简介：

简介：目的：探讨仙茅对体外培养肝细胞代谢功能的影响。方法：应用仙茅水提物大（400μg生药／m1）、中（200μg生药／m1）、小剂量（1001a,g生药／m1）作用于体外培养的正常人肝细胞株L02细胞，收集细胞培养液，应用氧化酶终点法检测葡萄糖（GLU）；终点法检测甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）；双缩脲终点法检测总蛋白（TP）；氧化酶法检测乳酸（LAC）；酶标比色法测乳酸脱氯酶（LDH）。结果：仙茅水提物大（400μg生药／rIll）、中剂（200μg生药／m1）时可使L02细胞培养液中GLU、TP、LDH含量增加，TG、LAc含量降低，与空白组比较有显著差异。结论：仙茅可提高L02细胞糖、脂、蛋白的代谢及能量代谢。

简介：摘要目的探讨非小细胞肺癌L861Q突变临床特征，与L858R突变临床特征对比研究，分析二者突变临床特征差异及临床价值。方法纳入2012年7月至2018年12月在空军军医大学第二附属医院呼吸与危重症医学科基因检测中心行EGFR基因检测的705例非小细胞肺癌患者，回顾性分析L861Q、L858R突变临床特征及二者突变临床特征相对比。结果13例L861Q突变均发生于腺癌未合并其他肿瘤组，L861Q腺癌突变率高于其他类型(P＝0.004)。L858R突变特征表现为：女性组突变率高于男性组(χ2＝19.562，P<0.001)、不吸烟组突变率高于吸烟组(χ2＝15.859，P<0.001)、右肺肿瘤突变率高于左肺肿瘤(χ2＝5.601，P＝0.020)、腺癌组突变率高于其他组(χ2＝16.282，P<0.001)、Ⅳ期组肿瘤突变率高于Ⅰ～Ⅲ期组(χ2＝5.996，P＝0.016)。L861Q与L858R女性组突变率高于男性组，年龄≥50岁组突变率高于年龄<50岁组，未合并其他肿瘤组突变率高于合并组，并发骨转移组突变率高于无转移组，二者突变临床特征差异无统计学意义(P值均>0.05)。L861Q与L858R突变临床特征在有无合并糖尿病、高血压和是否并发胸膜、淋巴结、头颅转移及临床分期组恰相反，差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论L861Q突变以腺癌多见，L858R突变以非吸烟、女性、右肺、Ⅳ期、腺癌多见。L861Q与L858R突变在性别、年龄、是否吸烟、病理分型、肿瘤发生部位、是否合并其他肿瘤、有无并发骨转移突变临床特征相一致；在肿瘤分期，是否并发胸膜、淋巴结、头颅转移及有无合并糖尿病、高血压突变临床特征相反。

简介：摘要目的对临床常用的3种口腔医用合金（镍铬合金、金合金、钴铬合金），通过流式细胞术来评价3种合金对L929细胞凋亡的影响。方法制备3种合金材料的浸提液,用浸提液培养L929细胞24h,用AnnexinV-EGFP与PI对L929细胞双染，应用流式细胞技术检测L929细胞的凋亡情况。结果3种材料引起细胞凋亡的顺序由小到大依次是金合金＞钴铬合金＞镍铬合金。结论不同医用口腔合金材料引起L929细胞凋亡表现出差异性,镍铬合金对L929细胞凋亡影响较大，金合金、钴铬合金表现出了良好的生物相容性。

简介：【摘要】目的：探讨siRNA 沉默HnRNP L基因对RWPE-1细胞、Lncap细胞、PC3细胞生物学行为的影响。方法：通过合成了靶向HnRNP L的特异性siRNA，并通过了Western Blot在蛋白水平上进行检测，并筛选出干扰效率最高的3号序列来干扰RWPE-1细胞、Lncap细胞、PC3 细胞中HnRNP L的表达，观察其对三种不同细胞生长、凋亡、体外侵袭能力及迁移能力的差异。结果：沉默HNRNPL后，CCK-8实验提示三种细胞的增值都明显降低，划痕实验结果提示：沉默HNRNPL后，RWPE-1细胞和PC3细胞的迁移力明显减弱。Transwell检测结果提示：沉默HNRNPL后，RWPE-1细胞、Lncap细胞和PC3细胞的侵袭能力明显减弱。结论：HnRNPL对前列腺癌的多种生物学行为有明显的影响，参与了前列腺癌的发生、发展的恶性进程，促进了前列腺癌的生长、侵袭和转移。

