菌活性,为选择抑制粪肠球菌细菌生物膜形成的根管冲洗药物提供实参考依据。方法：制备牙本质片样本60个随机分成6组,分别浸泡于0.9%生理盐水（阴性对照组）、2.5%、5.25%次氯酸钠溶液、17%乙二胺四乙酸（EDTA）、10%柠檬酸溶液和2%氯己定溶液中,随后将样本置于400μl粪肠球菌细菌悬液厌氧培养24h后激光共聚焦显微镜观察细菌生物膜形成情况,Bioimage-L软件统计活菌体积并与阴性对照组相比计算每组冲洗液抑制细菌生物膜形成比率。结果：2%氯己定溶液组活菌数最少能抑制99.9%细菌生物膜形成,次氯酸钠溶液组活菌数多抑制细菌生物膜形成能力最差分别抑制13.3%、18.8%细菌生物膜形成,17%乙二胺四乙酸溶液与10%柠檬酸溶液抑制细菌生物膜形成能力次于2%氯已定溶液组分别能抑制43.8%与45.3%细菌生物膜形成。结论：五种根管冲洗液中2%氯己定抑制粪肠球菌细菌生物膜形成能力最强。