简介：摘要目的探讨长春新碱调控RAS相关结构域蛋白2A(RASSF2A)去甲基化对卵巢癌细胞增殖的影响。方法将卵巢癌SKOV3细胞分为不同浓度长春新碱组，将慢病毒转染至LV-NC组(转染LV-NC慢病毒液，感染复数为70)和LV-RASSF2A组(转染LV-RASSF2A慢病毒液，感染复数为70)SKOV3细胞，空白组加入等量磷酸盐缓冲液。采用CCK-8法检测6.25 nmol/L长春新碱组、12.5 nmol/L长春新碱组、25 nmol/L长春新碱组、50 nmol/L长春新碱组和100 nmol/L长春新碱组SKOV3细胞的活力，集落形成实验检测SKOV3细胞的增殖能力，流式细胞术检测SKOV3细胞的凋亡情况，逆转录聚合酶链反应检测人正常卵巢上皮细胞IOSE-29和SKOV3细胞中RASSF2A mRNA的表达水平，Western blot检测IOSE-29和SKOV3细胞中RASSF2A蛋白的表达水平，甲基化特异性聚合酶链反应检测IOSE-29和SKOV3细胞中RASSF2A甲基化和去甲基化水平。结果6.25 nmol/L长春新碱组、12.5 nmol/L长春新碱组、25 nmol/L长春新碱组、50 nmol/L长春新碱组和100 nmol/L长春新碱组SKOV3细胞的存活率分别为(87.19±4.49)%、(73.67±8.62)%、(66.35±6.04)%、(50.32±6.00)%和(34.92±6.11)%，均低于对照组[(100.46±4.69)%，均P<0.05]。培养48 h时，长春新碱半数抑制浓度为50.02 nmol/L。12.5 nmol/L长春新碱组、25 nmol/L长春新碱组和50 nmol/L长春新碱组SKOV3细胞的增殖率分别为(41.70±2.21)%、(32.15±1.80)%和(23.00±2.01)%，均低于对照组[(100.78±5.66)%，均P<0.05)]；SKOV3细胞的凋亡率分别为(3.65±0.27)%、(5.21±0.76)%和(10.46±1.00)%，均高于对照组[(2.12±0.23)%，均P<0.05)]。SKOV3细胞中RASSF2A mRNA和蛋白的表达水平分别为0.32±0.04和0.24±0.02，均低于IOSE-29细胞(分别为1.00±0.07和0.68±0.04，均P<0.05)。LV-RASSF2A组SKOV3细胞的存活率、增殖率和凋亡率分别为(68.92±3.94)%、(16.38±2.16)%和(8.65±0.56)%，与LV-NC组[分别为(101.60±4.39)%、(100.73±3.29)%和(4.06±0.30)%]比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论长春新碱通过上调RASSF2A的表达，促进RASSF2A启动子去甲基化，以抑制卵巢癌细胞的增殖能力。