简介：摘要目的探讨原发性肝癌（肝癌）患者外周血循环肿瘤细胞（CTC）的程序性死亡-配体1（PD-L1）表达及其与肝癌患者临床病理特征的关系。方法回顾性分析2017年1月至2019年12月中山大学孙逸仙纪念医院收治的30例肝癌患者临床资料。患者均签署知情同意书，符合医学伦理学规定。其中男27例，女3例；年龄29～77岁，中位年龄51岁。多重RNA原位分析检测患者外周血中CTC分型及其PD-L1表达水平，分析PD-L1表达与临床病理特征之间的相关性。相关性分析采用χ2检验或Fisher确切概率法。结果共检出CTC 275个，其中上皮型82个，间质型51个，混合型142个。混合型PD-L1平均表达水平为0.89，明显高于上皮型的0.55及间质型的0.49。混合型CTC为主型肝癌患者数量及PD-L1表达水平亦明显高于其他分型患者。PD-L1阳性的CTC分型与患者肝硬化及肝被膜侵犯相关（χ2=9.707，7.153；P<0.05）。肝癌患者平均PD-L1表达水平仅与患者饮酒史相关（P=0.042）。结论肝癌患者CTC以混合型为主，其PD-L1表达水平高于其他分型患者。PD-L1阳性的CTC分型与肝硬化及肝被膜侵犯相关，而PD-L1表达水平仅与患者饮酒史相关。

简介：为研究AngⅡ对3T3-L1前脂肪细胞增殖的影响，本文采用血清法和血清饥饿法两种方法，外源添加不同浓度AngⅡ，利用MTT法检测3T3-L1增值情况。研究结果表明，有血清法和血清饥饿法中AngⅡ对3T3-L1前脂肪细胞的增殖均无显著性影响（p〉0．05）。

简介：摘要目的探讨程序性死亡受体(PD-L1)蛋白表达与非小细胞肺癌(NSCLC)临床病理特征的关系，并分析PD-L1蛋白表达水平与NSCLC患者细胞免疫的关系。方法选取2016年1月至2018年12月期间海南省第三人民医院收治的112例NSCLC患者作为研究对象。通过免疫组织化学法检测NSCLC肿瘤组织中PD-L1蛋白的表达情况，流式细胞术检测患者外周血淋巴细胞亚群水平，并收集NSCLC患者的相关临床病理资料，进行分析。结果共检测112例NSCLC组织，其中72例PD-L1蛋白阳性表达，阳性率为64.3%(72/112)。PD-L1表达与患者是否吸烟、肿瘤病理类型及表皮生长因子受体(EGFR)突变有关(P<0.05)，与年龄、性别、TNM分期及K-Ras突变无关(P>0.05)。PD-L1阴性患者外周血CD3＋和CD3＋CD4＋细胞水平高于阳性患者(P<0.05)，而两组间CD3＋CD8＋、CD4＋/CD8＋比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论有吸烟、鳞状细胞癌及EGFR突变特征的NSCLC患者PD-L1的表达量较高，同时PD-L1的表达可以提示患者细胞免疫功能的下降。

