简介：摘要目的研究高氧暴露和小分子干扰RNA(siRNA)对A549细胞中细胞核转录相关因子2(Nrf2)、NAD(P)H：醌氧化还原酶1(NQO1)表达的影响，探讨其在高氧肺损伤中的作用及其与细胞凋亡的关系。方法将体外培养A549细胞随机分为4组：Ⅰ组为无干扰空气组；Ⅱ组为无干扰高氧组；Ⅲ组为Nrf2 siRNA转染空气组；Ⅳ组为Nrf2 siRNA转染高氧组；将Ⅱ组、Ⅳ组持续暴露于常压高浓度氧(950 mL/L O2，50 mL/L CO2)中；Ⅰ组、Ⅲ组仍置于50 mL/L CO2培养箱中。通过预实验从目的基因靶点siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3(分别加入对应脂质体复合物)中筛选出抑制Nrf2效率最高的Nrf2 siRNA，应用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)、Western blot分别检测4组Nrf2、NQO1的mRNA及蛋白表达水平，应用免疫荧光和激光共聚焦显微镜分析干扰Nrf2后A549细胞中Nrf2、kelch样ECH相关蛋白1(Keap1)、抗氧化物反应元件蛋白的分布，观察各组细胞凋亡情况。结果1．Nrf2 siRNA可抑制Nrf2表达，siRNA-1组、siRNA-2组、siRNA-3组Nrf2 mRNA表达均被抑制，其中siRNA-1组的抑制效率最高(80.57%)。2.Ⅱ组Nrf2、NQO1 mRNA的相对表达量分别为4.553±0.498和5.866±0.582，与Ⅰ组相比，mRNA及蛋白表达量显著增高，细胞凋亡率[(21.67±0.75)%]增加，差异均有统计学意义(均P<0.01)。3.Ⅳ组Nrf2、NQO1 mRNA的相对表达量分别为0.937±0.057和0.789±0.058，与Ⅱ组相比，mRNA及蛋白表达显著减弱，细胞凋亡率[(35.83±0.42)%]进一步增高，差异均有统计学意义(均P<0.01)。结论高氧暴露和siRNA导致A549细胞中Nrf2和NQO1表达异常，提示Nrf2和NQO1参与高氧肺损伤的发病过程；Nrf2、NQO1可能在高氧所致肺损伤及细胞凋亡中发挥保护作用。