简介：目的：获得抑制效果好的泛素C端水解酶LI（UCH—L1）基因小干扰RNA（siRNA）干扰载体。方法：根据Gen—Bank中大鼠UCH—L1基因序列设计并合成4对siRNA寡核苷酸序列，将4对寡榱苷酸序列退、k成双链后分别插入siRNA表达载体pcDNA6．2-GW／EmGFP—miR中构建4个siRNA表达质粒，测序鉴定后将4个siRNA表达磺牝分别转染HEK293细胞，利用Western印迹和qPCR方法检测干扰效果；将干扰效果最好的质粒包装成腺病毒，感染大汛血管平滑肌细胞（VSMC），并采用TNF-a干预诱导UCH—Ll表达升高，Western印迹验证干扰效果。结果：测序分析证实4对siRNA寡核苷酸序列分别插入siRNA表达载体pcDNA6．2-GW／EmGFP—miR；qPCR检测与Western印迹均表明第3号siRNA表达载沐对UCH—Ll表达的抑制程度最高，将其包装成腺病毒并转染VSMC能显著抑制TNFd湾导的U（：H—I。l表达升高。结论：构建并筛选出干扰效果好的UCH—LlsiRNA干扰载体。

简介：目的探讨泛素羧基末端水解酶L1（ubiquitincarboxy-terminalhydrolasesL1，UCHL1）调节心肌肥厚发生的分子机制。方法C57BL／6J雄性小鼠（每组6只）用缓释泵持续灌注血管紧张素II（AngII）1000ng／（kg·min）14天，建立小鼠心肌肥厚模型。同时给小鼠腹腔注射UCHL1特异性抑制州LDN5744440μg／（kg·day）。用无创尾压法测定小鼠血压。用M型超声心动仪检测小鼠心脏功能。用WGA染色观察心肌细胞的大小。用实时荧光定量PCR检测心肌组织ANF和BNFmRNA的表达水平。用Westernblot检测心肌肥厚相关奖信号通路蛋白的表达水平。结果与对照组小鼠相比，AngⅡ灌注2周后小鼠收缩和平均动脉血压明显升高，心脏功能代偿性增高（p〈0．01、心脏重量与体重或胫骨长度比率、心肌细胞面积均明显增大（p〈0．01或p〈0．05），心肌肥厚标志物ANF、BNFmRNA的表达水平也明显增高（p〈0．01）。相反，应用UCHL1特异抑制剂LDN57444处理小鼠后可明显抑制AngⅡ诱导的这些作用。同时LDN57444也明显抑制AngⅡ诱导的血管紧张素Ⅰ型受体（ATIR）的表达、ERK1／2和AKT的磷酸化水平的增高。结论UCHL1参与AngⅡ诱导的心肌肥厚，其机理可能通过激活AT1R介导ERK1／2和AKT信号通路。

简介：摘要目的探讨脑梗死患者静脉溶栓疗程中泛素羧基末端水解酶L1(UCH-L1)和缺血修饰白蛋白(IMA)水平的动态变化及临床意义，为临床预测血管再通提供科学指导。方法前瞻性选取2018年1月至2020年10月新乡医学院第三附属医院收治的256例行重组组织型纤溶酶原激活物(rt-PA)静脉溶栓治疗的急性脑梗死(ACI)患者，根据治疗后经颅多普勒超声-脑缺血溶栓血流分级分为再通组233例和非再通组23例，比较两组溶栓前、溶栓后即刻、溶栓后2 h的UCH-L1和IMA水平、美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分，分析UCH-L1、IMA与NIHSS评分相关性及血管再通的相关影响因素，评价各时间点UCH-L1、IMA预测血管再通的价值。结果再通组溶栓前、溶栓后即刻、溶栓后2 h的UCH-L1、IMA水平、NIHSS评分低于非再通组(均为P<0.05)；溶栓前、溶栓后即刻、溶栓后2 h的UCH-L1、IMA与NIHSS评分呈正相关(均为P<0.05)；溶栓前、溶栓后即刻、溶栓后2 h的UCH-L1、IMA与ACI患者静脉溶栓后血管再通相关(均为P<0.05)；溶栓后2 h的UCH-L1联合IMA预测ACI患者静脉溶栓后血管再通的受试者工作特征曲线下面积最大，为0.968，敏感度98.71%，特异度86.96%。结论血管再通ACI患者静脉溶栓疗程中UCH-L1和IMA水平均降低，动态联合监测上述指标变化可为预测血管再通、促进预后改善提供客观手段。

