简介：美国亚利桑那州立大学生物设计研究所的科学家，开发出了世界上第一种完全由自组装DNA纳米结构制成的基因检测平台。该成果发表在了1月11日出版的《科学》（Science）杂志上，它可能对基因芯片技术有着广泛的影响，而且还可能革新在单个细胞内分析基因表达的方式。

简介：将个体DNA提取出来后,按一定方式进行混合,构成混合DNA样品池。这种混合DNA样品可用于病因未明的遗传性及遗传易感性疾病的研究。在研究常染色体隐性遗传性耳聋致病基因时,发现与染色体9q的D9S922和D9S301位点有相关性。此方法比通常的连锁分析法省时省力。在肿瘤相关基因或责任基因的研究、法医学的个体认定、基因突变的检测等方面均显示出实用性,值得推广

简介：

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简介：摘要目的用基于多重PCR（multiplex PCR，mPCR）扩增子的二代测序（next-generation sequencing，NGS）技术（mPCR-NGS）检测MTB的耐药基因突变，并评估其检测石蜡包埋组织标本诊断耐药结核病的临床应用价值。方法选取北京市昌平区结核病防治所2013年4月至2015年10月常规进行了利福平、异烟肼、乙胺丁醇、链霉素、卷曲霉素、卡那霉素、阿米卡星和氧氟沙星比例法检测且具有药敏试验结果的50株MTB临床分离株，包括42株耐药MTB和8株敏感MTB菌株。参考耐药基因数据库及相关文献，针对以上8种抗结核药物主要耐药基因及常见位点设计耐药基因组合，建立有效的检测方案。收集首都医科大学附属北京胸科医院病理科2017年11月至2018年9月耐药结核病患者55例的石蜡包埋组织标本，探针熔解曲线法检测结果为利福平、异烟肼、乙胺丁醇和氟喹诺酮类至少存在一种耐药相关基因突变。首先对已知表型药敏试验结果的MTB临床分离株进行mPCR-NGS检测，验证该方法检测纯菌样本的有效性，再进一步检测结核病患者石蜡包埋组织标本进行临床验证。主要评价指标为敏感度和特异度以及一致性。结果以比例法为金标准，mPCR-NGS检测利福平、异烟肼、链霉素和乙胺丁醇的敏感度分别为95%（38/40）、93%（27/29）、93%（27/29）和72%（13/18），特异度分别为100%（10/10）、95%（20/21）、100%（21/21）和94%（30/32）；二线注射类药物卷曲霉素、卡那霉素和阿米卡星敏感度均为100%（2/2，3/3，3/3），特异度分别为98%（47/48）、100%（33/33）和100%（47/47）；氧氟沙星的敏感度为70%（7/10），特异度为100%（40/40）。总符合率为94%，一致性检验Kappa值为0.87。纳入的55例石蜡包埋组织标本经探针熔解曲线法检测，28例利福平耐药，37例异烟肼耐药，13例乙胺丁醇耐药，17例氟喹诺酮类耐药。mPCR-NGS与探针熔解曲线法比较，利福平、异烟肼、乙胺丁醇和氟喹诺酮类的敏感度分别为100%（28/28）、95%（35/37）、100%（13/13）和100%（17/17）；特异度均为100%（27/27，18/18，42/42，38/38）。两种方法总符合率为99%，一致性检验Kappa值为0.98。结论mPCR-NGS检测MTB临床分离株及结核病患者石蜡包埋组织标本耐药基因突变的敏感度、特异度和符合率较高，有望成为耐药结核病准确、快速的分子病理诊断新技术。

简介：【摘要】目的 探讨聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction ._PCR)基因扩增法检测孕妇滋养细胞中沙眼衣原体感染效果。方法 选取2021年1月-2022年12月本院80例孕妇，冲洗所有孕妇宫颈内口并获得滋养细胞，同时采用PCR基因扩增法检测滋养细胞，加强对沙眼衣原体感染情况的检测，并分析不同孕期阳性率、孕妇产次、年龄与沙眼衣原体感染的相关性。结果 80例孕妇中，经检测阳性者23例，阳性率是29.00%，其中包含孕早期感染、孕中期感染、孕晚期感染分别有5例、6例、12例，占比分别是21.74%、26.08%、52.17%。23例检测为阳性孕妇中，低于25岁感染孕妇5例，25-30岁感染孕妇7例，31-35岁感染孕妇5例，35岁以上6例，占比分别是21.74%、30.43%、21.47%和26.09%。23例检测为阳性的孕妇中，产次为1次者7例，感染率是30.43%，产次为2次者8例，感染率是34.78%，产次为三次者8例，感染率是34.78%。孕妇滋养细胞中沙眼衣原体感染与孕妇孕期有关，与孕妇年龄及产次无关。结论 孕妇滋养细胞沙眼衣原体感染临床检测过程中，PCR基因扩增法的应用可明显提高诊断准确率，而且操作便捷、简单，值得采纳、推广。

