简介：摘要目的探讨咽拭子核酸检测方法在儿童肺炎支原体（MP）感染病原学诊断中的应用价值。方法选取2018年7至10月在浙江大学医学院附属儿童医院呼吸科住院的454例（男210例、女244例）肺炎患儿进行前瞻性研究，入院当天或第2天采集患儿的咽拭子和静脉血，分别采用DNA荧光定量扩增、RNA恒温扩增、MP培养和MP-IgM进行MP病原检测，以MP培养阳性或其余3项检测中2项阳性为MP感染诊断标准并进行二次检测，筛选出MP感染患儿于出院前再次采集咽拭子，采用DNA荧光定量扩增、RNA恒温扩增、MP培养3种方法再次进行MP病原学检测。比较3种检测方法随病情变化的检出率及MP菌量变化，组间比较采用χ2检验。结果454例住院肺炎患儿采用DNA荧光定量扩增、RNA恒温扩增、MP培养和MP-IgM的检出率分别为43.6%（198/454）、43.2%（196/454）、40.0%（180/454）、30.6%（139/454），差异有统计学意义（χ2=20.8，P<0.05）。DNA荧光定量扩增和RNA恒温扩增检出率差异无统计学意义（χ2=0.018，P=0.900），较MP-IgM及MP培养高。以MP培养阳性或其余3项检测中2项阳性为MP感染诊断标准，筛选出MP感染患儿209例。209例MP感染患儿在出院前的第2次MP检验中，MP培养阳性率67.5%（141/209），39.4%（13/33）由阴性转为阳性，27.3%（48/176）由阳性转为阴性。RNA恒温扩增阳性率82.3%（172/209），16.2%（31/191）由阳性转为阴性，66.7%（12/18）由阴性转为阳性。DNA荧光定量扩增阳性率67.0%（140/209），52.9%（18/34）由阴性转为阳性，30.3%（53/175）由阳性转为阴性。DNA荧光定量扩增阳性检测标本中，141例（67.5%）二次检测菌量减少，68例（32.5%）菌量增加。4种方法在非重症组和重症组患儿中的检出率相近，各组间差异均无统计学意义（P均>0.05），在二次检测中，重症组转阳比例仅有RNA恒温扩增高于非重症组，差异有统计学意义（7比5例，P=0.038）。结论咽拭子核酸检测方法在儿童MP感染急性期病原学诊断中具有较高的敏感性和应用价值，DNA荧光定量扩增、RNA恒温扩增的检测结果具有高度一致性，较MP-IgM检测更具优势。急性期重复检测有助于检出第一次检测结果为阴性的MP感染患儿。急性期部分患儿经抗感染治疗后MP菌量未下降。