简介：摘要目的探讨长春新碱调控RAS相关结构域蛋白2A(RASSF2A)去甲基化对卵巢癌细胞增殖的影响。方法将卵巢癌SKOV3细胞分为不同浓度长春新碱组，将慢病毒转染至LV-NC组(转染LV-NC慢病毒液，感染复数为70)和LV-RASSF2A组(转染LV-RASSF2A慢病毒液，感染复数为70)SKOV3细胞，空白组加入等量磷酸盐缓冲液。采用CCK-8法检测6.25 nmol/L长春新碱组、12.5 nmol/L长春新碱组、25 nmol/L长春新碱组、50 nmol/L长春新碱组和100 nmol/L长春新碱组SKOV3细胞的活力，集落形成实验检测SKOV3细胞的增殖能力，流式细胞术检测SKOV3细胞的凋亡情况，逆转录聚合酶链反应检测人正常卵巢上皮细胞IOSE-29和SKOV3细胞中RASSF2A mRNA的表达水平，Western blot检测IOSE-29和SKOV3细胞中RASSF2A蛋白的表达水平，甲基化特异性聚合酶链反应检测IOSE-29和SKOV3细胞中RASSF2A甲基化和去甲基化水平。结果6.25 nmol/L长春新碱组、12.5 nmol/L长春新碱组、25 nmol/L长春新碱组、50 nmol/L长春新碱组和100 nmol/L长春新碱组SKOV3细胞的存活率分别为(87.19±4.49)%、(73.67±8.62)%、(66.35±6.04)%、(50.32±6.00)%和(34.92±6.11)%，均低于对照组[(100.46±4.69)%，均P<0.05]。培养48 h时，长春新碱半数抑制浓度为50.02 nmol/L。12.5 nmol/L长春新碱组、25 nmol/L长春新碱组和50 nmol/L长春新碱组SKOV3细胞的增殖率分别为(41.70±2.21)%、(32.15±1.80)%和(23.00±2.01)%，均低于对照组[(100.78±5.66)%，均P<0.05)]；SKOV3细胞的凋亡率分别为(3.65±0.27)%、(5.21±0.76)%和(10.46±1.00)%，均高于对照组[(2.12±0.23)%，均P<0.05)]。SKOV3细胞中RASSF2A mRNA和蛋白的表达水平分别为0.32±0.04和0.24±0.02，均低于IOSE-29细胞(分别为1.00±0.07和0.68±0.04，均P<0.05)。LV-RASSF2A组SKOV3细胞的存活率、增殖率和凋亡率分别为(68.92±3.94)%、(16.38±2.16)%和(8.65±0.56)%，与LV-NC组[分别为(101.60±4.39)%、(100.73±3.29)%和(4.06±0.30)%]比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论长春新碱通过上调RASSF2A的表达，促进RASSF2A启动子去甲基化，以抑制卵巢癌细胞的增殖能力。

简介：WW结构域由35～40个氨基酸残基组成，存在两个高度保守的色氨酸残基，能特异地与富含脯氨酸的蛋白基序结合。WW结构域存在于多种蛋白中，广泛参与细胞内各种生化过程和信号通路。WW结构域及其参与构成的蛋白与包括癌症在内的多种人类疾病存在密切联系，成为疾病诊断、治疗和药物开发的新靶标。本论文中，我们综述了WW结构域及其参与构成的蛋白在肿瘤和癌症发生中的重要作用和研究进展。

简介：摘要Ras-GTP酶激活蛋白SH3结构域结合蛋白1(Ras-GAP SH3 domain-binding protein，G3BP1)是RNA结合蛋白，通过调控mRNA稳定性和翻译来应对外界刺激，被认为是应激颗粒的成核因子之一。G3BP1在应激颗粒中的作用是目前研究的热点，但除此之外G3BP1在应激颗粒外与RNA的相互作用，调节基因表达的功能也不容忽视。G3BP1与肿瘤发生发展密切相关，包括肿瘤进展、侵袭和转移等。大量研究结果表明，G3BP1可能成为肿瘤治疗的新靶点。本文综述了G3BP1近年来在肿瘤生物学领域取得的重要进展，包括其在肿瘤进展、应激颗粒形成等方面的作用。

