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  • 简介:摘要以百日咳杆菌Prn蛋白作为抗原,免疫兔制备多克隆抗体,利用多抗与固相载体Sepharose4B偶联,制备亲和免疫层析。结果显色,经三次免疫百日咳杆菌Prn蛋白,兔血清稀释倍数达到105,多克隆抗体与Sepharose4B凝胶偶联制备获得了免疫亲和层析,通过该纯化Prn蛋白,纯化率90%以上。

  • 标签: 百日咳杆菌Prn蛋白 纯化 免疫亲和层析柱
  • 简介:将去氢甲睾酮多克隆抗体同CNBr-Sepharose4B进行偶联,制成了对去氢甲睾酮具有特异性吸附的免疫亲和(IAC),优化了免疫亲和的制备和使用条件;同时用间接竞争ELISA(icELISA)和高效液相色谱法(HPLC)对该免疫亲和的性能进行评价。结果表明:CNBr-Sepharose4B偶联抗体的最佳反应时间为2.5h,抗体最佳初始质量浓度为0.5mg/mL;IAC的容量约为1700ngDMT/g干胶;最适洗脱条件为80%的甲醇-水溶液,平均加标回收率为97.87%。该亲和重复使用3次,回收率仍不低于90%。

  • 标签: 免疫亲和柱 去氢甲睾酮 间接竞争ELISA HPLC
  • 简介:建立了免疫亲和净化高效液相色谱法测定坚果中黄曲霉毒素B1,B2,G1和G2总量。样品用甲醇—水提取,经免疫亲和色谱纯化,应用液相色谱法检测。试验结果表明:空白样品分别按照5.2,26,52μg/kg添加黄曲霉毒素,回收率为81.3%~96.0%,精密度〈10%,黄曲霉毒素B1,B2,G1和G2的检测灵敏度分别为0.10,0.05,0.10,0.15μg/kg。免疫亲和净化高效液相色谱法测定坚果中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2总量,是一种简单、快速和准确的方法。

  • 标签: 黄曲霉毒素 免疫亲和柱 液相色谱仪 坚果
  • 简介:研究了单克隆免疫亲和-高效液相色谱法测定玉米中玉米赤霉烯酮的方法.样品通过乙腈-水(体积比9∶1)提取,提取液用免疫亲和净化,WatersC18色谱分离,荧光检测器检测,外标法定量.对添加不同含量的玉米赤霉烯酮进行6次重复实验,平均回收率为87.8%~90.9%,变异系数(CV)为8.6%~11.3%,检测低限为0.01mg/kg.

  • 标签: 单克隆免疫亲和柱-高效液相色谱法 测定 玉米 玉米赤霉烯酮 毒素
  • 简介:目的采用免疫亲和净化鱼肉和肝脏中的河鲀毒素,建立高效液相色谱-三重四级杆质谱串联(LC-MS/MS)方法检测鱼肉和肝脏中的河鲀毒素,为水产品中的河鲀毒素检测提供方法依据。方法选用Zic-Hilic色谱(150mm×2.1mm,5μm),以10mmol/L甲酸铵-0.1%甲酸-乙腈为流动相,采用梯度洗脱进行分离。样品用1%乙酸-甲醇沉淀蛋白提取,上清液加入PBS缓冲液后经免疫亲和净化,将洗脱液氮吹至干定容后上机测定。多重反应监测(MRM)方式检测。结果河鲀毒素的线性范围为1.0~1000.0ng/ml,鱼肉和肝脏中河鲀毒素的检出限分别为0.3和0.2μg/kg,回收率在52.4%~72.6%之间。结论本方法特异性强、提取效果好、无基质抑制效应,适用于鱼肉和肝脏中河鲀毒素的痕量检测。

  • 标签: 河鲀毒素 肝脏 免疫亲和柱 液相色谱-串联质谱法 基质效应
  • 简介:摘要侧流免疫层析技术是一种基于层析膜和纳米标记物的即时检测技术,因其简单、快速和低成本被广泛应用于生物医学、病原体检测、食品安全等多个领域。传统的侧流免疫层析依赖于肉眼观察,灵敏度较低,只能提供定性或半定量结果。随着不同类型标记物和灵敏检测设备的应用,侧流免疫层析实现了对待测物的定量、多组分检测。本文旨在结合纳米标记物、层析膜、条带检测仪,阐述侧流免疫层析检测系统的最新研究进展,以期为标记物的选择,层析膜和检测仪器的改进提供依据。