简介：摘要目的探讨弥漫性大B细胞淋巴瘤（DLBCL）中MYD88 L265P突变对肿瘤细胞及肿瘤微环境中PD-L1表达的影响，为患者进行免疫治疗提供理论依据。方法采用多重连接探针扩增技术检测2008年8月至2010年5月间经中国医学科学院肿瘤医院病理诊断明确的72例初治性DLBCL石蜡包埋样本中MYD88 L265P突变的发生频率。采用Ventana全自动免疫组织化学平台对所有样本进行PD-L1（22C3）及PD-L1（SP142）检测，分别观察肿瘤细胞及肿瘤微环境中PD-L1的表达情况，分析MYD88 L265P突变与DLBCL肿瘤细胞及肿瘤微环境PD-L1表达的关系。结果72例DLBCL组织标本中，MYD88 L265P突变15例（20.8%）。剔除9例伴有JAK2扩增的病例，将63例DLBCL分成MYD88 L265P突变型组14例，MYD88 L265P野生型组49例。免疫组织化学结果显示，14例MYD88 L265P突变组中，7/14肿瘤细胞PD-L1（22C3）表达阳性，4/14肿瘤微环境PD-L1（SP142）表达阳性。在49例MYD88 L265P野生型组中，9例（18.4%）肿瘤细胞PD-L1（22C3）表达阳性，38例（77.6%）肿瘤微环境PD-L1（SP142）表达阳性。并且在16例肿瘤细胞PD-L1（22C3）表达阳性的DLBCL中，7例伴有MYD88 L265P突变者中仅2例肿瘤微环境PD-L1（SP142）阳性；9例MYD88 L265P野生型者肿瘤微环境PD-L1（SP142）表达均阳性。统计学分析显示，MYD88 L265P突变型组肿瘤细胞PD-L1（22C3）的阳性率明显高于野生型组（P=0.017）；MYD88 L265P突变型组肿瘤微环境PD-L1（SP142）的阳性率明显低于野生型组（P=0.001）。结论MYD88 L265P突变可能在调控DLBCL肿瘤细胞及肿瘤微环境PD-L1的表达中发挥了一定作用，进一步的研究将为MYD88 L265P突变DLBCL患者进行免疫治疗提供理论依据。

简介：背景与目的：细胞黏附分子L1（celladhesionmoleculeL1，L1CAM）是一种跨膜黏附蛋白，在神经系统发育及肿瘤发生中发挥重要作用。本研究运用RNA干扰（RNAinterference，RNAi）技术抑制L1CAM表达，并探讨其对胶质瘤U251细胞多药耐药的逆转作用及相关分子机制。方法：将针对L1CAM的小干扰RNA（siLl）和阴性对照siRNAfsiCon）转染人胶质瘤U251细胞。实验分3组：空白对照组（胶质瘤U251细胞）、阴性对照组（转染siCon的胶质瘤U251细胞）、实验组f转染siLl的胶质瘤U251细胞）。蛋白质印迹法（Westernblotting）~U251细胞中L1CAM、MRPl、pAKT及pERK1／2等蛋白表达。细胞增殖实验检测L1CAM对顺铂（cisplatin）和P13K／AKT抑制剂LY294002抑制U251细胞增殖的影响。免疫荧光染色法检测抑制LICAM表达对U251细胞系中AKT磷酸化情况的影响。结果：实验组L1CAM、pAKT．pERKl／2蛋白表达量明显低于阴性对照组和空白对照组（P〈0．01），但实验组多药耐药蛋白MRPl表达量以及Bcl-2cdBax与阴性对照组和空白对照组相比无明显变化。实验组顺铂和LY294002对U251细胞增殖的抑制率高于阴性对照组和空白对照组，提示抑制LICAM表达后细胞对顺铂和LY294002的敏感性增加。免疫荧光结果显示，与阴性对照组和空白对照组相比，实验组细胞内AKT磷酸化信号明显降低。结论：RNAi抑制L1CAM表达能增强顺铂和LY294002对U251细胞增殖的抑制作用，并可抑制P13K／AKT和MAPK信号激活．一定程度上可逆转胶质瘤细胞的多药耐药性。