简介：摘要目的探讨溴结构域和超末端结构域蛋白（BET）家族编码基因胚系罕见变异与中国部分地区人群恶性肿瘤易感性的关系。方法针对溴结构域蛋白2（BRD2）、BRD3、BRD4基因设计捕获探针，利用Illumina高通量测序平台，对2015年10月至2018年7月解放军总医院、广西医科大学第二附属医院、湖北省麻城市人民医院以及北京吉因加科技有限公司募集的1 673例恶性肿瘤患者和1 661例非肿瘤对照者的外周血白细胞基因组DNA进行靶向测序。根据基因组分析工具包（GATK）最佳实践指南进行变异检测分析，采用ANNOVAR、VEP软件进行注释，筛选BET家族中胚系罕见变异。为了确定潜在致病性胚系罕见变异，在ClinVar数据库中检索其致病性的临床和实验证据，并采用SIFT和PolyPhen-2软件预测变异的致病性。以Fisher′s 精确检验比较病例组和对照组变异率的差异，采用SKAT软件将性别、年龄作为协变量进行多因素回归分析。结果1 673例肿瘤患者中，男911例，女762例；年龄（57.9±11.7）岁；肺癌1 111例（66.4%），肠癌266例（15.9%），乳腺癌186例（11.1%），食管癌或胃癌110例（6.6%），同期招募非肿瘤对照1 661例，其中男821例，女840例；年龄（44.5±13.9）岁。BRD2基因中共有4个潜在致病性胚系罕见变异，且这4个变异仅存在于17例肿瘤患者中。从肿瘤患者和非肿瘤对照中共筛选出5个存在于BRD3基因上的潜在致病性胚系罕见变异，以及8个存在于BRD4基因上的潜在致病性胚系罕见变异。BRD2基因在肿瘤患者中的潜在致病性胚系罕见变异率为1.02%（17/1 673），高于非肿瘤对照［0（0/1 661）；OR=+∞，95%CI：4.81~+∞，P<0.001］。BRD3基因在肿瘤患者中的潜在致病性胚系罕见变异率为0.24%（4/1 673），与非肿瘤对照相比，差异无统计学意义［0.12%（2/1 661）；OR=1.99，95%CI：0.46~10.47，P=0.690］。BRD4基因在肿瘤患者中的潜在致病性胚系罕见变异率为0.18%（3/1 673），与非肿瘤对照相比，差异无统计学意义［0.36%（6/1 661）；OR=0.50，95%CI：0.14~2.08，P=0.340］。进一步将“华表计划”中国人群全外显子测序数据集用作对照，BRD2基因在肿瘤患者中的变异率为17/3 346（0.51%），明显高于对照［0.07%（3/4 154）；OR=7.07，95%CI：2.32~22.83，P<0.001］。17例携带BRD2基因4个潜在致病性胚系罕见变异患者中，肺癌9例，肠癌6例，乳腺癌1例，食管癌或胃癌1例。BRD2基因在肺癌患者中的潜在致病性胚系罕见变异率为0.81（9/1 111），高于非肿瘤对照［0（0/1 661）；OR=+∞，95%CI：3.95~+∞，P<0.001］；BRD2基因在肠癌患者中的潜在致病性胚系罕见变异率为2.26%（6/266），明显高于非肿瘤对照［0（0/1 661）；OR=+∞，95%CI：9.03~+∞，P<0.001］。携带BRD2基因罕见变异的患者具有更早的肠癌发病年龄［（47.0±7.4）比（57.2±12.1）岁，P=0.017］。结论BRD2基因可能是肺癌、肠癌的候选遗传易感基因，携带BRD2基因潜在致病性胚系罕见变异具有更高的肺癌、肠癌发病风险以及更早的肠癌发病年龄。

简介：摘要NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3（NOD like receptor thermal protein domain associated protein 3, NLRP3）炎症小体是参与炎症反应的一种复合物，已被证实参与了急性肺损伤（acute lung injury, ALI）的发生、发展，其激活机制非常复杂，线粒体活性氧（reactive oxygen species, ROS）以及线粒体DNA（mitochondria DNA, mtDNA）的积累会激活NLRP3炎症小体，但线粒体在NLRP3炎症小体介导ALI过程中所发挥的作用远不止如此，阐明临床上各种类型的肺损伤激活线粒体-NLRP3炎症小体通路的完整机制可能为未来治疗相关疾病提供新的思路。文章就NLRP3炎症小体的结构、线粒体-NLRP3炎症小体通路的激活机制及其在ALI中的作用展开综述，为ALI的临床治疗提供新的思路与策略。

简介：摘要Nod样受体家族含pyrin结构域蛋白12(NLRP12)作为发现较晚的Nod样受体家族成员，是重要的模式识别受体之一，识别多种病原体并启动下游免疫应答，参与多项机体炎症反应的调控，与自身炎症性疾病的发生、进展相关。现从其结构、功能及NLRP12相关自身炎症性疾病等方面对NLRP12进行综述，探讨NLRP12在自身炎症中的作用机制，为认识、探索、治疗NLRP12相关自身炎症疾病提供新思路。

简介：摘要染色质拓扑相关结构域(topological associated domain，TAD)是基因组三维结构和转录调控的基本单位。相邻TAD以特征序列边界间隔，形成相对独立的功能域，TAD内部基因的转录受到共同调控，而TAD间彼此互不影响。TAD结构的改变与多种疾病的发生密切相关。本文对TAD的重要组成、特性、对疾病发生的影响及常用的染色质互作研究方法进行综述。