  • 标签: 色谱法,亲和 免疫测定 纳米粒子 生物标记
  • 简介:摘要:构建 FER时间分辨荧光免疫层析检测法,并在临床上加以应用。将 FER抗体及兔 IgG在硝酸纤维素膜上包被,利用荧光微球对抗 FER单克隆抗体及兔 IgH进行标记,并将其作为检测线及质控线制备荧光免疫层析时使用的试纸条。 FER时间分辨荧光免疫层析检测法的灵敏度可以达到 0.5ng/ml,批内 CV达到 3.6-4.6%,批间 CV达到 3.8%-5.0%,平均回收率达到 100.6%,具有良好的热稳定性。将其与电化学发光分析技术相比较时,相关系数可达到 0.8899,。正常参考值范围男性是 100-350ng/ml,女性是 40-260ng/ml。利用这种方法建立的 FER时间分辨荧光免疫层析检验灵敏度较高,且检测十分可靠。

  • 标签: FER 时间分辨荧光免疫层析 检验
  • 简介:在使用CMOS图像传感器获得金免疫层析试务的图像的基础上,使用多副图像平均法和PDE去除试条图像的噪声,再用Snake分割和Hough变换提取金免疫层析试条的检测窗口,然后使用积分扫描法较精确地提取金免疫层析试条的检测线,输出检测线内的总灰度值。实验结果表明,该方法比较理想地实现了金免疫层析试条的定量检测。

  • 标签: 金免疫层析试条 图像 定量检测
  • 简介:目的为进一步了解胶体金免疫层析测定(GICA)法在检测血清中乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的灵敏度及有无“带现象”。方法采用上海实业科华生物技术有限公司的酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒与杭州艾康生物技术有限公司的GICA试条对定值质控品和临床上800份标本进行检测,ELISA法以A值〈0.1为阴性,A值0.1~0.5为弱阳性,A值〉0.5为阳性。再用GICA法对其阳性、弱阳性及随机抽取阴性标本中的80份进行复检。结果在800份标本中经ELISA法检出阳性42份,弱阳性8份,余为阴性。用GICA法复检出阳性45份,弱阳性3份,余为阴性。结论GICA法与ELISA法相比较最大的优点是不受抗原过量的影响,即避免产生“带现象”,因此具有较高的特异性。GICA的灵敏度要比成熟的ELISA法偏低。GICA法检测HBsAg方便、快速。

  • 标签: 胶体金免疫层析法 酶联免疫吸附试验 乙型肝炎病毒表面抗原
  • 简介:摘 要:真菌毒素玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEN)具有遗传毒性和生殖毒性,对大米中ZEN的含量测定具有重要意义。依据CNAS-GL06—2019《化学分析中不确定度的评估指南》,对使用免疫亲和净化样品前处理的高效液相色谱法检测大米中ZEN含量的不确定度进行了评估,为检验检测的质量控制提供参考。经过对不确定度分量的比较,因实验使用万分之一电子天平,由称重引入的不确定度可忽略不计;ZEN测定不确定度的主要来源是体积因素和高效液相色谱仪。

  • 标签: 免疫亲和柱 高效液相色谱 大米 玉米赤霉烯酮 不确定度评估
  • 简介:为解决免疫层析试条定量检测问题,搭建了基于深度置信网络和反向传播神经网络构成的深度学习模型。基于免疫层析试条图像的特点,搭建的模型通过学习本文提出的图像灰度特征、距离特征以及差分特征实现准确的图像分割。最后,对分割的图像进行定量分析实现最终的定量检测。实验结果表明,本文提出的方法能够实现免疫层析定量检测。