简介：摘要目的探讨血清泛素羧基末端水解酶1(ubiquitin C-terminal hydrolase-L1，UCH-L1)、脑红蛋白浓度与心肺复苏后昏迷患者神经功能预后的关系及预测价值。方法选取2018年2月至2020年6月四川省成都市第三人民医院收治的45例心肺复苏成功后昏迷患者为昏迷组，选取同期收治的62例心肺复苏成功后24 h内意识恢复患者为对照组进行前瞻性研究。入院24 h内均检测血清UCH-L1、脑红蛋白浓度，采用格拉斯哥昏迷(glasgow coma Scale，GCS)和格拉斯哥-匹兹堡脑功能表现分级(cerebral performance category，CPC)评分评估昏迷程度和神经功能预后。Spearman秩相关分析UCH-L1、脑红蛋白浓度与GCS评分、CPC评分相关性。Logistic回归分析影响心肺复苏后昏迷患者神经功能预后的因素，受试者工作特征曲线(receiver operator characteristics curve，ROC)分析UCH-L1、脑红蛋白预测心肺复苏术成功后昏迷患者神经功能预后的价值。结果昏迷组血清UCH-L1[(0.63±0.21) μg/L]、脑红蛋白浓度[(89.34±21.35) mg/L]高于对照组[(0.27±0.08) μg/L，(32.13±9.21) mg/L]，差异有统计学意义(t值分别为12.338、18.846；P均<0.001)。UCH-L1、脑红蛋白在轻型、中型、重型昏迷组依次升高，组间比较，差异有统计学意义(F值分别为86.430、26.958；P均<0.001)。神经功能预后不良组血清UCH-L1[(0.72±0.06) μg/L]、脑红蛋白浓度[(100.35±5.79) mg/L]高于神经功能预后良好组[(0.52±0.08) μg/L、(75.58±6.91) mg/L]，差异有统计学意义(t值分别为9.585、13.086；P均<0.001)。UCH-L1、脑红蛋白与GCS评分呈负相关(rs＝-0.685、-0.669，P均<0.001)，与CPC评分均呈正相关(rs＝0.688、0.670；P均<0.001)。多因素Logistic回归分析结果显示低GCS评分(OR＝0.552，95%CI：0.392~0.776，P<0.001)、高水平UCH-L1(OR＝1.881，95%CI：1.276~2.773，P<0.001)和脑红蛋白(OR＝1.677，95%CI：1.206~2.331，P＝0.001)与心肺复苏后昏迷患者神经功能预后不良独立相关。联合UCH-L1、脑红蛋白预测心肺复苏后昏迷患者神经功能预后不良的AUC为0.954，大于单独UCH-L1、脑红蛋白的0.821、0.790(Z值分别为2.351、2.649，P均<0.05)。结论心肺复苏成功后昏迷患者血清UCH-L1、脑红蛋白浓度均增高，高浓度的UCH-L1、脑红蛋白与昏迷程度加重和神经功能不良有关，可作为神经功能预后评估的潜在生物学指标。

简介：摘要目的研究泛素羧基末端水解酶-1（UCH-L1）抗原表位自身抗体在干燥综合征（SS）筛查诊断中的临床意义。方法用ELISA检测2017年1月至2020年1月于郑州大学第五附属医院和北京大学人民医院就诊的98例SS患者［男17例，女81例，年龄（49.1±12.3）岁］和37名体检健康志愿者［对照组，男6名，女31名，年龄（46.3±5.8）岁］血清UCH-L1抗原表位自身抗体的水平。分析与合成UCH-L1三种潜在的抗原表位肽段，最终抗UCH-L1203-214抗体和抗UCH-L158-69抗体进入研究，比较两组抗UCH-L1抗体水平，并使用Pearson相关分析UCH-L1与患者临床资料的相关性。结果SS组血清中抗UCH-L1203-214抗体水平显著高于健康对照组（108.2±54.3比78.9±25.8，P<0.001）。SS组血清中抗UCH-L158-69抗体水平显著高于健康对照组（86.8±33.3比60.4±21.5，P<0.001）。SS患者血清中抗UCH-L1203-214抗体及抗UCH-L158-69抗体阳性率分别为27.6%（27/98）和25.5%（25/98），健康对照组分别为2.7%（1/37）和5.4%（2/37）。在血清抗UCH-L158-69抗体阳性的SS患者中，血清IgG、γ球蛋白及类风湿因子（RF）水平及抗SS相关抗原B（SSB）抗体阳性率均高于抗UCH-L158-69抗体阴性患者，差异均有统计学意义（均P<0.05）。SS组，在抗核抗体（ANA）、抗RNA结合蛋白（RNP）抗体、抗SSA抗体、抗SSB抗体阴性患者中抗UCH-L1203-214抗体阳性率分别为32.1%（9/28）、27.2%（25/92）、36.4%（12/33）、28.6%（18/63）；抗UCH-L158-69抗体阳性率分别为21.4%（6/28）、30.4%（28/92）、30.3%（10/33）、20.6%（13/63）。血清抗UCH-L1203-214抗体水平与SS患者血清IgA水平呈正相关（r=0.21，P=0.024）；抗UCH-L158-69抗体水平与SS患者血清γ球蛋白、IgG、RF水平均呈正相关（r=0.35、0.33、0.32，均P<0.01）。结论UCH-L1抗原表位自身抗体与SS患者某些临床指标具有相关性，对SS的筛查及诊断具有一定意义。

