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  • 简介:摘要目的建立一种灵敏、特异的实时荧光定量TaqMan反转聚合链式反应(RT-PCR),用于快速、准确地检测西藏环状病毒(Tibet orbivirus, TIBOV)。方法收集GenBank数据库中全部TIBOV基因序列,利用Clustal X 2.1软件进行比对,根据分析结果选择TIBOV VP4基因保守区域设计特异性引物、探针;以体外转录的RNA为标准品,建立检测TIBOV的TaqMan RT-PCR方法,绘制荧光定量标准曲线;对该方法的特异性、灵敏度、重复性进行评价。结果引物与探针具有良好的特异性,对多种虫媒病毒无交叉反应。检测反应灵敏度为1.0×102拷贝/反应,在1.0×102~8拷贝/反应模板范围内具有良好的扩增曲线,同一样品重复检测循环阈值(Ct)的变异系数均小于1.5%。对西藏自治区、云南省、湖南省和广东省采集的蚊虫样本进行筛查,结果均为阴性。TIBOV模拟样本检出率为100%。结论该方法灵敏度高、特异性强,可用于TIBOV的常规监测。

  • 标签: 西藏环状病毒 实时荧光定量RT-PCR 分子检测
  • 简介:摘要目的LCR与PCR在检测解脲支原体(UU)泌尿生殖感染中的临床意义与差别,方法用LCR法与PCR法对232份临床病历进行检测UU,其中201份来源于男性尿道拭子和女性宫颈拭子,对两种检测方法的检测结果进行了分析。结果LCR检测法检测232份标本,UU阳性率为29%(69/232),PCR法检测232份标本,阳性率为23%(55/232)。LCR与PCR检测有明显差异(P〈0.05〉,结论LCR用于临床男性尿道拭子和女性宫颈拭子在诊断泌尿生殖感染中有极其重要意义。

  • 标签: 支原体,解尿 基因,扩增 连接酶链反应 聚合酶链反应
  • 简介:摘要目的对聚合链反应(FQ-PCR)检测乙型肝炎病毒进行分析,了解其临床应用价值。方法用中山医科大学达安基因诊断中心设计的HBV-FQ-PCR试剂盒对101份临床血清标本同时进行PCR荧光定量和ELISA肝炎标志物检测,对检测结果进行分析。结果经过FQ-PCR检测,24份HbsAgHbeAgHbcAb都阳性的标本,其血清HBV-DNA也全部阳性,HBV-DNA拷贝数范围在1.4×105-7.0×109/ml之间;32份HbsAgHbeAbHbcAb都阳性的标本,阳性率为46.9%,HBV-DNA拷贝数范围在0-8.1×107/ml之间;14份HbsAb阳性的标本,阳性率为7.1%,HBV-DNA拷贝数范围在0-5.0×104/ml之间;18份全阴性的标本,阳性率为5.6%,HBV-DNA拷贝数范围在0-4.9×105/ml之间。结论FQ-PCR定量检测HBV-DNA灵敏度,特异性较高,能基本反映乙肝病毒在体内的真实复制情况,具有较高的临床应用价值。

  • 标签: 聚合酶链反应 定量 HBV-DNAFluorescence quantitative polymerase chain reaction analysis of hepatitis B viru
  • 简介:目的建立食品中沙门菌聚合链反应(PCR)的快速检测方法。方法根据沙门菌invA基因序列设计引物;氯化镁孔雀绿选择性增菌0到8h后,煮沸法提取DNA,用PCR扩增电泳。结果PCR法能特异性检测出食品中的沙门菌,扩增片段为389bp,增菌前的检出限为10^2CFU/g,增菌后为2CFU/25g。结论应用PCR检测沙门菌具有快速、特异、灵敏和简便的特点。

  • 标签: 聚合酶链反应 沙门菌 食品
  • 简介:摘要聚合链反应(PCR)是一种在试管进行的简便而快速的特异性DNA体外扩增技术,其基本原理与细胞内DNA复制的相似,但反应体系相对比较简单。主要应用于传统培养方法不能及时准确检出或敏感性太低或培养时间长的病原体的检测。PCR扩增能力极强、灵敏性极高,微量的样品污染便有可能导致假阳性结果的出现,为此,在实验操作中应谨防污染的发生,并设置严格的对照,以提高PCR结果的正确性。

  • 标签: 聚合酶链反应技术 PCR 操作方法 应用
  • 简介:在本文中主要针对医学检验中聚合链反应的应用和进展做出了深入的探讨与分析,聚合链技术具有精准度高、操作方便等特点,在医学检验领域中得到广泛应用,文中主要从医学检验的不同的领域研究聚合链反应的具体应用,并且提出聚合链反应在医学检验中的具体要求,以此来进一步对医学检验中聚合链反应的应用进行优化,推动本次研究发展的同时,为相关工作人员提供良好的参考依据。