简介：摘要本文报道1例发生于64岁男性的TFEB基因扩增性肾细胞癌的病例。TFEB基因扩增性肾细胞癌是一种极为罕见的高级别侵袭性肾细胞癌，其临床特征、生物学行为、形态学、免疫表型及分子病理学特征均不同于TFEB基因重排性肾细胞癌，诊断时需要注意准确区分两者，避免误诊。

简介：摘要本研究旨在构建基于核酸滚环扩增（RCA）的简便快速、超灵敏的光学生物传感技术，并将其运用于结核杆菌耐药相关基因的多重检测。本研究在2020年2月至2021年5月期间，于陆军军医大学第一附属医院检验科，针对异烟肼、利福平和链霉素耐药的高频基因突变位点katG315（AGC➝ACC）、rpoB531（CAC➝TAC）和rpsL43（AAG➝AGG），分别设计锁式探针（padlock probe，PLP）、引物和捕获探针，构建了基于磁珠的固相RCA恒温扩增反应体系，并进行了实验参数的优化。通过多色荧光探针（Cy3/Cy5/ROX）对RCA产物精准捕获与信号放大，实现了对3种突变基因的单管多重检测。进一步对该方法的灵敏度、特异性与线性范围等分析性能进行验证，结果显示同一反应体系中katG315的响应范围为1.0 pmol/L至0.1 nmol/L，rpoB531和rpsL43的响应范围为1.0 pmol/L至50.0 pmol/L和1.0 pmol/L至20.0 pmol/L，且该方法具有较好的特异度与灵敏度，在混合靶标中可精确识别单碱基突变，最低检出限低至1.0 pmol/L；在模拟血清样本的回收实验中，回收率可达95.0%~105.2%。综上，本研究构建的恒温扩增型多重检测方法可快速实现3种耐药突变位点的单管多重检测，该技术成本低廉、简便快速、不依赖大型设备，为病原体耐药基因检测提供了一种新的分析方法。

简介：直接扩增技术具有缩短检验时间、提高灵敏度、减少操作步骤和降低污染风险等优点,故可较大程度地节约人力、物力、财力及时间,因而该技术的发展对数据库建设、重大紧急案件和大规模灾难性事故等均有重要的应用价值.目前,直接扩增已在数据库建设中得到了广泛应用,在案件检验中其应用也在不断深入和拓展.本文对直接扩增技术的特点、商业化扩增试剂盒在直扩中的应用、常见与接触DNA检材的直扩及其影响因素和快速直接扩增技术在法医DNA检验中的研究状况进行了综述,介绍了在采集接触DNA样品时棉签类型和处理试剂对直扩的影响,阐述了游离DNA的发现及其意义,希望能为相关研究和应用提供参考.

简介：摘要目的探讨非结核分枝杆菌病诊治方向。方法本研究筛选30例非结核分枝杆菌种病患者作为本次的研究对象，2017年1月至2017年12月为收治时间，均行传统罗氏结核培养法、DNA扩增基因鉴定组，并对比差异检测方案间的检测速率、准确度情况。结果本文研究数据显示，通过对非结核分枝杆菌病的测定，其DNA扩增基因鉴定技术检测非结核分枝杆菌病的特异度为100％，且确诊时间为（21.25±3.79）h，但传统罗氏结核培养法检测的非结核分枝杆菌的特异度为，确诊时间为（5.51±2.19）周，2组对比具有显著差异，p＜0.05，DNA扩增基因鉴定更具优势性。结论DNA基因鉴定较传统罗氏培养菌型鉴定具有特异、快速等优势，基因检测可明确非结核分枝杆菌亚菌种，传统罗氏方法仅可区分非结核杆菌、结核杆菌菌属，其DNA基因鉴定更具高效，且可行性高，该技术可在基层医院广泛推广，提高其诊治非结核分枝杆菌病的能力。

简介：采用PCR扩增皖南花猪ESR基因140bp的特异片段，对ESR基因PCR扩增的相关因素进行研究，以提高扩增的效率，通过多次实验确定皖南花猪ESR基因的PCR反应条件。

