简介:BackgroundTheregulationoft-PAgeneistheessenceandcoreofthrombosis.Therefore,thepresentstudyaimedtopreparenanot-PAgenecoatedstentandtoobserveitseffectoncoronarystentthrombosisindogs.MethodsHighlyexpressedt-PAgeneplasmidwasconstructedandalbuminnanot-PAgenecoatingstentwasprepared.Themajorbranchvesselsofdogcoronaryarterywerepre-expandedwitha3.0mm×20balloonwith8-10atmosphericpressure.10dogsofthecontrolgroupwereimplantedwithbaremetalstent;while12dogsoftheexperimentalgroupwereimplantedwithnanot-PAgenecoatingstent.Bothgroupswerenotgivenanti-coagulationtreatments.Bloodsamplesweretakenfort-PAandD-dimerbeforetheoperation,at1,2,4and8weeksafteroperation.Pathologicalanalysisfoundthrombosisinthecavityandthehyperplasiaoftheintima.t-PAexpressionwasdetectedbyimmunohistochemicalindirectly,andthethicknessoftheintimaofthesectioncrosswasdirectlymeasuredbymorphometry.Liver,heart,kidneysandlungweretakenforpathologicalobservation.ResultsAllexperimentalanimalssurvivedatpostoperative8weeks.Vascularstentthrombosiswasseenin10casesofthecontrolgroupwiththethrombosisrateof100%;whilewasseenin2casesamong12casesoftheexperimentalgroupwiththethrombosisratewas16.67%(P=0.00087).Immunohistochemicalstainingshowedthatthepositivet-PAgenetransfectionoftheexperimentalgroupwasmainlydistributedonthesurfaceofhyperplasiaintima,andvascularwallt-PAexpressionofthecontrolgroupwasnegative.Positivet-PAsignalwasnotfoundintheliver,heart,kidneysandlung.ConclusionNanot-PAgenevectorcoatingstentcaneffectivelyexpresst-PAinvascularwallandeffectivelypreventsstentthrombosis.
简介:摘要目的分析丝裂霉素(MMC)联合组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)抑制青光眼滤过手术后增殖的临床效果。方法研究对象选取本院2011年7月至2014年6月收治的50例青光眼患者,均接受小梁切除术治疗,随机方法分组。对照组患者采用MMC治疗,实验组患者采用MMC联合t-PA治疗。术后随访6个月,对比分析两组患者手术前后眼压的变化和术后滤过道PCNA阳性细胞数的差异性。结果经过手术治疗后两组患者眼压均有所下降,其中实验组下降幅度明显大于对照组,经t检验分析发现组间差异有统计学意义(P<0.05)。实验组患者术后7d、14d、28d、6个月时滤过道增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞数均明显低于对照组,经t检验分析发现组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用MMC联合t-PA抑制青光眼滤过手术后增殖效果较满意,值得临床推广应用。
简介:组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)是以丝氨酸为活性中心的蛋白酶。它激活纤溶酶原成为纤溶酶,这依赖于纤维蛋白,它不能单独激活循环血流中的纤溶酶原。由于其对纤维蛋白有很高的亲和力,故血栓形成时,它能特异地和血栓中的纤维蛋白结合,纤溶酶也通过其赖氨酸残基与纤维蛋白结合,形成三元复合物。这样的机理决定了t-PA可选择性地溶解血栓中的纤维蛋白,而对血流中的纤维蛋白原、凝固因子等没有破坏作用。但由于t-PA在体内的半衰期甚短(约5分钟),且在血浆中已被纤溶酶原激活抑制剂抑制,故临床上溶栓时需大剂量连续用药,不仅费用昂贵而且有引起系统性纤溶系统出血的危险。因此设计半衰期延长,且亲和力不变甚至提高的t-
简介:目的观察丹参素对糖尿病脑梗塞大鼠脑组织纤溶酶原激活物及其抑制剂mRNA表达,及对血浆纤溶功能的影响,探讨其可能作用机制。方法糖尿病大鼠丹参素治疗一周后,应用自体血栓注入大鼠脑动脉制成糖尿病脑梗塞模型。ELISA方法检测血浆中t—PA、PAI—I含量,RT—PCR方法测定脑组织中t—PA与PAI—I,u—PA与NSP的mRNA表达。结果丹参素治疗组促纤溶因子t—PA含量及mRNA表达升高、抑制因子PAI-I含量及mRNA表达降低。作用强度随丹参素浓度的增大而增强。u—PAmRNA、NSPmRNA的表达无显著性变化。结论丹参素可显著改善糖尿病脑梗塞大鼠血浆纤溶功能,通过促进t—PA含量及其mRNA表达、抑制PAI—I含量及其mR—NA表达,而提高鼠脑纤溶功能。
简介:目的:利用人脐静脉内皮细胞体外培养模型,探讨肾上腺素刺激状态下海带多糖L01对内皮细胞的保护作用,以及其对其分泌的组织型纤溶酶原激活物(t-PA)的影响,从内皮细胞抗血栓功能方面探讨海带多糖L01对心血管系统的保护作用。方法:体外培养人脐静脉内皮细胞系ECV-304,用肾上腺素刺激24h、48h、72h采样,ELISA法测定HUVECs培养上清液中的t-PA含量,逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测HUVEC细胞内t-PAmRNA的表达,其扩增产物经电泳后密度扫描及半定量分析。结果:肾上腺素模型组HUVECs培养液中t-PA(24h、48h)含量明显增加,;单给海带多糖对HUVECst-PA分泌无影响。海带多糖L01在肾上腺素刺激下给药24h,48h后t-PA抗原分泌明显降低(P〈0.01),且具有一定的量效关系,但HUVECst-PAmRNA表达各组均无明显差异。结论:肾上腺素可刺激内皮细胞分泌t-PA抗原,海带多糖L01对血管内皮具有一定的保护作用,减少肾上腺素刺激下HUVECs分泌t-PA,而对t-PAmRNA表达无明显影响。
简介:利用同源模建方法预测了t-PAK1区的三维结构。通过结构叠合确定了t-PAK1、K2区,纤溶酶原K1、K4区及UKK区的赖氨酸结合口袋。静电势计算及疏水性分析表明,在t-PAK2区以及纤溶酶原K1、K4区与纤维蛋白裸露的赖氨酸之间存在明显的静电势互补和疏水面契合。确定了影响Kringle区结合口袋与赖氨酸亲和的重要氨基酸,分析了t-PAK1区、UKK区不能结合赖氨酸的原因,由此设计了具有赖氨酸亲和力的新型t-PAK1区及UKK区突变体。利用模拟残基突变技术预测了突变体的结构变化,分析了突变后t-PAK1区及UKK区与赖氨酸亲和力的变化,初步在理论上肯定了设计方案的合理性。
简介:构建了二氢叶酸还原酶(dhfr)选择基因启动子上游无增强子(cnhancer)的组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)组合突变体FrGGI真核表达质粒pZLFrGGI。将pZLFrGGI酶切线性化,采用大剂量DNA电击介导法,转染dhfr基因缺陷型中国仓鼠卵巢细胞系(CHO-dhfr-)。用氨甲喋呤(MTX)筛选转染细胞。混合加压后,挑选克隆,在1×10-7mol/LMTX压力下,得到了表达水平达1500~2500IU/106细胞·24小时的细胞株。此细胞株表达水平稳定,形态良好,倍增时间为36小时,且有进一步提高表达水平的潜能,有望发展为工程细胞株。