简介：

简介：目的观察皮肤癣菌的体外蛋白水解酶活性;比较分离自不同感染部位的红色毛癣菌的体外蛋白水解酶活性。方法实验菌株包括来自不同感染部位的红色毛癣菌22株、须癣毛癣菌3株、犬小孢子菌5株,进行体外培养,并利用9-羟基乙酚噻唑标识的酪蛋白和酶标仪检测真菌细胞外蛋白水解酶的活性。结果须癣毛癣菌的体外蛋白水解酶活性高于红色毛癣菌和犬小孢子菌（P〈0.05）,而红色毛癣菌和犬小孢子菌之间无差异（P〉0.05）。红色毛癣菌的细胞外蛋白水解酶活性在分离自浅部感染部位的菌株之间无差异（P〉0.05）,但高于引起毛癣菌肉芽肿的菌株（P〈0.05）。结论不同的皮肤癣菌体外蛋白水解酶活性可能不同;分离自不同感染部位的同一菌种的体外蛋白水解酶活性也有可能不同。

简介：摘要目的对丝氨酸水解酶家族1（FSH1）蛋白在犬小孢子菌中进行亚细胞定位分析。方法以前期构建的犬小孢子菌FSH1质粒及载体pCAMBIA-LRP-增强型绿色荧光蛋白（EGFP）为模板，PCR扩增FSH1基因及EGFP基因；同时利用SnaBI/KpnI对pCAMBIA-LRP-EGFP质粒双酶切获得载体DNA，将扩增的EGFP基因克隆至酶切好的载体DNA中获得EGFP表达载体；将扩增的FSH1基因及EGFP基因克隆至酶切好的载体DNA中获得融合载体Ptrcp-FSH1-EGFP-Ttrcp。通过根癌农杆菌介导的遗传转化方法，用重组质粒转化犬小孢子菌，使融合基因FSH1-EGFP在真菌通用启动子（Ptrpc）和终止子（Ttrpc）调控下在犬小孢子菌中整合型表达，利用激光共聚焦显微镜观察融合蛋白的细胞定位。结果成功构建根癌农杆菌转化系统及犬小孢子菌EGFP表达载体；融合基因FSH1-EGFP在犬小孢子菌中获得整合型表达。激光共聚焦显微镜显示FSH1-EGFP融合蛋白的荧光信号呈颗粒状或团块状集中于犬小孢子菌的细胞质及细胞核中。结论FSH1-EGFP融合蛋白成功定位于犬小孢子菌的细胞质及细胞核中，为进一步明确犬小孢子菌FSH1基因的功能及致病机制奠定了基础。

简介：摘要目的分析三磷酸鸟苷环化水解酶1(GCH1)在体外调控小鼠小胶质细胞(BV2)中环状RNA的相关表达。方法将BV2培养传代后转染病毒，分为低表达GCH1病毒载体组(Ad-shGCH1，n＝3)与对照病毒载体组(Ad-NC，n＝3)两组样本。孵育48 h观察转染效率并利用TRIzol试剂提取总RNA。使用第二代环状RNA(circRNA)高通量测序分析Ad-shGCH1与Ad-NC两组样本，筛选差异表达的环状circRNA。circRNA测序数据使用R包edge R计算基于负二项分布模型的fisher精确检验来确定差异显著性。应用编码-非编码基因共表达(CNC)网络分析对表达差异显著的circRNAs进行生物信息学分析，最后通过反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)验证。结果与对照组比较，Ad-shGCH1中mmu_circ_0001322(实验组CPM值：10.40，对照组CPM值：7.63，P<0.05)、mmu_circ_0000454(实验组CPM值：10.84，对照组CPM值：8.20，P<0.05)、mmu_circ_0001383(实验组CPM值：10.76，对照组CPM值：8.53，P<0.05)、mmu_circ_0000898(实验组CPM值：11.22，对照组CPM值：9.32，P<0.05)发生高于对照组，差异有统计学意义，mmu_circ_0000652低于对照组(实验组CPM值：7.94，对照组CPM值：10.83，P<0.05)(倍数变化>1.2倍)，差异有统计学意义。CNC分析表明mmu_circ_0000652可能通过参与特定的网络或生物学过程参与调控丝裂原活化蛋白激酶14(MAPK14)而发挥作用。结论GCH1调控的circRNA可能参与体外小胶质细胞的炎症过程。

