环氧化酶-2在宫颈鳞癌放疗前后的表达及意义

环氧化酶-2在宫颈鳞癌放疗前后的表达及意义

王亮1毛熙光2杜小波1陆琳1季语祝1张骄

王亮1毛熙光2杜小波1陆琳1季语祝1张骄1

（1绵阳市中心医院妇产科四川绵阳621000；2泸州医学院妇产科四川泸州646000）

【中图分类号】R737.3【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2011）23-0188-03

【摘要】目的1.检测COX-2在宫颈鳞癌放疗前、后组织中的表达，探讨COX-2与宫颈鳞癌放疗疗效的相关性。方法采用免疫组织化学SP法检测29例放疗前、后宫颈鳞癌组织中COX-2的表达。应用SPSS17.0统计软件，采用Mann-Whiteney检验，以P<0.05为差异有统计学意义。结果COX-2在宫颈鳞癌放疗前、后组织中表达存在统计学差异，这种差异与患者放疗效果相关。结论COX-2在宫颈鳞癌放疗后组织中的表达总体呈下降趋势；且在放疗后完全缓解组(CR)中下降更明显，在部分缓解组（PR）中表达下降无统计学意义，提示COX-2的表达与宫颈鳞癌的放疗疗效相关。

【关键词】宫颈癌宫颈上皮内瘤变环氧化酶-2放疗

ExpressionandsignificanceofCOX-2inCervicalSquamousCancerbeforeandafterradiotherapy

【Abstract】Objective：TodetecttheexpressionofCOX-2inadvancedcervicalsquamouscarcinomabeforeandafterradiotherapy.Methods:ImmunohistochemistrywasusedtotesttheexpressionofCOX-2incervicalsquamouscancerandtheexpressionofCOX-2insquamouscancerbeforeandafterradiotherapy.Mann-Whiteneytestwasused,whenP<0.05,ithasstatisticalsignificance.Result:TheexpressionofCOX-2afterradiotherapywasdecreasedsignificantlycomparedwiththosebeforeradiotherapy(P=0.001<0.05).Conclusion:TheexpressionofCOX-2afterradiotherapydecreasedsignificantlycomparedwiththosebeforeradiotherapy.ItsuggestedthattheexpressionofCOX-2wasrelatedtotheeffectsofradiotherapy.

【Keywords】CervicalcancerCervicalintraepithelialneoplasiaCyclooxygenase-2Radiotherapy

宫颈癌是全球女性第三大常见恶性肿瘤，其治疗是采用以手术和放疗为主，化疗为辅的综合治疗。目前综合治疗越来越受到重视，放射增敏正是利用物理、化学或生物手段促使肿瘤细胞增加放射敏感性，减少或避免正常组织的放射损伤，达到最佳的放疗效果。如果能找到参与肿瘤细胞放疗敏感性的调节关键因子并对其进行调节增强肿瘤治疗的敏感性，这样就有可能降低肿瘤病人放疗的副反应和死亡率。环氧化酶（cyclooxygenase,COX）是分解花生四烯酸、生成各种内源性前列腺素（prostaglandin，PGs）过程中的一种限速酶。80年代有学者发现PGs对正常组织和细胞具有放射保护作用，从而发现COX-2及其产物PGs可使肿瘤组织对放射治疗或化疗药物产生抵抗效应[1，2],降低治疗效果。因此研究COX-2在宫颈鳞癌放疗前、后组织中的表达及变化，探讨COX-2表达与放疗疗效的关系，为进一步指导临床治疗提供依据。

1资料与方法

1.1临床资料

标本收集于2006年—2009年间在绵阳市中心医院行术前放疗的29例患者放疗前直接活检标本和放疗后手术切除的宫颈癌组织。患者年龄在40-66岁之间，平均中位年龄50岁。病理类型均是鳞癌，其中Ⅰ期1例，Ⅱ期23例，Ⅲ期5例，中分化24例，低分化15例。每个患者实施术前放疗，采用腔外放射使外照射剂量达到40GY后，选择4周后进行手术。所有患者在放疗过程中均未因出现严重副反应而中断治疗。