简介：摘要目的构建OX40L真核表达质粒并转染血管平滑肌细胞(VSMCs)，探讨其对VSMCs增殖的影响。方法通过目的基因克隆，构建p-OX40L质粒并转染VSMCs。实验分3组重组质粒(p-OX40L)转染组、空质粒转染组(pcDNA3.1(+))和空白对照组。将p-OX40L用脂质体2000转染入VSMCs，提取细胞的总RNA和蛋白检测OX40L的mRNA和蛋白表达，并用MTT法检测OX40L对VSMCs增殖的影响。结果经PCR、双酶切和DNA序列分析证实OX40L正确插入pcDNA3.1(+)中，将p-OX40L转染VSMCs后，OX40L的mRNA、蛋白表达均高于空质粒组和空白对照组(P<0.01)，同时对VSMCs的细胞抑制率明显高于空质粒组和空白对照组。结论成功构建OX40L真核表达质粒，该质粒可抑制VSMCs的增殖。

简介：目的：研究幽门螺杆菌L型（helicobacterpyloriL—form，Hp—L型）感染对胃癌BGC-823细胞增殖的影响，并探讨其作用机制。方法：将胃癌BGC-823细胞与Hp—L型以不同比例（1：20、1：100、1：500）共培养，以不加Hp—L型为对照组，在不同时段进行以下实验：倒置显微镜观察细胞形态学变化；四甲基噻唑氮蓝（MTT）法检测细胞生长增殖率；流式细胞仪（FCM）检测细胞凋亡率；免疫组化（SP法）检测癌基因（skp2）、抑癌基因（p53）和核增殖指数（Ki-67）的表达情况。结果：Hp—L型作用BGC-823细胞后，倒置显微镜观察到细胞分裂增多，增殖旺盛，瘤巨细胞增多，出现明显的生长加速现象；MTT法测定细胞生长曲线显示，Hp—L型对胃癌BGC-823细胞增殖有促进作用；FCM检测可见，lip—L型影响胃癌BGC-823细胞周期的分布，使G0／G1期比例降低，S期比例升高；免疫组化可见细胞中Skp2、p53和Ki-67蛋白表达阳性率逐渐增加；以上作用均呈细菌浓度和作用时间依赖性。结论：Hp—L型可促进胃癌BGC-823细胞增殖，其机制与上调skp2、p53和Ki-67蛋白的表达有关。

简介：摘要非小细胞肺癌(NSCLC)患者的治疗方式多样，除放疗、化疗、靶向治疗外，免疫检查点抑制剂也取得突破性进展，尤其是程序性细胞死亡受体-1(PD-1)及其配体(PD-L1)抑制剂改善了NSCLC患者的生存，部分被美国食品和药物管理局批准为一线用药。目前常用的PD-L1抑制剂有阿特珠单抗、度伐利尤单抗和阿维鲁单抗，联合疗法包括联合化疗、血管内皮生长因子抑制剂、分子靶向治疗和免疫治疗。

简介：摘要目的探讨脂多糖（LPS）促进肠道L细胞miR-425-5p表达的机制。方法将肠道L细胞系GLUTag细胞分为对照（NC）组、LPS组（LPS 200 ng/ml培养24 h）、小干扰RNA（siRNA）NC组（LPS 200 ng/ml培养24 h后转染siRNA NC）和NF-κB siRNA组［LPS 200 ng/ml培养24 h后转染核因子-κB（NF-κB）siRNA］，每组3个复孔。采用Western blotting检测细胞核及细胞质中NF-κB p65蛋白表达水平，实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-425-5p表达水平，酶联免疫吸附测定法检测胰高糖素样肽-1（GLP-1）的分泌水平。采用Promo软件分析预测miR-425-5p启动子上NF-κB的潜在结合位点，双荧光素酶报告实验检测miR-425-5p启动子区域结合位点的相对活性，染色质免疫沉淀反应验证NF-κB与miR-425-5p之间的相互作用。两组之间比较采用独立样本t检验，多组之间比较采用单因素方差分析。结果与对照组相比，LPS组的GLP-1分泌水平显著下降（P<0.01），miR-425-5p表达水平显著升高（P<0.01）、细胞质和细胞核中NF-κB p65蛋白表达水平显著升高（P<0.05）。与siRNA NC组相比，NF-κB siRNA组细胞核及细胞质中NF-κB p65的蛋白表达水平、miR-425-5p表达水平均明显下降（P<0.01）。LPS诱导下，含有两个结合位点（2-Luc/3-Luc）的miR-425-5p启动子活性明显高于含有单独的结合位点（3-Luc），差异具有统计学意义（P<0.01）；NF-κB与miR-425-5p基因启动子序列结合位点2的结合能力最强（P<0.01）。结论LPS通过活化NF-κB，促进其与miR-425-5p基因启动子序列的结合位点2结合，进而促进肠道L细胞miR-425-5p转录，最终调节肠道L细胞GLP-1分泌。