简介：目的与方法：应用聚合酶链反应(PCR)技术对56例肺癌石蜡包埋标本进行C-myc基因的研究。结果：C-myc基因扩增与组织学类型、临床病理分期及淋巴结转移有密切关系(P<0．05)，C-myc基因扩增者．分化程度较低，临床病理分期较晚，淋巴结转移多。同时还发现C-myc基因扩增与预后有明显关系(P<0．05)，C-myc基因扩增者预后较差。结论；提示C-myc基因可以作为判断肺癌预后的检测指标之一。

简介：摘要单基因遗传病种类多而复杂，且有不断增长的趋势，总体发病率较高，临床表现各异，通过产前筛查和诊断，及早阻止致死或严重致残的单基因遗传病患儿的出生，是行之有效的防控策略。基于胎儿游离DNA的无创产前单基因遗传病检测技术已应用于临床，检测的疾病种类不断增加，技术也在不断取得突破，本文就该领域的研究进展做一综述。

简介：目的:通过我市848例临床疑似及确诊病人标本的DNA微阵列法检测,了解我市结核分枝杆菌的耐药情况,为临床诊断和治疗提供依据。方法:采用结核分枝杆菌耐药基因检测试剂盒检测利福平和异烟肼耐药相关基因,采用加入0.5%N-乙酰-L-半胱氨酸优选液化和延长液化时间的方法,对实验进行优化。结果:848份标本中共检出结核分枝杆菌571例(67.33%),结核分枝杆菌的总耐药率为20.02%,MDR-TB占结核分枝杆菌的10.68%。结论:我市结核分枝杆菌耐药情况不容乐观。DNA微阵列法检测结核分枝杆菌的耐药基因能快速高效的为临床诊断和治疗提供依据,对实验的优化能提高耐药基因检出率。

简介：对广东现行家蚕生产品种9·芙×7·湘杂交亲本的基因组进行随机扩增多态性DNA(RAPD)分析.统计了932、7532、芙蓉、湘晖、9·芙、7·湘品种的蚕卵70个随机引物的RAPD扩增标记数,经计算其遗传相似系数,作遗传距离分析,同一系统内的品种间遗传差异小,系统间的品种遗传差异大,与传统的家蚕系统分类的结果完全相符.因此RAPD作为有效的跗标记.可适用于研究家蚕品种的遗传多样性、起源以及系统的演变分化.

简介：结果茴香的RAPD最佳反应体系为25μl的反应体系中,而Taq酶（B）、模板DNA（D）因素对扩增片段亮度影响不显著,B因素第4水平与第1水平之间平均扩增片段数间差异显著

简介：摘要目的建立环介导等温扩增技术（LAMP）用于检测B7-H3基因，以评价肿瘤患者的预后转归。方法收集临床病理阳性样本并用荧光定量PCR检测，然后根据B7-H3基因序列设计LAMP引物并优化反应条件。用LAMP方法检测收集的临床样本，计算阳性率，并比较LAMP和荧光定量PCR的统计学差异。结果建立的LAMP体系特异性和灵敏性良好。通过对临床样本的检测，B7-H3阳性样本的LAMP检测结果和荧光定量PCR差异有统计学意义（P<0.05）。结论LAMP对B7-H3基因的检测具有较好的特异性，操作简便，适合在基层医院应用。

简介：【摘 要】目的：本次研究多通道荧光探针的滚环扩增技术应用在结核分枝杆菌耐药基因的检测中的应用。方法：通过多通道荧光探针(HEX/FAM/ROX)对滚环扩增产物精准捕获与信号放大，实现对三种突变基因的单管多重检测。结果：通过应用多通道荧光探针的滚环扩增技术，同一反应体系中中katG315的响应范围为1.5 pmol/L至0.1 5nmol/L, rpoB531和rpsL43的响应范围为1.5pmol/L至60.0 pmol/L和1.5 pmol/L至25.0 pmol/L,特异度与灵敏度较高，可精确识别单碱基突变；模拟血清样本回收实验中，回收率95.3%-105.5%。结论：多通道荧光探针的滚环扩增技术检测具有较高的特异性，耗时短，灵敏度高的优势，临床应用价值显著。

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简介：DNA/miRNA基因甲基化作为一种新的结直肠癌非侵入性筛查标志物,被证实具有较高的敏感性和特异性,目前有大量有关检测血液、粪便中DNA/miRNA基因异常甲基化筛查结直肠癌的研究,但仅有个别商业化的甲基化基因试剂盒小规模应用于临床实践。本人将对目前有关检测血液/粪便中DNA/miRNA基因异常甲基化筛查结直肠癌的国内外研究进行综述,总结其潜在的临床价值。