薄层扫描法测定复方芪防颗粒中黄芪甲苷的含量

薄层扫描法测定复方芪防颗粒中黄芪甲苷的含量

林深常1张锦兴2

林深常1张锦兴2

(1中山市人民医院528403;2中山市人民医院528403)

【摘要】目的测定中药制剂复方芪防颗粒中黄芪甲苷的含量。方法采用薄层扫描法。结果测定方法的平均加样回收率为99.02%，RSD为3.26%。结论本方法操作简便、准确、重现性好，为该制剂质量控制提供一定的参考。

【关键词】复方芪防颗粒黄芪甲苷薄层扫描法

【中图分类号】R937.2【文献标识码】B【文章编号】2095-1752（2012）03-0327-02

复方芪防颗粒是本医院的中药自制制剂，该制剂由黄芪、防风、白术、天冬、麦冬等中药材组成，具有御卫固表、养阴润燥的功效。临床上用于治疗慢性荨麻疹、皮肤划痕症、慢性湿症等病症，疗效确切。该制剂中药材成分复杂，为控制本制剂的内在质量，保证临床用药效果，黄芪甲苷作为制中的主要成分之一，本文参考有关文献[1～3]，采用薄层扫描法测定制剂中黄芪甲苷的含量，作为该制剂生产质量的内部控制标准。

1仪器与试药

1.1仪器

CS—9320双波长薄层扫描（日本岛津）、HM—202型电子天平（日本AND公司）、定量毛细管（DrunmondScientificco.）、薄层层析用硅胶G（青岛海洋化工集团公司）。

1.2试药

黄芪甲苷对照品（批号0737-9910）购于中国药品生物制品检定所。复方芪防颗粒由本医院制剂室生产的中药制剂，所用药材均为生产用同批药材。

试剂：水为双蒸水，其它试剂均为AR级。

2方法

2.1薄层条件20×20cm硅胶G薄层板，氯仿—乙酸乙酯—甲醇—水（22:35:20:11）10℃以下放置过夜的下层液为展开剂，饱和15min后展开，喷以10%浓硫酸乙醇溶液，100℃烘8～10min至斑点显色清晰，并覆盖同样大小的玻璃板，周围以胶布固定，按照薄层色谱法操作。

2.2测定波长的选择测定了样品色谱及对照色谱中黄芪甲苷斑点的吸收光谱，结果表明二光谱吸收相同，故选定了λS=525nm，λR=695的双波长扫描测定法。

2.3对照品溶液的制备精取黄芪甲苷对照品，加甲醇制成每1ml含黄芪甲苷1mg的溶液，即得。

2.4供试品溶液的制备精称本品粉末15g，吸取水饱和的正丁醇100ml，称重，与水浴上回流4h，取下称重，加水饱和的正丁醇补至原重，摇匀，过滤。取滤液50ml，以1%的氢氧化钠溶液提取4次，每次25ml，合并提取液，再以正丁醇饱和的水洗至中性，提取液挥干，残渣加甲醇使溶解，转移至1ml量瓶中加甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2.5阴性对照溶液的制备处方中除去黄芪按制剂工艺制备，制得阴性对照品溶液。

3结果

3.1专属性试验按上述仪器和试验条件，将黄芪甲苷对照品溶液，供试品溶液及阴性对照溶液分别进样测定，结果其它成分对黄芪甲苷的测定无干扰（见图1）。

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图1：1～3、供试品

4.黄芪甲苷对照品

5.阴性对照

3.2线性考察精密称取黄芪甲苷对照品1.20mg，加甲醇溶解于1ml量瓶中，摇匀，备用。精密吸取黄芪甲苷对照品溶液1.0、2.0、4.0、6.0、8.0ul，分别点于同一薄层板上，照上述薄层条件及薄层色谱法实验。结果经回归处理得方程：Y=489.39x—93.196，r=0.9996，表明黄芪甲苷在1.15～8.82ug范围内，浓度与峰面积有良好的线性关系。

3.3稳定性试验取同一供试品溶液点样10ul，在2h内每间0.5h测定1次，结果为X=1188.278，RSD为2.77%，表明在2h内稳定。

3.4精密度试验对同一对照品溶液点样4ul，重复测定5次，峰面积积分值分别为1017.602、1043.757、1058.993、1079.889、1029.012。

X=1047.011，RSD为2.44%，表明精密度符合规定。

3.5重现性试验取同一批样品液，重复测定5次，结果（mg/10g）0.2106、0.2117、0.2004、0.2021、0.1993，X=0.2048，RSD为2.89%。结果RSD为1.21%。

3.6回收率试验称取已知含量的同一批号样品5份各10g，分别加入黄芪甲苷对照品0.1mg、0.2mg两组，按样品测定方法测定，计算回收率，结果见表1。

表1:黄芪甲苷回收率试验结果经验交流2012年1月

3.7样品含量测定分别吸取对照品溶液2、4ul，供试品溶液10ul，点于同一薄层板上，按上述样品制备及色谱条件测定。测定10批样品结果见表2。

表2:10批样品中黄芪甲苷的含量测定结果

根据上表20个测定数据表明，最低测定值为0.1782，最高值为0.2291，平均值为0.2001。综合分析，本制剂中黄芪甲苷含量应不少于0.16mg/10g。

4讨论

4.1本方法对样品的稳定性进行了考察。5批样品连续考察3个月，样品性状无异常变化，卫生学检查合格，被检查项目定性鉴别均为阳性，定量测定黄芪甲苷含量分别为：0.2058、0.2144、0.2277mg/10g，表明样品稳定性较好。

4.2本方法因点样量为10ul，并用10%浓硫酸乙醇溶液显色，因此最好选用薄板上硅胶厚度为0.5mm，应用0.2%以下CMC-Na，以防止显色时薄板背景变深。

4.3文章通过对样品成分的定性分析，方法学考察，定量分析，稳定性考察，综合分析建立复方芪防颗粒中黄芪甲苷的含量测定方法，以薄层扫描法测定，黄芪甲苷的含量应不少于0.16mg/10g，为制剂的质量控制提供依据。

参考文献

[1]中华人民共和国药典（一部）[S].北京：中国医药科技出版社，2010:283～284.

[2]杨志华等.健肾胶囊中黄芪甲苷的含量测定.江西中医学院学报[J]，2006，18(2）:40～41.

[3]苗明三等主编.现代实用中药质量控制技术[M].北京：人民卫生出版社，2002：890.