简介：心肌细胞膜上的L型Ca^2+通道具有重要的生理意义，尤其在信号转导中发挥重要作用。近年来，由于膜片钳与分子生物学技术的发展，人们对离子通道的认识更加深入。有关L型Ca^2+通道的信号转导途径日渐清晰，本文分别在蛋白激酶A、蛋白激酶C、磷脂酰肌醇3激酶、G蛋白βγ亚基等途径对心肌L型Ca^2+通道调节信号转导的研究进展作一综述。

简介：目的:探讨大蒜素对大鼠心室肌细胞L-型钙通道的作用.方法:用急性酶解法获得大鼠的单个心肌细胞,用标准的全细胞膜片钳技术记录钙通道电流.结果:5、50、250和500μmol/L大蒜素分别抑制钙电流4.4%、26.91%、38.06%、72.90%.250μmol/L大蒜素能使心肌细胞钙电流-电压曲线明显上移,峰电流密度从(7.17±0.65)pA/pF减少至(4.44±0.52)pA/pF(n=15,P<0.05),但激活电位、峰电位和翻转电位无明显改变(P>0.05).大蒜素能使钙电流失活曲线明显左移(P<0.05).大蒜素对钙电流激活曲线、失活再复活曲线和频率依赖性无明显影响(P>0.05).结论:大蒜素呈浓度依赖性地抑制心肌细胞L-型钙通道.

简介：摘要免疫治疗，尤其是程序性死亡受体1(PD－1)和(或)程序性死亡配体1(PD－L1)免疫检查点抑制剂，重塑了肿瘤治疗模式，在包括非小细胞肺癌(NSCLC)在内的多种肿瘤治疗中部分患者均获得了显著的临床获益。如何筛选PD－1和(或)PD－L1抑制剂潜在获益人群成为免疫治疗时代面临的新挑战。NSCLC中PD－L1蛋白表达水平与PD－1和(或)PD－L1抑制剂疗效呈正相关，是重要的预测标志物之一。明确PD－L1检测的临床意义和检测时机，在PD－L1检测步骤、结果判读和质量控制等各个环节实现PD－L1检测的规范化和标准化，对提高检测的准确性和降低室间差异具有重要意义。针对PD－L1检测的实际问题，在结合文献、专家经验和委员会成员内部讨论基础上，最终达成此共识，以期规范PD－L1检测，为临床医师提供准确可靠的治疗依据以及给予临床检测一定的指导。必须指出的是，鉴于PD－L1检测客观复杂因素的存在以及国内PD－L1检测尚处于临床应用初期，此专家共识尚存在不足之处，期待未来有更多的研究和实践数据进一步完善。

简介：

简介：摘要目的研究CCL25对T-ALL细胞系Jurkat上L-plastin（LPL）迁移作用的影响，为临床治疗提供理论依据。方法用激光共聚焦显微镜检测CCL25处理前后，LPL的形态变化。结果静息状态下，LPL均匀分布在胞浆内，与F-actin不共定位。CCL25处理后，LPL发生迁移，与F-actin发生共定位。结论CCL25介导Jurkat细胞LPL的迁移。

简介：[i][l][l]这三个音素到底应归为几个音位，学术界尚无定论。传统的划分音位的“互补原则”、“语音相似原则”和“历史原则”本身存在着局限性，无法有效地处理[i][l][l]的音位归纳问题。运用实用原则和实际原则可以很好地解决这个问题。根据实用原则和实际原则．应将[i][l][l]归为三个音位。