简介:以硝酸纤维膜为固相载体,以猪瘟病毒为抗原,确定了Dot—PPA—ELISA检测猪瘟抗体的最佳反应条件。试验表明,猪瘟兔化弱毒经仔猪睾丸原代细胞培养纯化,以0.05mol/LpH9.5CBS缓冲液稀释至浓度为0.98~1.15mg/mL制备诊检抗原膜片;采用4%蛋清蛋白0.05mol/LpH9.5CBS封闭;检测反应稀释液应用0.01MPPBST(含0.1%PEG、0.05Tween-20),酶结合物工作浓度以1:30,底物选取4-氯1-萘酚等为检测猪瘟血清抗体的最佳反应条件。重复试验证明了其检测稳定性好。交叉试验、阻断试验证明了其特异性强.
简介:[目的]避免酶联免疫吸附试验(ELISA)检测HBsAg假阳性报告的发生。[方法)对ELISA法检测HBsAg结果为阳性而金标法为阴性的69份血液标本,用ELISA法和Abbott免疫发光法检测乙型肝炎3系5项免疫指标,并对结果进行分析。[结果]ELISA法检测HBsAg的假阳性率为1.19%,而用同样方法复检后,其假阳性率降至0.06%。[结论]ELISA法检测HBsAg的假阳性大多可通过用同样方法复检并结合乙型肝炎3系的其他免疫指标发现并给予纠正,对少数复检结果仍难以确定者,可用Abbott免疫发光法检测乙肝3系5项免疫指标给予确认。
简介:[目的]分析比较乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)、HIV抗体(抗-HIV)的免疫层析快速试剂在实际应用中的灵敏度、特异度和准确度,为今后的工作提供参考。[方法]对502份健康体检血清标本同时用快速免疫层析法和酶联免疫吸附法(ELISA)检测HBsAg、抗-HCV、抗-HIV,对其灵敏度和特异度进行比较。[结果]与ELISA相比,502份血清标本中HBsAg金标法有2份假阴性,5份假阳性。灵敏度为99.6%,特异度为99.0%,准确度为98.6%;抗-HCV金标法无假阴性,有9份假阳性,灵敏度为100%,特异度为98.2%,准确度为98.2%;抗-HIV硒标法有2份假阳性,灵敏度为100%,特异度为99.6%,准确度为99.6%。[结论]金标法检测HBsAg灵敏度和特异度稍低于ELISA,有漏检和误检现象,而抗-HCV、抗-HIV快速法与ELISA比较灵敏度相当,而特异度稍低,因此,都要结合ELISA结果才可出具最终检测报告,抗-HIV的检测任何一种方法出现阳性时都要进行确认试验。
简介:目的用酶免疫吸附试验(EIA)法检测北京地区婴幼儿腹泻标本中的Noro病毒,试图找到一种简便易行的检测方法,以期应用于临床检测。方法2003年10月至2004年12月在首都儿科研究所附属儿童医院就诊的腹泻患儿粪便标本中抽取167份应用EIA进行Noro病毒抗原检测,其中有61份同时进行聚丙烯酰胺凝胶电泳检测轮状病毒。结果167份粪便标本中,Noro病毒阳性46份,阳性率为27.5%。其中,GⅠ型阳性标本20份,占阳性标本总数的43.5%(20/46);GⅡ型阳性标本19份,占阳性标本总数的41.3%(19/46);另有7份标本为GⅠ和GⅡ型同时阳性,提示为混合感染,占阳性标本总数的15.2%(7/46)。发病年龄以2岁以下患儿为主,占总感染人数的93.5%(43/46)。本组Noro病毒感染性腹泻未见明显的季节性规律。在检测轮状病毒的61份标本中,轮状病毒阳性29份,阳性率为47.5%。在29份轮状病毒阳性标本中,11份(11/61,18.0%)标本检出Noro病毒阳性,提示存在Noro病毒和轮状病毒的混合感染。结论Noro病毒感染在北京地区婴幼儿腹泻中占有重要地位,仅次于轮状病毒。EIA检测Noro病毒简便易行、利于推广。
简介:应用ELISA法对重庆口岸10566份出入境人员进行血清标本两对半检测,对1189份HBsAg阳性血清用DIGCA进行复核检验;对其中328份DIGCA阴性标本再次用ELISA检验,检出39份阳性,289份阴性.DIGCA的敏感性=95.67%,准确性=96.72%,特异性=100%,两种方法的一致性(Kappa值)=91.48%.DIGCA阴性但ELISA是阳性的标本数在各个吸光度区间的构成比分别是(1.5,1.0]17%,(1.0,0.5]50%,(0.5,0.105]100%.DIGCA在(1.5,0.105]区间有一半以上HBsAg不能检出(56.52%),在(1.0,0.105]有77.78%的假阴性,对(0.5,0.105]则基本不能检出.对ELISA两种试剂的假阳性率分别为:34.66%(269/776)和4.84%(20/413).在口岸卫生检疫中,不宜单独用DIGCA检测HBsAg.对ELISA需要选择质量高的试剂,每个实验室最好在使用前亲自做试剂实验室评估.
简介:快速斑点免疫结合试验以微孔滤膜为载体,通过渗滤和毛细管作用,使抗原抗体快速进行反应,而且不需任何仪器与设备,从而使检测方法更为简便迅速。综述了几种常见快速斑点免疫结合试验研究及其应用。
简介:梅毒是由梅毒螺旋体(TP)所感染的一种危害较大的性传播疾病,也是通过血液传播性疾病。我院对受血者输血前、手术前备血以及拟行微创检查者均进行感染性指标的检测,梅毒抗体是其必须检测项目。2003年9月起我们改用酶联免疫双抗原夹心法(ELISA)替代甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)检测梅毒抗体。1年多来共检测10573例。现将ELISA法检测梅毒抗体的结果分析报道如下。
简介:Objective:ToestablisharapidandsimpleassayforthediagnosisofChlamydiatrachomatis(CT)infection.MethodsBALB/cmicewereimmunizedwithSDS-PAGEpurifiedmajoroutermembraneprotein(MOMP)fromCTandthemonoclonalantibodieswereobtainedsubsequently.Two-siteELISAwasdevelopedtodetectCTinfection.Results:Theestablishedassaywasabletodetectaslowas1.248ug/mlMOMPwithinterrunandinrunCV6.9%and3.1%respectively.94%(34/36)ofculture-positivesampleswerefoundtobepositiveinthecurrentexamination,indicatingthehighsensitivityofthisassay.Conclusion:TheassayisapplicableforclinicaldiagnosisofCTinfection.