  • 标签: 医学检验 聚合酶反应 应用进展
  • 简介:目的研究聚合链反应分析急性视网膜坏死综合征眼内液病毒DNA的临床价值.方法聚合链反应检测28例37个眼内液标本疱疹病毒DNA,分析检测结果、影响因素及最终诊断.结果发现水痘-带状疱疹病毒DNA15例,单纯疱疹病毒1型DNA3例.适宜检测时间为炎症活动期,不用或短期使用抗病毒药.前房水和玻璃体均可取得可靠结果.结论聚合链反应检测眼内液病毒DNA,方法简便,尤其有助于疑难病例的诊断.

  • 标签: 聚合酶链反应 急性视网膜坏死 致病病毒 影响因素 诊断
  • 简介:摘要聚合链反应技术操作简便且灵敏程度较高,具有良好的特异性,是研究、检测以及鉴定标本中DNA片段的一种重要方式,在医学检验中具有较好的应用价值。本文就聚合链反应技术在医学检验中的实际应用情况进行分析,并对其未来发展进行展望,仅供相关人员参考。

  • 标签: 聚合酶链反应技术 医学检验 应用 展望
  • 简介:目的:筛选出对孢子丝菌结合效率相对较高的探针。方法以50株纯培养的孢子丝菌及标准株为样本,以毛霉、烟曲霉、念珠菌各1株为阴性对照,用聚合链反应-联免疫法(PCR-ELISA)对已报道的5个孢子丝菌特异性探针(U26852、U26866、U26866′、M85053及AF117945)进行筛选。记录各探针与合成DNA片段杂交底物显色与否及免疫测定指数(EI)值。结果PCR产物测序证实5个探针均位于产物序列上;在相同的ELISA条件下,探针U26852显色最强,EI值最高。结论针对28SrRNA的探针U26852是目前与孢子丝菌结合效率相对较高的探针。

  • 标签: 孢子丝菌 探针 聚合酶链反应-酶联免疫法
  • 简介:人类巨细胞病毒(HCMV)在成年人群中感染很普遍,且随年龄增长,感染率明显增高。但多数呈不显性感染或潜伏感染,损伤机体的免疫功能。HCMV的先天性感染或围产期感染常常危害胎儿和新生儿,因此早期准确诊断HCMV感染对指导防治,促进优生优育工作有重要的意义。笔者采用聚合链反应(PCR)技术检测HCMV,现报告如下。

  • 标签: 人类巨细胞病毒 HCMV感染 聚合酶链反应 诊断 年龄增长 潜伏感染
  • 简介:肺炎支原体(MP)是人类呼吸道感染的重要病原体。本文用聚合链反应(PCR)技术自1996年1月—1998年1月检测呼吸道感染的住院和门诊患儿591例,其中肺炎支原体DNA阳性确诊肺炎支原体感染66例,现报告如下。1对象与方法1.1对象591例呼吸道...

  • 标签: 肺炎 肺炎支原体 MP PCR 临床诊断 临床特征
  • 简介:为探讨阜阳地区庚型肝炎病毒感染的现状,采用逆转录-Nested-聚合链反应技术检测HGVRNA。结果在献血员和各类患者中HGVRNA检出率分别是:献血员8.8%,血透患者15.4%,慢性乙型肝炎6.5%,慢性丙型肝炎17.8%,非A-E型肝炎14.2%,提示:HGV感染多为无症状携带者或亚临床型,常与HCV重叠感染并与输血密切相关。

  • 标签: 庚型肝炎病毒 聚合酶链反应 RT-Nested-PCR 阜阳县 血液检验
  • 简介:

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  • 简介:摘要目的探讨真菌游离DNA(cfDNA)聚合链反应(PCR)诊断侵袭性真菌感染的临床价值。方法本研究为前瞻性研究,选取2017年1月至2021年1月宁德市蕉城区医院检验科收治的120例真菌感染患者,男81例,女39例,年龄(52.33±2.69)岁,年龄范围为35~79岁。根据《侵袭性真菌感染诊断标准》将所有患者分为非侵袭性真菌感染组(n=39)和侵袭性真菌感染组(n=81),比较两组患者的半乳甘露聚糖(GM)和cfDNA含量,并对GM和cfDNA的诊断效能进行分析。结果侵袭性真菌感染组患者的GM含量[(0.74±0.37)OD]高于非侵袭性真菌感染组[(0.21±0.05)OD],差异有统计学意义(P<0.001)。侵袭性真菌感染组患者的cfDNA含量[(9 526.33±511.33)GE/ml]高于非侵袭性真菌感染组[(8 014.65±501.45)GE/ml],差异有统计学意义(P<0.001)。cfDNA诊断的灵敏度(98.77%)显著高于GM诊断(86.42%)。结论真菌cfDNA PCR诊断侵袭性真菌感染的灵敏度较高,具有推广价值。