简介：摘要目的探讨儿童慢性非萎缩性胃炎（chronic non-atrophic gastritis，CNG）患儿胃组织及胃液中核苷酸结合寡聚化结构域样受体含pyrin结构域蛋白6（NLR family，pyrin domain containing6，NLRP6）的表达，并分析幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，Hp）感染对NLRP6表达的影响。方法选取2020年10月至2021年7月于徐州医科大学附属医院儿科就诊的CNG患者120例作为观察对象，采用病例对照研究方法。根据病理学诊断、内镜下胃黏膜损伤程度及Hp感染情况分为4组：轻度CNG组Hp阴性；中重度CNG组Hp阴性；轻度CNG组Hp阳性；中重度CNG组Hp阳性。采用酶联免疫吸附测定法（enzyme-linked immune sorbent assay，ELISA）检测4组胃组织及胃液中NLRP6的表达；免疫印迹法检测4组胃组织中NLRP6的表达，并分析在儿童CNG中表达的意义。呈正态分布的计量资料两组间比较采用独立样本t检验；多组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用LSD-t检验。计数资料组间比较采用χ2检验。结果中重度CNG组中Hp阳性率62.96%（34/54）高于轻度CNG组37.04%（20/54），差异有统计学意义（χ2=18.32，P<0.001）。在同等Hp条件下，轻度CNG组中NLRP6表达［Hp阴性轻度CNG：胃组织（653.73±37.71） ng/L、胃液（471.75±38.47） ng/L；Hp阳性轻度CNG：胃组织（616.69±43.33） ng/L、胃液（445.29±36.39） ng/L］高于中重度CNG组［Hp阴性中重度CNG：胃组织（623.82±52.99） ng/L、胃液（446.48±47.49） ng/L；Hp阳性中重度CNG：胃组织（580.43±62.75） ng/L、胃液（406.88±51.85） ng/L］，差异均有统计学意义（Hp阴性轻度与中重度CNG比较：胃组织P=0.035，胃液P=0.046；Hp阳性轻度与中重度CNG比较：胃组织P=0.010，胃液P=0.002）；同等程度胃黏膜损伤中，Hp阴性组NLRP6表达［Hp阴性轻度CNG：胃组织（653.73±37.71） ng/L，胃液（471.75±38.47） ng/L；Hp阴性中重度CNG：胃组织（623.82±52.99） ng/L，胃液（446.48±47.49） ng/L高于阳性组（Hp阳性轻度CNG：胃组织（616.69±43.33） ng/L，胃液（445.29±36.39） ng/L；Hp阳性中重度CNG：胃组织（580.43±62.75） ng/L，胃液（406.88±51.85） ng/L］，差异均有统计学意义（轻度CNGHp阴性与阳性比较：胃组织P=0.005，胃液P=0.023；中重度CNG阴性与阳性相比：胃组织P=0.004，胃液P=0.003）。结论在同等Hp条件下，胃黏膜损伤程度越重，NLRP6越低；在同等黏膜损伤程度的情况下，Hp阴性组的NLRP6表达水平明显高于Hp阳性组。提示NLRP6在慢性胃炎中起到抑制炎症的作用，维持上皮细胞的完整性，且Hp能够抑制NLRP6的表达。

