简介:采用社会调查测定与原种场原种群试验测定相结合的方式,利用原种场以前生产记录和现在测定数值相对照.尽量扩大测定的样本量,进行莱芜黑山羊品种特点、产地、外貌特征、生产性能等指标的综合评定。确定合理的数值、指标,体现菜芜黑山羊本来的特征性能。
简介:试验旨在构建表达鸡新城疫病毒(NDV)HN基因的大肠杆菌原核表达栽体。以pMD18-T—HN为模板,通过设计的特异性引物PCR扩增出(NDV)HN基因片段,连接至pMD-18T载体,通过双酶切定向插入原核表达载体pET32a中,转化到感受态细胞Rosetta中,获得表达HN基因的阳性亚克隆重组质粒,用lmmol/LIPTG诱导表达,并对表达产物进行鉴定。SDS—PAGE电泳结果显示,HN基因片段在大肠杆菌Rosetta细胞中实现融合表达,表达产物大小约为90KD左右,western—blotting试验证实其有较好的反应原性。本研究为进一步研究HN蛋白功能结构域的免疫原性和研制鸡新城疫HN基因工程疫苗奠定了基础。
简介:为了研制新型细胞因子制剂,将鸡白细胞介素18(ChIL-18)基因和鸡α-干扰素(ChIFN-α)基因通过多肽氨基酸接头(Linker)连接在一起构成mChIL-18/mChIFN-α融合蛋白基因,并构建原核重组表达载体,以期表达具有生物学活性的融合蛋白。以mChIL-18cDNA与mChIFN—αDNA为模板,通过PCR及PCR重叠延伸技术(SOE)得到mChIL-18/mChIFN-α融合DNA。将回收的DNA克隆于pGEM—TEasy载体,并对其进行了测序。测序结果表明获得了阅读框完整、连接部位正确的mChIL-18/mChIFN—α融合分子DNA。将所克隆的目的片断亚克隆到原核表达载体pQE30,构建重组质粒pQE30-mChIL-18/mChIFN-α。pQE30-mChIL-18/mChIFN—α的成功构建为研制开发新一代的多功能、多靶点的细胞因子制剂奠定了基础。