简介：二异丙基氟磷酸酯酶(DFPaseEC3．1．8．2)是存在于微生物、动物及人体内的一类有机磷化合物水解酶，它分为鱿鱼型，Mazur型及OT型三种亚型，它们水解有机磷化合物中的亚磷酸酐键(P-F或P-CN键)，酶粗制剂能有效预防小鼠、猪、豚鼠、猫、猴等有机磷化合物的中毒且长期存活无后遗效应，提示DFPase可作为环境污染及毒剂的解毒酶。

简介：河南农业大学牧医工程学院霍文颖等，用256头健康的杜×长×大三元肥育阉割公猪（体重55kg左右）为试验对象研究肥育猪日粮中添加非淀粉多糖（NSP）水解酶对其生长性能的影响。试验分玉米-豆粕型日粮组（A）、玉米-豆粕型日粮加酶组（B）、小麦-豆粕型日粮组（C）和小麦-豆粕型日粮加酶组（D）4个处理。每个处理4个重复，每个重复16头猪。4个处理的配方营养水平符合NRC要求，且保持一致。

简介：胆盐水解酶的特性及生理功能已成为研究热点。我们探讨了国内外关于双歧杆菌中胆盐水解酶的生化特性、降胆固醇机理及其生理作用几个方面的研究进展,以期对研究双歧杆菌胆盐水解酶,以及双歧杆菌及其制品的开发利用有一定的指导意义。

简介：

简介：菰黑粉菌与寄主互作形成膨大肉质茎——茭白,已成为我国第二大水生蔬菜.作为一种二态性真菌,菰黑粉菌的二型态转换与其致病力密切相关,对茭白孕茭至关重要.研究发现,尿素水解酶可能作用于真菌二型态转换.本文克隆了菰黑粉菌的尿素水解酶编码基因UeUal,发现该基因全长2598bp且无内含子,与宾地瘤黑粉菌的尿素水解酶基因近源.该蛋白的功能区域包含尿素水解酶γ亚基、尿素水解酶α亚基、尿素水解酶β亚基以及酰胺氢区域.利用qRT-PCR检测菰黑粉菌二型态转换过程中UeUal的表达变化,发现该基因在融合菌丝形成后表达量显著性升高,推测该基因与菰黑粉菌二型态转换后期的菌丝生长有密切联系.以上结果为进一步研究菰黑粉菌二型态转换机制及菰黑粉菌与茭白互作机制提供了基础材料.

简介：在预防G类神经性毒剂中毒研究领域，以色列魏茨曼科学院的达恩·S·陶菲克（DansTawfik）教授及其合作者作出了重要发现。一导言G类神经性毒剂及有机磷杀虫剂都是乙酰胆碱酯酶（AChE）抑制剂，对军民生命健康可构成较大威胁。

简介：液化异常或粘稠度增高的不育患者精浆蛋白水解酶活力为540～852U/L,其中20例精浆液化正常组测得精浆蛋白水解酶活力为1326～2628U/L,精浆蛋白水解酶为2286U/L

简介：Ｐ．Ｎ．Ｄｏｗｌｉｎｇ和Ｃ．Ｊ．Ｌｅｎｎａｒｄ证明了含渐近等距于ｌ１子空间的Ｂａｎａｃｈ空间不具有不动点性质．本文以对偶形式给出了Ｂａｎａｃｈ空间合渐近等距于ｌ１或ｃ０子空间的充分必要条件，并证明了当一个Ｂａｎａｃｈ空间含有渐近等距于ｌ∞子空间时它必含有渐近等于ｌ１子空间．

简介：讨论了L1[0,1]空间最佳单调逼近的极端点问题,给出了相应的结果.

简介：国家统计局公布，11月CPI较上年同期增长6.9％，创131个月肺炎的最高水平，刷新了此前于今年8月和10月下的6.5％的近11年高点。

简介：在Tikhonov正则化方法的基础上将其转化为一类l1极小化问题进行求解,并基于Bregman迭代正则化构建了Bregman迭代算法,实现了l1极小化问题的快速求解.数值实验结果表明,Bregman迭代算法在快速求解算子方程的同时,有着比最小二乘法和Tikhonov正则化方法更高的求解精度.