简介：无

简介：目的：分析子宫内膜异位症（EMS）中Ras相关域家族蛋白1A（RASSF1A）基因的表达情况及其与启动子甲基化状态的关系。方法选择45例卵巢EMS患者的异位内膜及相对应的在位内膜组织和20例非EMS患者的正常子宫内膜组织。免疫组化法检测组织标本中RASSF1A基因的表达情况，甲基化特异性聚合酶链反应（PCR）法检测RASSF1A启动子甲基化状态。结果异位内膜、在位内膜及正常内膜组织中RASSF1A表达率依次升高，分别为37.78%（17/45）、60.00%（27/45）、85.00%（17/20），差异有统计学意义（χ2=13.136，P=0.001）。异位内膜、在位内膜组织中RASSF1A启动子甲基化率分别为55.56%（25/45）、33.33%（15/45）、0，三组RASSF1A启动子甲基化率比较差异有统计学意义（χ2=18.770，P=0.000）。异位内膜组织中RASSF1A启动子甲基化率在增生期、分泌期分别为66.67%（14/21）、45.83%（11/24）；在位内膜组织中RASSF1A启动子甲基化率在增生期、分泌期分别为38.10%（8/21）、29.17%（7/24），差异均无统计学意义（P＞0.05）。异位内膜组织中，Ⅲ～Ⅳ期RASSF1A启动子甲基化率明显高于Ⅰ～Ⅱ期（χ2=5.940，P=0.015）。在异位内膜和在位内膜组织中，RASSF1A表达水平与RASSF1A启动子甲基化状态呈负相关（r=-0.594、-0.577，P〈0.01）。结论RASSF1A启动子甲基化导致的基因转录沉默与EMS的发生、发展密切相关。评估在位内膜组织RASSF1A启动子甲基化水平可作为EMS的表观遗传学标志物，有助于EMS的早期诊断。

简介：摘要混合谱系激酶结构域样蛋白(mixed lineage kinase domain-like protein, MLKL)是一种具有激酶结构域的假激酶，在程序性坏死的调控中发挥着重要作用。脑缺血后，MLKL作为受体相互作用蛋白3的底物蛋白发生寡聚化和磷酸化，继而从胞质转位至质膜，引起线粒体分裂和细胞膜破裂。MLKL还可通过诱导程序性坏死、直接激活炎性小体等途径介导脑缺血后的炎症反应，进而加重脑损伤。因此，阐明MLKL的生物学特性及其在脑缺血中的作用和机制，对脑缺血的治疗至关重要。

简介：三结构域多铜氧化酶是生物体内非常重要的金属氧化酶,对机体生长和发育具有重要影响。为了系统地了解水稻三结构域多铜氧化酶基因家族的基本情况,本研究运用生物信息学方法对其成员进行了预测和分析;研究发现,以拟南芥三结构域多铜氧化酶基因At5g21105为靶序列,利用BlastP为工具在水稻基因组中共搜索到38个同源基因;这些基因的蛋白产物都依次含有Cu-oxidase3、Cu-oxidase和Cu-oxidase2三种结构域,各结构域中含有铜离子结合位点,二级结构具有α-螺旋和β-转角等基本特征,特推断它们都属于三结构域多铜氧化酶家族成员;进一步地,根据同源性程度将水稻多铜氧化酶基因家族成员划分为ClassⅠ和ClassⅡ两个亚家族,其中ClassⅠ包含31个基因,ClassⅡ包含7个基因。这些研究结果为进一步研究水稻多铜氧化酶基因家族成员的功能提供了参考依据。

简介：摘要目的分析血清脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)及核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)水平与老年冠心病患者冠状动脉(冠脉)病变严重程度的相关性。方法回顾性采集医院2017年1月至2019年7月200例老年冠心病患者资料，采集同期医院接受常规全身体检的健康老年人群80例体检资料，将其作为健康对照组。全部受检者均于入院时接受血清相关指标检测及冠脉造影检查，且检查结果资料完整。根据造影结果并结合冠脉病变Syntax评分系统，将200例老年冠心病患者分为轻危、中危及高危病变组；分析各组血清Lp-PLA2与NLRP3水平与老年人冠心病严重程度的相关性。结果200例老年冠心病患者整体Syntax积分均分为(27.6±10.1)分；轻危、中危、高危病变分别为60例、68例、72例，占30.0%、34.0%、36.0%；对照组血清Lp-PLA2、NLRP3水平最低，由低至高依次为轻危组、中危组和高危病变组(F＝305.026、9.173、582.029，均P<0.001)；双变量Pearson相关性分析发现血清Lp-PLA2、NLRP3水平与老年冠心病患者Syntax积分均呈正相关(r＝0.545、0.689，均P<0.001)。结论血清Lp-PLA2与NLRP3水平与老年冠心病患者的冠脉病变程度有关，指标水平过表达可能提示冠脉病变程度持续性加重，未来可考虑检测老年冠心病患者的血清Lp-PLA2与NLRP3水平，评估冠脉病变情况并指导治疗。

