简介：试验旨在构建表达鸡新城疫病毒（NDV）HN基因的大肠杆菌原核表达栽体。以pMD18-T—HN为模板，通过设计的特异性引物PCR扩增出（NDV）HN基因片段，连接至pMD-18T载体，通过双酶切定向插入原核表达载体pET32a中，转化到感受态细胞Rosetta中，获得表达HN基因的阳性亚克隆重组质粒，用lmmol／LIPTG诱导表达，并对表达产物进行鉴定。SDS—PAGE电泳结果显示，HN基因片段在大肠杆菌Rosetta细胞中实现融合表达，表达产物大小约为90KD左右，western—blotting试验证实其有较好的反应原性。本研究为进一步研究HN蛋白功能结构域的免疫原性和研制鸡新城疫HN基因工程疫苗奠定了基础。

简介：为了研制新型细胞因子制剂，将鸡白细胞介素18（ChIL-18）基因和鸡α-干扰素（ChIFN-α）基因通过多肽氨基酸接头（Linker）连接在一起构成mChIL-18／mChIFN-α融合蛋白基因，并构建原核重组表达载体，以期表达具有生物学活性的融合蛋白。以mChIL-18cDNA与mChIFN—αDNA为模板，通过PCR及PCR重叠延伸技术（SOE）得到mChIL-18／mChIFN-α融合DNA。将回收的DNA克隆于pGEM—TEasy载体，并对其进行了测序。测序结果表明获得了阅读框完整、连接部位正确的mChIL-18／mChIFN—α融合分子DNA。将所克隆的目的片断亚克隆到原核表达载体pQE30，构建重组质粒pQE30-mChIL-18／mChIFN-α。pQE30-mChIL-18／mChIFN—α的成功构建为研制开发新一代的多功能、多靶点的细胞因子制剂奠定了基础。

简介：根据GenBank发表的细粒棘球绦虫G1型Eg95序列合成Eg95抗原基因（HM345604．1），设计并合成一对引物，采用PCR技术扩增Eg95抗原基因，亚克隆到pET-28a原核表达载体，并在大肠埃希菌BL21（DE3）中表达重组蛋白。

简介：采用RT—PCR方法从马流感病毒中国分离株A／马／新疆／07（H3N8）中扩增的HA1基因片段，将其克隆到表达载体pET-28a（＋）中，测序正确后转化入Rosetta（DE3）中进行IPTG诱导表达。结果表明，重组菌表达出约53ku，以沉淀性形式存在的重组蛋白，

简介：为研究A型禽流感病毒M2蛋白胞外功能区（M2e）蛋白亚单位疫苗在鸡体的免疫保护力，利用笔者所在实验室已构建的含M2e基因的质粒pGEM—T-1459，获得顺次串联的基因片段3M2e，将其克隆到原核表达载体pMAL—C2x中，经酶切和DNAN序鉴定正确后转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞，经IPTG诱导表达，SDS—PAGE和Western—blot分析，结果显示，