简介:摘要《鲍威尔写本》是19世纪在新疆地区出土的梵文文书,其中常用的10种性味甘甜的配伍药物被称为“十甜药(jīvanīya)”。参考印度阿育吠陀经典古籍和现代阿育吠陀药典,研究发现:十甜药味甘、性凉,主要用于滋补、缓和过盛的风。该药存在酥油剂、油剂、灌肠剂、外敷膏药等多种剂型。《鲍威尔写本》医学卷中,该组合可用于治疗肺相关的消耗性疾病、癫痫、儿童的虚劳和发热。《鲍威尔写本》对十甜药的应用,源于阿育吠陀经典理论。再与中医理论进行对比发现,十甜药治肺虚的理念与《素问》论“风消”的理念相符。由此可见,印度传统医学与中医的理论,存在很多共性,如均以甜味药滋补,以甘草、川贝母为治肺病常用药。
简介:摘要以葫芦脲为主体的超分子化学近年来得到了快速发展,目前已成为超分子化学中最为活跃的研究领域之一,许多无荧光或弱荧光物种采用传统的荧光分析方法无法实现荧光测定,因此使之在药代动力学监测和痕量测定方面变得十分困难.近年来,通过建立的新型荧光探针体系葫芦脲-异喹啉类药物使许多无荧光的药物建立了高灵敏度的分析方法.本论文旨在借助这一新型荧光探针体系,采用荧光光谱法、核磁共振波谱法、密度泛函理论等手段从实验和理论两个方面研究了盐酸克伦特罗与葫芦脲主-客体之间的相互作用,确立了这一探针体系与目标分析物的作用机理,建立了无荧光的盐酸克伦特罗的荧光探针新方法.关键词葫芦7脲,克伦特罗,荧光滴定法,荧光探针AbstractInrecentyears,withtherapiddevelopmentofthesupramolecularchemistryofthemainbodyoftheurea,themostactiveresearchfieldsofthesupramolecularchemistryhavebecomeoneofthemostactiveresearchfields.Inrecentyears,anewtypeoffluorescentprobesystemhasbeenestablishedfortheestablishmentofahighsensitivityanalysismethodformanynonfluorescentdrugs.Thisthesisisforthepurposeofusingthisnovelfluorescentprobesystem,clenbuterolandcucurbiturilhostguestinteractionswasstudiedfromtheaspectsofexperimentandtheorybymeansoffluorescencespectroscopy,nuclearmagnetGicresonancespectroscopy,densityfunctionaltheory,establishthemechanismoftheprobesystemwithatargetanalyte,nofluorescenceofclenbuterolhydrochloGridefluKoeryeswcoerndtsprobemethodwasestablished.cucurbit7uril,clenbuterol,fluorescencetitration,fluorescenceprobe中图分类号R96文献标识码B文章编号1008-6315(2015)12-0402-02
简介:摘要目的应用腺相关病毒(AAV)-规律间隔成簇短回文重复序列及其相关核酸酶9(CRISPR/Cas9)系统体外实验研究基因治疗威尔森氏症(WD)。方法选用2月龄雄性Toxic milk (TX)小鼠作WD模型,设计小向导RNA(sgRNA)并构建含有CRISPR元件的AAV载体质粒命名为pAAV-sgRNA1、2、3,制备AAV,病毒滴度达1~4×1013 GC/ml;感染WD肝细胞,72 h后提取基因组DNA,聚合酶链反应(PCR)后测序检测基因编辑效率,筛选出其中活性最高者sgRNA1,构建相应的同源修复模板(HT)质粒命名为pAAV-HT,应用AAV-sgRNA1和AAV-HT共感染WD肝细胞,测序和T7E1酶切检测模板修复效率;用HT特异性引物行PCR,验证HT掺入。组间比较采用Student’s t检验。结果Sanger测序结果显示,sgRNA1在体外有最高的编辑效率[(20.2±2.3)%],与sgRNA2、3比较[(3.1±1.3)%、(14.6±2.0)%],差异有统计学意义(P<0.05)。进一步用HT进行基因修正,能检出特异性修正后的ATP7B基因;二代测序测序显示修复率为(7.9±2.7)%。结论AAV-CRISPR系统在体外可以达到较高编辑效率和修复效率。
简介:摘要目的应用规律间隔成簇短回文重复序列及其相关核酸酶9系统(CRISPR/Cas9)体外实验研究修正威尔森氏症(WD)基因。方法选用来源于DL近交系小鼠的Toxic milk小鼠(购自美国Jackson Laboratory公司)作WD模型,设计3个CRISPR来源的RNA (crRNA)-crRNA001/002/003,应用CRISPR/Cas9核糖核蛋白复合物(RNP)方法转染WD肝细胞,48 h后提取基因组DNA,聚合酶链反应(PCR)后测序检测基因编辑效率,筛选出效率最高者crRNA001,并设计相应的单链寡核苷酸(ssODN)修复模板;用crRNA001和ssODN共转染肝细胞,模板特异性引物行PCR,验证ssODN掺入。组间比较采用Student’S t检验。结果Sanger测序结果显示,crRNA001的编辑效率为(57.8±5.1)%。用ssODN共转染细胞后,模板特异性引物行PCR,能扩增出修正后的铜离子转运ATP酶β肽(ATP7B)基因条带;二代测序结果显示,ATP7B基因修复效率为(7.45±2.54)%。结论CRISPR/Cas9 RNP转染能达到较高编辑效率,相应的ssODN可以高效修复缺陷ATP7B基因,为进一步的体内实验提供理论和实验基础。