简介：摘要目的C型凝集素结构域家族7成员A(CLEC7A)在脑胶质瘤中的表达及临床意义。方法利用基因表达谱数据交互分析(GEPIA)及GlioVis数据库分析CLEC7A在胶质瘤组织中表达水平。通过癌症基因组图谱(TCGA)及中国脑胶质瘤基因图谱计划(CGGA)数据库共收集1 095例胶质瘤样本，用于分析CLEC7A表达与胶质瘤临床病理特征及预后相关性。使用富集分析明确CLEC7A参与的生物学过程。利用单细胞转录组测序数据分析及Spearman相关检验分析CLEC7A表达与胶质瘤免疫浸润的相关性。结果与非肿瘤脑组织相比(Gravendeel：4.247±0.121；Rembrant：5.972±0.400)，CLEC7A在胶质瘤组织中显著上调(Gravendeel：5.134±0.577；Rembrant：6.399±0.676)，差异有统计学意义(Gravendeel：t＝－4.333，P<0.01；Rembrant：t＝－3.292，P<0.01)。多因素Cox回归分析显示CLEC7A表达水平是胶质瘤患者预后的独立影响因素[TCGA：风险比(HR)：1.637；CGGA：HR：1.678，均P<0.05]。GeneMANIA数据库分析显示CLEC7A与半乳糖凝集素-3(LGALS3)具有强相关性。利用单细胞转录组测序数据(GSE117891)及肿瘤免疫单细胞中心(TISCH)网站分析显示CLEC7A在胶质瘤免疫微环境中胶质瘤相关性小胶质细胞/巨噬细胞(GAMMs)中特异性高表达，并且利用Spearman检验基于TIMER数据进行验证(低级别胶质瘤：R＝0.749；高级别胶质瘤：R＝0.205，均P<0.01)。结论CLEC7A可能是胶质瘤预后评估及精准治疗的新型标志物。

简介：据ShenBW（Blood，2007Oct26；Epubaheadofprint）报道，凝血因子Ⅷ结构域有5个，并明确了三维结构的形态。Ⅷ因子（Ⅷ）是一种血清蛋白，当血管受损时，在激活的血小板表面构建膜结合蛋白复合物，参与凝血过程。血友病A的病因是Ⅷ因子基因发生多种突变所致，需要纯化的蛋白进行替代治疗。

简介：摘要目的探讨鼠双微体基因2(MDM2)和核受体结合SET结构域蛋白2(NSD2)在乳腺癌组织中的表达及意义。方法收集2014年7月至2020年1月广东医科大学附属医院103例乳腺癌组织和配对癌旁组织，采用免疫组织化学方法检测组织中MDM2蛋白以及NSD2蛋白的表达，结合临床资料行χ2检验相关性分析。结果MDM2蛋白在乳腺癌组织中表达率为69.90%(72/103)，显著高于配对癌旁组织中表达率10.68%(11/103)，两者差异有统计学意义(χ2＝75.083，P<0.01)，MDM2表达水平与乳腺癌的TNM分期、组织学分级、肿瘤大小、淋巴结转移明显相关(χ2＝5.501、8.724、4.127、5.415，P<0.05)。NSD2蛋白在乳腺癌组织中表达率为71.85%(74/103)，显著高于配对癌旁组织中表达率11.65%(12/103)，两者差异有统计学意义(χ2＝76.731，P<0.01)，NSD2蛋白表达水平与乳腺癌的淋巴结转移、组织学分化程度、TNM分期明显相关(χ2＝ 7.206、5.793、4.995，P<0.05)，差异具有统计学意义。结论MDM2蛋白以及NSD2蛋白异常高表达可能参与乳腺癌发生发展与转移，检测MDM2以及NSD2有助于判价乳腺癌的恶性程度、判断乳腺癌转移潜能。