1.2临床疗效的判定标准

于放疗剂量达到40GY后按照WHO实体瘤的近期疗效评定标准[3]进行疗效评价，临床疗效的判定标准：可见的肿瘤病变完全消失即完全缓解（CR）；肿瘤病灶的最大直径及其最大垂直横径的乘积缩小达50%以上，时间不少于4周即明显缓解（PR）；肿瘤病灶的两径乘积缩小不足50%，且无新病灶出现，即稳定（SD）；肿瘤病灶的两径乘积增大25%以上或出现新病灶即进展（PD）。

1.3实验方法

1.3.1步骤石蜡切片，烤干；脱蜡；梯度酒精依次浸泡;抗原修复；蒸馏水浸泡；阻断；PBS缓冲液冲洗；滴加一抗；孵育盒内4℃冰箱中过夜孵育；PBS冲洗；滴加一抗，二抗；显色；苏木素染液复染；切片依次置于梯度酒精脱水，透明，封片；显微镜下观察。

1.3.2结果判读由三位病理科医生在双盲情况下独立完成阅片，当有不同评判结果时重新进行评估。以细胞浆内出现棕黄色颗粒者为阳性细胞。所有玻片的评分是采用既可反映染色强度又可反映阳性细胞数的HSCORE方法。按染色的强度，细胞染色阴性记为0分，细胞弱阳性染色记为1，细胞中等强度染色记为2，细胞强染色记为3。按公式计算HSCORE=Σ(I×PC)，其中I代表染色强度，PC代表每种染色强度的阳性细胞比例，根据这两个值的乘积之和来计算每张染色玻片的分值。

1.4统计学分析

采用SPSS17.0统计软件包进行数据处理,采用χ2检验，Mann-Whiteney检验，p<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1宫颈鳞癌放疗组临床疗效

29例宫颈鳞癌患者经放疗后肉眼观察病灶均有不同程度的缩小，其中完全缓解（CR）17例（17/29,58.62%）,患者部分缓解（PR）12例（12/29,41.38%）,稳定（SD）0例，无一例患者进展（PD）。

2.2COX-2在宫颈鳞癌放疗前、后的表达整体变化

放疗组29例标本COX-2在放疗前宫颈鳞癌组织中阳性表达24例，阳性表达率为82.76%（24/29），HSCORE评分均值为61.72±33.39;放疗后宫颈组织中COX-2阳性表达为8例，阳性表达率为27.59%（8/29），HSCORE评分均值为20.69±38.54，放疗后COX-2表达较放疗前呈现显著下降趋势（P<0.05），具体见表1。

表1放疗前、后宫颈鳞癌组织中COX-2的表达

注：*P=0.001<0.05指差异具有统计学意义

2.3不同疗效组放疗前、后宫颈组织中COX-2的表达比较

同一疗效组放疗前、后宫颈鳞癌组织中COX-2的表达有差异，具体见表2。CR组17例，放疗前COX-2阳性表达14例，阳性表达率为82.35%；放疗后阳性表达1例，阳性表达率为6%。CR组放疗前、后COX-2的表达差异存在统计学意义，放疗后COX-2表达呈明显下降趋势（P=0.008<0.01）。PR组12例，放疗前COX-2阳性表达11例，表达率为91.67%；放疗后COX-2阳性表达5例，表达率为41.67%，放疗后COX-2表达下降无统计学意义（P=0.099>0.05）。

表2同一疗效组放疗前后宫颈组织中COX-2的表达

注：P1指同一疗效组放疗前后表达的变化

P2指不同疗效组放疗前后表达的变化

COX-2在不同疗效组放疗后宫颈鳞癌组织中表达有差异，两种不同疗效组之间放疗前COX-2的表达量差异无统计学意义（P=0.135>0.05）；放疗后两组之间比较COX-2表达差异存在统计学意义（P=0.003<0.05）。