  • 标签: 真菌游离DNA 半乳甘露聚糖 真菌 真菌感染 侵袭性真菌感染
  • 简介:目的探索一种快速、经济、敏感的方法用来诊断泌尿生殖道中淋病奈瑟氏球菌(N.gonorrrhoeae,简称NC)。方法用微孔渗漏法与聚合链反应(PCR)联合检测检泌尿生殖道中淋病奈瑟氏球菌。结果对186例临床标本进行检测,微孔渗漏法阳性为67.2%(125例),聚合链反应阳性为81.2%(151例),培养法阳性为66.1%(123例),且微孔渗漏法不需要特殊仪器,测定时间短,工作量小,灵敏度高。它与培养法二者无显著性差别(P>0.05)。PCR与培养法二者阳性率有显著性差别(P<0.01)。结论因此微孔渗漏法与聚合链反应联合检测NG具有简便、快速、检出率高的优点。

  • 标签: 淋病奈瑟氏菌 聚合酶链反应(PCR) 细菌培养
  • 简介:目的:评价普通聚合链式反应(C-PCR)和荧光定量聚合链式反应(FQ-PCR)检测乙型肝炎病毒核酸(HBVDNA)的临床应用价值.方法:用C-PCR和FQ-PCR分别检测249例乙型肝炎患者和51例健康体检者血清HBVDVA.乙型肝炎血清学标志物用ELISA测定.结果:用C-PCR和FQ-PCR检测HBVDVA阳性率分别为:HBeAg(+)组80.50%和100.00%(P<0.01);抗HBe(+)组17.39%和82.60%(P<0.01);HBeAg(-)抗HBe(-)组14.51%和40.32%(P<0.01).健康体检者两法均为阴性.结论:FQ-PCR对乙型肝炎诊断、传染性的判断和抗病毒药物疗效评价方面比C-PCR更具有临床应用价值.

  • 标签: 普通聚合酶链式反应 荧光定量聚合酶链式反应 乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸
  • 简介:PCR(PolymerasChainReafion)即聚合链反应,于1985年就有报道,是一种模拟特异天然DNA复制过程的核酸扩增法。以DNA为模拟的特异靶序列,在引物介导下促扩增,可以从极少量基因组DNA合成百万拷贝数的某DNA片段。我们应用PCR测试法,对肝病患者及体检的青年工人血清中的乙肝病毒DNA进行有关血清分析及临床研究,获得了可靠数据和临床效果。

  • 标签: 乙肝病毒DNA检测 聚合酶链反应技术 核酸扩增法 DNA片段 DNA合成 复制过程
  • 简介:【摘 要】目的:讨论聚合链反应检测HBV感染患者血清HBVDNA的临床价值。方法:选择103例不同HBV感染患者,对患者的血清HBVDNA进行聚合链反应检测。结果:慢性乙肝,乙肝后肝硬变,原发性肝癌中HBV DNA定量的阳性发生率,含量高于急性乙肝,差异较大(

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  • 简介:摘要为探讨聚合链反应(PCR)DNA扩增对诊断活动性肺结核的临床价值,本文用PCR技术扩增结核杆菌特有的MPB64蛋白基因序列,对121例病人临床标本进行检测,发现34例活动性肺结核中有28例PCR阳性,疑诊为肺结核者33例中有18例阳性,非结核肺疾患54例中有10例阳性,其中有肺结核既往史者阳性6例,有结核接触史者阳性3例。提示PCR阳性并非为活动性肺结核所特有。

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  • 简介:<正>以完全闭管式的PCR和荧光探针技术相结合的实时检测定量PCR方法对110例病毒性肝炎患者血清HBVDNA进行检测。结果:HBeAg阳性/抗HBe阴性患者HBVDNA拷贝数与HBeAg阴性/抗HBe阳性患者或HBeAg阴性/抗HBe阴性患者的拷贝数比较差异有显著性(P<0.05),而后二者比较差异无显著性(P>0.05);HBVDNA拷贝数与肝实质损害指标血清谷丙转氨酶/谷草转

  • 标签: 血清谷丙转氨酶 乙肝病毒 肝实质损害 拷贝数 肝炎患者血清 荧光探针技术