简介：摘要目的探讨三结构域蛋白27(TRIM27)在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞炎症反应中的作用机制。方法收集2018—2019年于温州医科大学附属平阳医院接受手术治疗的NSCLC患者的癌组织和正常癌旁组织(距离癌组织5 cm)各10例，利用荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot法检测TRIM27 mRNA和蛋白的表达水平。TRIM27 siRNA敲减实验分为NCTRIM27组、TRIM27 siRNA组、NCTRIM27+TNF-α组、TRIM27 siRNA+TNF-α组；白细胞介素6(IL-6) siRNA敲减实验分为NCIL-6组和IL-6 siRNA组。采用Western blot法检测各组细胞系中TRIM27、肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)、TNFR2以及TNFR相关炎症因子蛋白的表达水平。结果不同分期NSCLC组织中TRIM27表达水平(Ⅰ期为2.81±0.58，Ⅱ期为3.32±1.38，Ⅲ期为3.67±1.24)均高于对应正常癌旁组织(分别为1.01±0.15、0.92±0.10和1.05±0.12，均P<0.05)。NCTRIM27组和NCTRIM27+TNF-α组细胞中TRIM27 mRNA的表达水平分别为0.94±0.12和1.67±0.03，TRIM27蛋白表达水平分别为0.31±0.02和0.38±0.01，差异均有统计学意义(均P<0.05)。NCTRIM27+TNF-α组和TRIM27 siRNA+TNF-α组细胞中IL-6 mRNA的表达水平分别为11.35±0.12和5.62±0.15，VCAM-1 mRNA的表达水平分别18.75±0.17和9.35±0.11，STAT3 mRNA表达水平分别16.54±0.10和8.12±0.10，差异均有统计学意义(均P<0.05)。NCIL-6组和IL-6 siRNA组细胞中IL-6 mRNA的表达水平分别为1.10±0.07和0.52±0.16，STAT3 mRNA的表达水平分别为1.01±0.01和0.48±0.12，TRIM27 mRNA的表达水平分别为1.03±0.01和0.30±0.11，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论NSCLC组织和细胞中，TRIM27呈高表达，且促进TNF-α基因的表达，可能通过调控TNF-α诱导IL-6/STAT3信号通路促进肺癌炎症反应的发生。

简介：摘要目的探讨三结构域蛋白27(TRIM27)在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞炎症反应中的作用机制。方法收集2018—2019年于温州医科大学附属平阳医院接受手术治疗的NSCLC患者的癌组织和正常癌旁组织(距离癌组织5 cm)各10例，利用荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)和Western blot法检测TRIM27 mRNA和蛋白的表达水平。TRIM27 siRNA敲减实验分为NCTRIM27组、TRIM27 siRNA组、NCTRIM27+TNF-α组、TRIM27 siRNA+TNF-α组；白细胞介素6(IL-6) siRNA敲减实验分为NCIL-6组和IL-6 siRNA组。采用Western blot法检测各组细胞系中TRIM27、肿瘤坏死因子受体1(TNFR1)、TNFR2以及TNFR相关炎症因子蛋白的表达水平。结果不同分期NSCLC组织中TRIM27表达水平(Ⅰ期为2.81±0.58，Ⅱ期为3.32±1.38，Ⅲ期为3.67±1.24)均高于对应正常癌旁组织(分别为1.01±0.15、0.92±0.10和1.05±0.12，均P<0.05)。NCTRIM27组和NCTRIM27+TNF-α组细胞中TRIM27 mRNA的表达水平分别为0.94±0.12和1.67±0.03，TRIM27蛋白表达水平分别为0.31±0.02和0.38±0.01，差异均有统计学意义(均P<0.05)。NCTRIM27+TNF-α组和TRIM27 siRNA+TNF-α组细胞中IL-6 mRNA的表达水平分别为11.35±0.12和5.62±0.15，VCAM-1 mRNA的表达水平分别18.75±0.17和9.35±0.11，STAT3 mRNA表达水平分别16.54±0.10和8.12±0.10，差异均有统计学意义(均P<0.05)。NCIL-6组和IL-6 siRNA组细胞中IL-6 mRNA的表达水平分别为1.10±0.07和0.52±0.16，STAT3 mRNA的表达水平分别为1.01±0.01和0.48±0.12，TRIM27 mRNA的表达水平分别为1.03±0.01和0.30±0.11，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论NSCLC组织和细胞中，TRIM27呈高表达，且促进TNF-α基因的表达，可能通过调控TNF-α诱导IL-6/STAT3信号通路促进肺癌炎症反应的发生。