  • 标签: 金免疫层析试条 深度学习 定量检测 图像分割
  • 简介:摘要目的分别采用免疫荧光层析法与电化学发光法(ECLIA)检测血清降钙素原并比较结果,从而对免疫荧光层析法进行性能分析。方法选取2016年6月-2016年12月间在我院进行降钙素检查的166份血清标本为研究对象,分别进行电化学发光法(ECLIA)和免疫荧光层析法检测,对检测结果进行统计学分析。结果166例标本在两种不同检测方法下,按照浓度高低可分为阴性组、低风险组、轻度升高组、中度升高组以及高度升高组,并且不同浓度的组别所占比例和对应的组间阳性率在两种检测方法下并无明显差异,无统计学意义(P>0.05);此外所有标本的ECLIA总阳性率为49.40%,与免疫荧光层析法的总阳性率46.99%%之间差异也不明显,无统计学意义(P>0.05)。结论临床上利用免疫荧光层析法与电化学发光法进行血清降钙素原的检测结果相当,而免疫荧光层析法更为操作便捷,且安全性较高,因此值得广泛推广应用。

  • 标签: 免疫荧光层析法 血清降钙素原 性能分析
  • 简介:摘要 : 近年来, DART技术作为一种绿色、广谱、无损的新型原位电离技术,无疑会被更广泛地应用于各个领域的检测分析中。 DART技术在食品、医学、环境学等领域都得到了广泛应用。因此,本文对其近十年来在食品质量与食品安全检测中的应用进行了简单综述。

  • 标签: 食品安全 免疫层析检测技术 进展
  • 简介:用18~20nm胶体金标记抗哈维氏弧菌Vibrioharveyi抗体并制备金标垫,分别将羊抗兔IgG和纯化后的抗哈维氏弧菌抗体包被于NC膜上作为质控线和检测线,组装制作了哈维氏弧菌胶体金免疫层析试纸条,优化了该试纸条的制作条件,测试了其性能。结果表明:所制备的哈维氏弧菌免疫层析试纸条具有较好的特异性,与费尼斯弧菌Vibriofurnissii、维氏气单胞菌Aeromonasveronii、美人鱼发光杆菌Photobacteriumdamselae、类志贺邻单胞菌PlesiomonasShigelloides、鱼肠道弧菌Vibrioichthyoenteri、鳗利斯顿氏菌Listonellaanguillarum、迟缓爱德华氏菌Edwardsiellatarda、海豚链球菌Streptococcusiniae、嗜水气单胞菌AeromonasHydrophila等9种常见水产病原菌无明显交叉反应,检测灵敏度为3×10^5CFU/mL,5~10min即可得出检测结果,具有快速、简便、特异性强和适应基层推广应用等优点,可用于养殖鱼类病原哈维氏弧菌的现场检测。

  • 标签: 哈维氏弧菌 胶体金 免疫层析 试纸条
  • 简介:摘要: 众所周知,食品安全问题一直引起社会关注。当前各大食品生产企业也逐渐加强了对食品安全的检测和监督管理工作,国家和政府对食品质量也提出了更高的标准和要求。我国食品安全问题突出 , 影响社会的和谐稳定发展。因此 , 非常有必要持续开展食品安全监督抽查工作 , 对食品生产经营企业进行严格管控。然而我国目前现有的食品安全检验标准方法繁琐、耗时 , 不适合牛奶、蔬菜及保质期短的食品或原料的筛查。因此 , 在以消费者为导向的食品行业中 , 建立全面、系统的分析方法 , 尤其是快速检测方法、精确的分析方法对于确保食品质量和安全性是必不可少的。

  • 标签: 免疫层析技术 食品安全 快速检测技术
  • 作者: 呼世昂
  • 学科: 医药卫生 >
  • 创建时间:2023-05-31
  • 出处:《中国结合医学》2023年第5期
  • 机构:衡水市第三人民医院检验科,河北衡水053000
  • 简介:随着免疫分析日益广泛应用于以临床为主以及非临床领域的诊断工业(diagnostic industry),免疫分析向两个方向发展:一类为全自动化的免疫分析;另一类为以硝酸纤维膜为载体的快速免疫分析。它实际上属于快速斑点免疫结合分析(dot immunobinding assay,DIBA),始于80年代。

  • 标签: 胶体金;快速检测
  • 简介:摘要:本文就食品检测中胶体金免疫层析技术进行探究,最先针对胶体金免疫层析技术的特点进行阐述,之后就有毒有害物质检测、违禁药品检测、致病菌检测、食品添加剂检测几个方面进行胶体金免疫层析技术的分析,旨在提升食品检测的质量,保障食品安全。

  • 标签: 食品检测 胶体金 胶体金免疫层析