简介:为了在肿瘤房间上调查在敏感之间的关联到船边交货ligand(FasL)和圈套受体3的表示水平(DcR3),出现,Fas/DcR3mRNA表示被RT-PCR检测。Anti-DcR3mAb被用来由流动cytometry在肿瘤房间的表面上检测DcR3的表示水平。Caspase-8,caspase-9,caspase-3,Bcl-2expressions被西方的污点分别地分析。到FasL导致的apoptosis的敏感被AnnexinVapoptosis工具包决定。从高度的肿瘤房间到的表面上的DcR3的表情低在BGC823房间是约35.3%,并且21.6%在MCF-7房间分别地。apoptotic率由FasL导致了从对低高在BGC823房间是15.6%,并且58.2%在MCF-7房间分别地。在有导致FasLapoptosis的DcR3的表示层次之间有重要关联。
简介:目的探讨血清诱捕受体3(DeR3)水平与胃癌TNM分期的关系。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测34例胃癌患者、18例外科急性感染患者、28例正常人血清DcR3水平。结果胃癌患者血清DcR3水平明显高于正常人(P〈0.01)和外科急性感染患者(P〈0.01),外科急性感染患者与正常人比较差异无显著性(P〉0.05)。胃癌TNMⅢ、Ⅳ期患者血清DcR3水平明显高于TNMⅠ、Ⅱ期患者(P〈0.01);淋巴结转移患者明显高于无淋巴结转移患者(P〈0.01),远处转移患者明显高于元远处转移患者(P〈0.05),但与分化程度(P〉0.05)、浸润深度(P〉0.05)无关。结论血清DcR3水平与胃癌TNM分期有关,为术前评估胃癌临床分期和判断淋巴结及周围脏器切除范围提供理论依据。
简介:摘要目的研究利用siRNA方法基因沉默人结肠癌SW480细胞dcr3基因的表达,并观察受基因沉默后人结肠癌SW480细胞体外增殖情况。方法利用脂质体将siRNA转染进入人结肠癌SW480细胞系,在细胞内形成小干扰双链RNA,识别并降解dcr3mRNA。通过MTT法检测人结肠癌SW480细胞的增殖抑制情况。结果siRNA方法基因沉默人结肠癌SW480细胞dcr3基因后,其细胞增殖率降低(P<0.05)结论siRNA方法基因沉默人结肠癌SW480细胞dcr3基因的表达后,细胞增殖率降低。
简介:目的:观察DcR3基因小干扰RNA(siRNA)对人结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤DcR3基因表达的影响。方法:建立结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤模型,瘤体注射脂质体与DcR3siRNA混合物,转染DcR3siRNA,免疫组织化学及RT-PCR检测观察DcR3基因的表达。结果:建立了结肠癌SW480细胞裸鼠皮下移植瘤模型;治疗后,治疗组移植瘤明显减小,空白对照组、阴性对照组肿瘤体积显著大于治疗组(P〈0.01);各组肿瘤组织中DcR3基因均有不同程度的表达,治疗组表达程度明显低于阴性对照组及空白对照组(RT-PCRP〈0.05,免疫组化P〈0.01)。结论:人结肠癌SW480细胞在裸鼠皮下有良好的成瘤性;脂质体与DcR3siRNA混合物可特异性抑制结肠癌裸鼠皮下移植瘤内DcR3基因的表达。
简介:摘要目的在肝癌组织切片检查中,使用DNA缺口末端标记(TUNEL)的同时,搭配使用免疫组化DcR3染色方式,分析应用效果。方法选择2014年4月到2015年4月本院以手术方式切除的12例肝癌组织分别切片4张,1号切片单纯进行TUNEL,2号切片单独进行免疫组化诱捕受体3(DcR3)染色,3号切片先免疫组化DcR3染色随后进行TUNEL,4号切片先TUNEL后行合免疫组化DcR3染色,研究DcR3在病变组织中表达形式和细胞凋亡最适合联系方法。结果14例肝癌组织切片样本中,1号切片中可判定11例细胞凋亡状况,2号切片当中有10例阳性,3号切片或者4号切片均能观察到11例细胞凋亡情况、10例免疫组化DcR3染色阳性。结论在同1张肝癌组织切片上使用TUNEL的同时,搭配使用免疫组化DcR3染色的方法,可实现同时判定细胞凋亡与DcR3的表达形式。