3讨论

宫颈癌的发生发展是多因素综合作用的结果，从正常宫颈发展到浸润癌是一个漫长的复杂过程。近年来宫颈癌的发病率和死亡率明显下降，但晚期及复发性宫颈癌的治疗仍然是个难题。最近，一些研究发现宫颈癌的发生、发展和对治疗的反应同诸如EGFR和血管内皮生长因子（VEGF）、COX-2等细胞因子、关键基因和调控分子有着密切的关系。已有的研究发现COX-2表达可启动炎症反应并改变与增殖、凋亡相关的基因活性，参与人类恶性肿瘤的发生发展过程。

3.1COX-2的结构及功能

环氧化酶（cyclooxygenase,COX）是一种膜结合蛋白，是参与花生四烯酸的环氧酶代谢途径中的限速酶，可催化花生四烯酸转化为前列腺素（prostaglandings,PGs），维持机体的各种生理、病理过程。它有两种异构体，即COX-1和COX-2，分别由位于不同染色体的独立基因编码[4]。COX-2基因位于人类第1号染色体q25.2-25.3上，长约8.3kb,含有10个外显子和9个内含子。COX-2属于“快速反应基团”，主要位于某些细胞核膜上，参与炎症和肿瘤的过程[5]。COX-2通常在静息状态下不表达；当受到刺激后经活化的酪氨酸激酶介导的通路而诱导表达，从而改变某些肿瘤相关基因的活性，促进了恶性肿瘤的发生发展。

3.2COX-2在宫颈鳞癌放疗前、后的表达及与放疗疗效的关系

目前宫颈癌的治疗是采取以手术和放疗为主的综合治疗，其获得的生存优势毋庸置疑，但学者发现提高疗效的同时伴随着严重的副反应发生；随着高强度治疗方案的实施，患者常因正常组织的严重损伤产生的并发症死亡率相应增加[6,7]。在相同的放疗条件下，不同患者即使肿瘤期别、组织类型、病理分级、部位等完全相同，其放疗效果及临床预后也大不相同。原因是放疗效果除与前述条件相关外，还取决于肿瘤细胞对放射治疗的敏感性。COX-2的主要产物PGE2被证实是对抗放射损伤的细胞保护剂[8]。

本研究检测了29例宫颈鳞癌患者放疗前、后宫颈组织中COX-2的表达，结果表明COX-2表达在放疗前、后存在明显差异，放疗后宫颈组织中COX-2的表达显著下降，但这种差异与不同临床效果组之间存在相关性。在CR组放疗前、后宫颈组织COX-2表达差异具有统计学意义，放疗后表达下降更明显，而在PR组放疗后COX-2表达有所下降，但下降无明显统计学意义；并且观察到在一些部分缓解组中，放疗后COX-2表达并未出现明显下降，反而比放疗前略有升高趋势，但差异无统计学意义。放疗后在两种不同疗效的病例中，COX-2的表达存在明显差异，说明对放射敏感的患者放疗后COX-2表达更低，提示COX-2表达与患者放疗疗效相关。放疗后宫颈肿瘤细胞增殖活性明显下降并对应相应的临床治疗效果，反应了患者对放射治疗的敏感性及其临床预后，为临床评价放疗效果、是否需进一步治疗提供依据。

附图如下：

参考文献

[1]ChenHH,SuWC,ChouCY,etal.Increasedexpressionofnitricoxidesynthaseandcyclooxygenase-2isassociatedwithpoorsurvivalincervicalcancertreatedwithradiotherapy[J].IntJRadiatOncolBiolPhys,2005,63(4):1093-1100.

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[3]刘泰福.现代放射肿瘤学[M].上海:复旦大学出版社，2001：266-268.

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