回医烙灸疗法对大鼠脊髓损伤后神经修复机制研究

(整期优先)网络出版时间:2015-07-17
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回医烙灸疗法对大鼠脊髓损伤后神经修复机制研究

孙治博夏铂徐武清

孙治博夏铂徐武清

(宁夏医科大学宁夏银川750004)

【摘要】目的:探讨回医烙灸疗法对大鼠脊髓损伤后神经修复功能的影响。方法:采用Allen's法制备急性脊髓损伤模型。分为假手术组(A组)、模型组(B组)、西药组(C组)、2小时烙灸组(D组)、6小时烙灸组(E组),其中50只于第1、2、4、6、8周采用脊髓损伤运动功能BBB法进行评分。另外25只取损伤脊髓组织做HE染色,观察脊髓损伤后形态学的变化。结果BBB评分表明D、E组效果明显优于A、B、C组,且D组疗效最显著。HE染色D、E组脊髓形态好于B、C组。结论:回医烙灸疗法对脊髓损伤大鼠神经功能的恢复有促进作用,且前期回医烙灸干预的效果好于后期干预。

【关键词】回医烙灸;大鼠;脊髓损伤;神经修复

【中图分类号】R285【文献标识码】B【文章编号】2095-1752(2015)07-0359-01

脊髓损伤的治疗是医学界的一大难题,尤其损伤后的神经再生功能,更是难上加难。回医烙灸疗法是一种民族医学疗法,本人跟随导师采用本法在临床治疗中发现,本法对脊髓损伤病人的康复具有一定疗效。为了验证本法的切实疗效,本实验采用脊髓损伤运动功能BBB评分法及组织形态学检测,观察回医烙灸疗法对损伤大鼠神经传导功能的影响。

1.材料和方法

1.1材料:选取清洁级SD大鼠50只。随机数字表法分为5组:A组(假手术组)、B组(模型组)、C组(西药组)、D组(2小时烙灸组)、E组(6小时烙灸组)。

1.2方法:采用改良的Allen's造模。

1.3手术操作:大鼠用1%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉。以T10位中心,沿脊柱方向取一长约3.0cm的切口,切开皮肤、肌肉分离并显露棘突,分离附着于棘突两侧的骶棘肌,将T10椎板全部切除,保留硬脊膜。用改良式Allen's打击装置,以脊髓后正中血管为中心,采用20g冲击棒自5cm高度垂直自由下落击打于脊髓。下落撞击后,见鼠双下肢不完全瘫痪,标志撞击成功。

1.4干预:A组假手术组,只做椎板切除,不做脊髓损伤;B组模型组,造模后腹腔给予和D组等量生理盐水,持续8周;C组:醋酸泼尼松治疗组(西药组),脊髓Allen's打击损伤后半小时内首次按20mg/kg,随后按4.6mg/kg/h给药,每1小时给药一次,连续给3次,之后同B组一样每日给予等量生理盐水,持续3天;D组2小时烙灸组,造模后2小时采用烙灸治疗,烙灸每日一次,一次5分钟,持续8周;E组6小时烙灸组,脊髓Allen's打击损伤后6小时采用烙灸治疗,烙灸每日一次,持续8周。

1.5具体治疗方法:烙灸组在损伤大鼠两侧夹脊穴(在距损伤上下端两个椎体的棘突间隙旁开距中线3-4mm处取穴)、大椎穴、命门穴上放约0.5厘米厚的生姜片,用回医烙灸器直接烙烫于放生姜片的穴位上,使局部发红。

1.6BBB评分:具体评分等级参见Basso等[1]的方法。所有大鼠术前1天行评分,术后次日评分,3天时对评分差别超过2分者进行剔除。此后分别于1、2、4、6和8周评分,共5次。所有观察均在18:00于开放空间进行,观察时间为10分钟,采用双人、双盲独立观察大鼠双后肢的运动感觉功能并记录。

1.7组织形态学改变,每组又按不同时间点分别在1天,3天,7天,14天,28天各取1只,共计25只,做HE染色,观察脊髓损伤后形态学的变化。

2.结果

2.1BBB评分结果其它组评分均小于A组。损伤后1周4组动物评分<7分,差异无显著性;2周时评分:C、D和E组>B组,差异有显著性;4周时评分:E组、C组>B组,差异有显著性;6周时评分:D组>E组>C组>B组,差异有显著性;8周时评分:D组>E组>C组>B组,差异有显著性。

2.2HE染色:A组损伤后脊髓结构正常;其它组损伤后1~3天脊髓结构破坏,神经元死亡,神经纤维肿胀,灰白质分界不清。损伤7天后脊髓内坏死,囊腔及空洞形成,周围有炎性细胞弥漫。伤后14天,脊髓组织疏松,大量胶质细胞增生及空洞形成,神经元细胞减少。B、C组空洞形成数明显高于D、E组。伤后28天,脊髓组织疏松脱落坏死,大量脊髓空洞,灰白质界限逐渐恢复,神经元数目稀疏。D、E组神经元细胞减少程度及空洞形成均轻于B、C组。

3.讨论

脊髓损伤后神经修复能力十分有限,源于损伤后不仅造成机械性损伤,而且局部组织还会出现一系列病理改变,包括组织缺血坏死,电解质紊乱,炎性改变,细胞凋亡等。激素类药物是目前脊髓损伤后广泛应用于临床的药物之一,但激素类药物对远期功能恢复没有显著的提高[2]。回医烙灸疗法能够疏通经络,促进血行,有利于神经组织再生,并通过排出腐败体液,达到人体所需要的体液平衡,对远期功能恢复有明显提高。BBB法是一种定量、客观的检测手段,能够对脊髓损伤作出功能性诊断和定量分析。本实验数据证实2小时回医烙灸组明显优于西药组和模型组,回医烙灸前期干预组的效果好于后期干预组,证实回医烙灸对损伤后的神经功能恢复确有促进作用。通过HE染色观察也证实,回医烙灸治疗的脊髓组织形态要好于模型组和西药组。但是脊髓损伤的原因是多方面的,回医烙灸的作用机制尚未有人深入研究,今后要通过更多现代化手段进行研究。

【参考文献】

[1]AllenAR.Remarksonthehistopathologicalchangesinthespinalcordduetoimpact:Anexperimentalstudy[J].JNervMentDis,1994,41(2):141.

[2]TakamiT,OudegaM,BetheaJR,etal.Methylpred-nisoloneandinterleukin-10reducegraymatterdamageinthecontusedFischerratthoracicspinalcordbutdonotimprovefunctionaloutcome[J].Neurotrauma,2002,19(5):653-666.

通讯作者:夏铂,男,副教授,主要研究:针推骨伤

徐武清,男,教授,主要研究:中医外科

基金项目:国家自然科学基金(编号:81360559)