简介:目的:克隆COPS3基因cDNA,构建其原核融合蛋白表达载体并表达和鉴定。方法:从培养的人骨肉瘤细胞系SOSP-9607细胞中提取总RNA,经RT-PCR获得COPS3基因。将该基因克隆到pGEM-T-Easy载体中,酶切及测序鉴定。将COPS3基因插入pET28a融合蛋白表达载体中,IPTG诱导表达,进行SDS-PAGE分析。免疫印迹法鉴定COPS3蛋白的表达。结果:cDNA测序证明,获得了COPS3基因cDNA,其序列与Genebank中报道序列完全一致。酶切分析表明,成功构建了含COPS3基因的pET28a融合蛋白表达载体。SDS-PAGE以及免疫印迹法鉴定分析表明,COPS3蛋白获得高效表达,分子质量为51Ku,表达量约占菌体总蛋白的30%。结论:成功克隆和表达了COPS3cDNA。
简介:目的:探讨14—3—3β基因(酪氨酸3-加单氧矽色氨酸5-加单氧酶激活蛋白基因)对卡波氏肉瘤(Kaposigsarcoma,KS)细胞迁移的影响。方法:采用脂质体法将14—3—3β基因稳定转染入BCBL—1(HHV-8positiveandEBVnegativehumanBcells)细胞,Western—Blot检测14—3—3β蛋白的表达,最后利用Transwell法分析14—3—3β基因对BCBL-1细胞迁移的影响(设立空载体组和阴性对照组)。结果:pcDNA3.1/myc—His(-)A-14—3—3β组细胞迁移数目明显高于pcDNA3.1/myc—His(-)A组和阴性对照组,差异具有统计学意义(P〈0.05);pcDNA3.1/myc—His(-)A组和阴性对照组细胞迁移数目相比差异无统计学意义(P〉0.05)。结论:14—3—3β基因能促进KS细胞的迁移。
简介:摘要目的应用cDNA分子克隆测序方法,鉴定中国南方汉族1个KIR3DL3新等位基因。方法采集1例KIR3DL3基因测序结果异常的无偿志愿捐血者的外周血样,提取mRNA并逆转录为cDNA。设计1对具有KIR3DL3基因特异性的PCR引物对cDNA进行扩增,扩增产物纯化后进行分子克隆测序。结果经分子克隆测序,检出1个正常的KIR3DL3*00802等位基因和1个KIR3DL3*064新变异等位基因。KIR3DL3*064与KIR3DL3*00601等位基因的序列最为接近,仅有编码区存在nt1184 C>T错义变异,导致第9外显子中的第374密码子由ACT变为ATT,所编码的苏氨酸(Thr)变为异亮氨酸(Ile)。该等位基因被世界卫生组织HLA因子命名委员会KIR分委会正式命名为KIR3DL3*064。结论cDNA分子克隆测序法能够鉴别常规测序分型中的异常结果,可用于鉴定KIR3DL3新等位基因。
简介:摘要伴皮质下梗死和白质脑病的常染色体显性遗传性脑动脉病(cerebral autosomal dominant arteriopathy with subcortical infarcts and leukoencephalopathy, CADASIL)是一种成年起病的遗传性小血管病,由位于染色体19p13区域的NOTCH3基因突变所致。其临床特点包括反复缺血性卒中、进行性认知损害、偏头痛以及精神异常等。近年来的研究表明,NOTCH3基因EGFr区域突变与CADASIL的病程、临床表现以及影像学特点均存在联系。文章就NOTCH3基因EGFr区域突变基因型、CADASIL临床表型以及二者的相关性研究进展进行了综述,期望为CADASIL的早期诊断以及发病机制研究提供思路。
简介:摘要TBX3基因其转录调控因子在脊椎动物和非脊椎动物的器官发生和形态发生学方面有至关重要的作用,TBX3基因在细胞周期调控、细胞凋亡和肿瘤发生中也发挥着重要的作用1,本文将从TBX3的基本结构、生物学功能、表达调控等方面进行综述。