简介：摘要目的探讨溴结构域蛋白4(BRD4)通过Noxa诱导骨肉瘤细胞凋亡的机制。方法采用小分子干扰RNA(siRNA)沉默骨肉瘤细胞中BRD4的表达，通过蛋白质印迹法(Western blot)和实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测Noxa及凋亡相关分子表达；应用BRD4降解剂ARV-825处理骨肉瘤细胞，通过Western blot和RT-qPCR方法检测B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)家族蛋白成员Noxa及凋亡相关分子表达。siRNA沉默Noxa在骨肉瘤细胞中的表达后使用BRD4降解剂ARV-825处理骨肉瘤细胞，通过Western blot和RT-qPCR方法检测Noxa的表达，通过细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测骨肉瘤细胞的增殖，采用单因素方差分析比较各组间的差异。结果siRNA沉默BRD4在MNNG/HOS和Saos-2骨肉瘤细胞中的表达后，Western blot实验显示，沉默组BRD4蛋白表达含量低于对照组(MNNG/HOS：0.332±0.076、0.175±0.059比1.000±0.128，F＝67.550，P<0.01；Saos-2：0.264±0.038、0.023±0.005比1.000±0.043，F＝703.600，P<0.01)；沉默组超大B细胞淋巴瘤/白血病(bcl-XL，bcl-2家族蛋白成员)蛋白表达含量低于对照组(MNNG/HOS：0.580±0.100、0.432±0.044比1.000±0.200，F＝15.120，P<0.05；Saos-2：0.397±0.102、0.420±0.083比1.000±0.215，F＝16.550，P<0.05)，沉默组Noxa蛋白表达含量高于对照组(MNNG/HOS：5.508±1.173、4.969±1.335比1.000±0.274，F＝16.870，P<0.05；7.085±1.371、13.750±1.567比1.000±0.264，F＝83.110，P<0.001)，差异均有统计学意义；应用BRD4降解剂ARV-825处理骨肉瘤细胞，处理组Noxa蛋白及mRNA表达高于对照组(Western blot，MNNG/HOS：4.361±0.432、19.570±4.179、22.830±4.035、23.450±4.449比1.000±0.270，F＝28.710，P<0.01；Saos-2：5.154±1.577、35.780±4.295、58.530±3.601、62.120±5.153比1.000±0.318，F＝192.500，P<0.01；RT-qPCR：MNNG/HOS：2.957±0.803、7.656±1.539、7.258±1.523比1.000±0.026，F＝24.01，P<0.01；Saos-2：4.081±0.463、9.594±2.667、7.412±2.300比1.000±0.025，F＝13.520，P<0.01)；处理组bcl-XL蛋白及mRNA表达水平低于对照组(Western blot，MNNG/HOS：0.864±0.191、0.677±0.155、0.512±0.166、0.365±0.077比1.000±0.189，F＝7.646，P<0.05；Saos-2：0.958±0.270、0.799±0.223、0.686±0.234、0.422±0.121比1.000±0.299，F＝2.883，P<0.05；RT-qPCR：MNNG/HOS：0.400±0.175、0.341±0.164、0.332±0.041比1.000±0.075，F＝15.080，P<0.01；Saos-2：0.530±0.062、0.584±0.051、0.567±0.091比1.000±0.020，F＝38.780，P<0.01)。使用siRNA沉默Noxa在Saoa-2骨肉瘤细胞中的表达，再使用BRD4降解剂ARV-825处理骨肉瘤细胞，Noxa蛋白表达水平低于对照组(0.088±0.025、0.183±0.015比1.000±0.112，F＝169.900，P<0.01)，ARV-825处理组对骨肉瘤细胞增殖的抑制作用低于对照组，ARV-825浓度为0.03 mol/L时效果明显(1.000±0.097、0.971±0.489比0.090±0.017，F＝199.200，P<0.01)，差异有统计学意义。结论BRD4通过抑制Noxa对骨肉瘤细胞发挥抗肿瘤作用。