简介:目的:构建GFE-1多吠与重组人肿瘤坏死因子d(rmhTNF一仅)融合蛋白(GFE-1-rmhTNF),研究该融合蛋白的体外活性和体内分布。方法:利用基因工程方法,将人工合成的编码GFE—l的寡核苷酸片段连接在rmhTNF—d序列的3’端,转入大肠杆菌中诱导表达,采用Q—SepharoseFF阴离子层析柱和SP—SepharoseFF阳离子层析柱纯化蛋白,SDS—PAGE和Western印迹鉴定,测定该融合蛋白的体外活性,观察其在小鼠体内的分布情况。结果:构建了融合蛋白GFE-1-rmhTNF,并在大肠杆菌中获得高效表达。体外活性实验显示,GFE-1-rⅢhTNF对L929细胞有明显的杀伤活性;体内分布实验证实,GFE-I-rmhTNF在小鼠肺组织的富集远高于肝肾组织。结论:构建了融合蛋白GFE-1-rmhTNF.,可显著杀伤L929细胞并特异性富集于小鼠肺组织。
简介:目的:探讨腹部肠管火器伤后肺脏组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、核因子-κB(NF-κB)的动态变化规律。方法:健康长白仔猪42头随机等分为对照组和腹部肠管火器伤后1h、2h、4h、8h、12h和24h实验组。用免疫组化图像分析法测定各组肺组织TNF-α和NF-κB表达水平,在光镜下观察各组肺脏组织学变化。结果:伤后各组肺组织TNF-α和NF-κB表达水平明显高于对照组,二者于伤后1h至8h内快速上升并,在8h出现高峰(P〈0.05)。伤后各组逐渐出现肺泡腔变窄,肺泡壁增厚;肺充血,肺间质水肿。结论:TNF-α、NF-κB参与了腹部肠管火器伤后机体的病理生理过程,可能是引起腹部肠管火器伤后多器官功能障碍(MODS)的重要因素之一。
简介:DNA聚合酶III是为DNA的复制负责的五eubacterialDNA聚合酶之一双。在DNA聚合酶III核心酶的十个子单元之中,高山哈子单元两个都为polymerizing催化反应DNA海滨。在这研究,我们提取了高山的genomic序列哈从159的子单元定序eubacterial染色体,并且执行了基于顺序的种系发生、结构的分析。我们发现所有eubacterial染色体有至少一座高山哈子单元,哪个形式homodimers或heterodimers。种系发生并且领域高山的结构的分析以及拷贝数字变化哈在每个细菌的子单元显示高山的分类哈子单元进四个基本的组:polC,dnaE1,dnaE2,和dnaE3。这个分类具有在染色体作文分析的本质。我们也巩固了命名惯例在基因注解避免进一步的混乱。
简介:铜绑定,抛锚膜的、细胞的prion蛋白质(PrPC)有二个组成的劈开地点生产不同N终端和C终端碎片(N1/C1和N2/C2)。用表示也人的PrPC,鼠标PrPC或鼠标PrPC的RK13房间带3F4epitope,这研究在endoproteolytic劈开和一个通常认为的PrPC函数上探索了PrPC主要顺序的影响,地图kinase信号transduction,响应外长的铜与或没有使不安的膜环境。PrPC主要顺序,特别在N1/C1劈开地点附近,看起来在这个地点和细胞外的调整信号的kinase1/2(ERK1/2)phosphorylation影响解朊作用的基础层次,与处理激活增加与基础ERK1/2表明一种反的关系。人的PrPC独自响应铜显示出增加的N1/C1劈开,由特定的p38和JNK/SAPKphosphorylation伴随了。到加扣押胆固醇的抗菌素filipin的铜的联合暴露导致了一只老鼠信号蛋白质phosphorylation的PrPC特定的实质的增加,由N1/C1劈开的增加伴随了。怀有人的N1/C1劈开地点的老鼠PrPC基础地并且响应铜假定更似人类的侧面并且改变了膜环境。我们的结果证明在N1/C1劈开地点附近的PrPC主要顺序影响在这个地点处理的endoproteolytic,它显得连接了基础地并且响应铜印射kinase信号transduction。进一步,主要顺序看起来响应外长的刺激在PrPC相关的信号transduction的忠实上授与N1/C1劈开和膜完整的相互的依赖。
简介:C/EBPs增强子结合蛋白是核转录因子,其作用范围广泛,既参与正常的生理代谢过程,又与多种疾病的发生和发展相关,其作用方式多样,对转录有正、负调控作用。C/EBPβ是其第二位成员主要通过对靶细胞基因转录的调节,参与细胞的增殖与分化、肿瘤的发生与凋亡等重要生命活动;其功能受到蛋白酶降解、磷酸化、蛋白质相互作用等多种途径的调控。本文就C/EBPs的调控机理及其与肿瘤的关系综述如下。
简介:目的以大鼠胆源性胰腺炎模型为对象,比较国外相关的评分标准,探讨这一实验模型合理,准确的病理学评定方法。方法48只SD大鼠分善宁(16只),对照(21只)和假手术(11只)不同处理组,胰胆管内注射牛磺胆酸的诱发大鼠急性坏死型胰腺炎,参照Schmidt等普通病理学评分标准并加以改进,结合电镜超微结构观察等,评定不同标准的病理组织学评分的准确性。结果急性坏死型胰腺炎大鼠解剖时见大量红色腹腔渗液,最多者达体重的6%;光镜下见胰腺组织明显出血,腺细胞坏死;小叶破坏,结构紊乱,小叶间隔大量红细胞;肝脏,心脏,肺和肾脏也出现组织充血,出血等,不同处理组的4项组织学评分标准显示Schmidt方法不能显示组间出血的严重程度,炎症,水肿,坏死3项过于繁冗。以高倍镜下间隔红细胞数平均值和分级评分比较,组间出血显示显著性差异。结论1)腹腔大量红色渗液,胰腺组织出血坏死,微血管内微血栓形成和胰外多器官损伤等是这一模型的特征;2)在简化Schmidt评分标准中水肿,坏死,炎症等3项和出血指标以及间隔红细胞数和分级统计的基础上,作者提出新的标准,以更为准确合理地评定大鼠急性坏死型胰腺炎的病理组织学特征。