骨中宝质量标准研究

骨中宝质量标准研究

朱沛韶1张韦娜2孙丽丽1杨立伟1

朱沛韶1张韦娜2孙丽丽1杨立伟1

（1广东省食品药品检验所广东广州510180；2广东药学院广东广州510006）

【摘要】目的建立骨中宝质量控制标准。方法采用GC法对处方中的樟脑，水杨酸甲酯进行了鉴别；用GC法测定了方中薄荷脑的含量。结果在GC色谱中检出樟脑，水杨酸甲酯；薄荷脑在0.5mg•mL-1～0.45mg•mL-1范围内呈良好线性关系（r=0.999），平均回收率为99.5％，RSD=1.0％（n=6）。结论本法定性、定量简便，专属性强，准确度高，能有效地控制骨中宝的质量。

【关键词】骨中宝GC樟脑水杨酸甲酯薄荷脑

【中图分类号】R927.11【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）17-0110-02

QualityStandardforGuzhongbao

ZhuPeishao1ZhangWeina2Yangliwei1Sunlili1

（1.GuangdongInstituteforFoodandDrugControlGuangzhou510180；2.GuangdongPharmaceuticalUniversityGuangzhou510006）

【Abstract】Objective：ToestablishthequalitystandardforGuzhongbao.Methods:Camphor,MethylsalicylatecouldbeidentifiedandthecontentofMentholwasdeterminedbyGC.Result:Camphor,MethylsalicylatecouldbeidentifiedbyGC.Mentholshowedagoodlinearrelationshipintherangeof0.5mg•mL-1～0.45mg•mL-1(r=0.999),theaveragerecovery(n=6)was99.5%withRSDof1.0%.Conclusion:Themethodissimple,specificandaccurateandcanbeusedeffectivelyforthequalitycontrolofGuzhongbao.

【Keywords】GuzhongbaoGCCamphorMethylsalicylateMenthol

骨中宝为香港峨嵋药厂有限公司生产的样品。我们根据协议的要求，进行了质量标准起草工作。根据【处方】中的药味及处方量，建立了【鉴别】和【含量测定】项目；根据3批样品相对密度和折光率测定结果，制定了限度，而制定了骨中宝质量标准。骨中宝具有活血驱风，舒筋活络，强壮筋骨，颈肩酸痛，肌肉酸痛，运动损伤，风湿痛症，跌打旧伤，手足麻痹，腰腿酸痛，筋络抽缩，活血散瘀的功能。

1、仪器与试药

气相色谱仪（安捷伦6890/C10750）；SartoriusCP225S电子天平；HP-5毛细管柱（柱长为30m，内径为0.32mm,厚度为0.25μm）。

骨中宝样品（批号0939，0938，0940）由峨嵋药厂有限公司提供；樟脑对照品（批号110747-201008）、水杨酸甲酯对照品（批号110707-200710）、薄荷脑含量测定用（批号0728-200005）均由中检所提供；樟脑阴性对照（按处方比例，樟脑除外，依法制成样品，即得，广东省药品质量研究所模拟制备）、水杨酸甲酯阴性对照（按处方比例，水杨酸甲酯除外，依法制成样品，即得，广东省药品质量研究所模拟制备）、薄荷脑和薄荷素油双阴性对照样品（按处方比例，薄荷脑和薄荷素油除外，依法制成样品，即得，广东省药品质量研究所模拟制备）。无水乙醇为分析纯。

2、方法与结果

2.1樟脑及水杨酸甲酯GC定性鉴别

2.1.1供试品溶液制备取【含量测定】项下的供试品溶液，作为供试品溶液。

2.1.2樟脑对照品溶液制备取樟脑对照品，加无水乙醇制成每1mL含1.2mg的溶液。

2.1.3水杨酸甲酯对照品溶液制备取水杨酸甲酯对照品，加无水乙醇制成每1mL含1.2mg的溶液。

2.1.4樟脑阴性对照溶液制备取樟脑阴性对照0.1019g，置10mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度。

2.1.5水杨酸甲酯阴性对照溶液制备取水杨酸甲酯阴性对照0.1038g，置10mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度。

2.1.6色谱条件与系统适用性试验HP-5毛细管柱（柱长30m，内径0.32mm，膜厚度0.25μm）柱温为85℃，进样口温度180℃，检测器温度240℃。

2.1.7分别吸取“2.1”项下各溶液各1μL，注入气相色谱仪。供试品溶液色谱中有与对照品溶液保留时间一致的色谱峰；阴性对照溶液在相应位置上无干扰。结果见图1～5。

经鉴别，该法色谱分离度好，各鉴别的成分阴性对照无干扰，方法基本可行，拟将其列入标准正文。

图5水杨酸甲酯阴性对照色谱图

2.2薄荷脑GC含量测定

本品中薄荷脑和薄荷素油中均含有薄荷脑，故建立了薄荷脑的含量测定[1]（GC法），以控制两味的质量。经方法学验证试验，其加样回收率为99.5％，RSD（n=6）为1.0%；重复性RSD（n=6）为0.35%。阴性对照无干扰，该方法重现性好，操作简便，拟将其列入标准正文。具体试验方法与结果如下：

2.2.1对照品溶液的制备取薄荷脑对照品精密称定0.01477g，置10mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，揺匀,即得。

2.2.2供试品溶液的制备取本品100mg，精密称定，置10mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，揺匀,即得。

2.2.3薄荷脑和薄荷素油双阴性对照样品溶液的制备取薄荷脑和薄荷素油双阴性对照样品100mg，精密称定，置10mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，揺匀,即得。

2.2.4色谱条件与系统适应性试验HP-5毛细管柱（柱长30m，内径0.32mm，膜厚度0.25μm）柱温为85℃，进样口温度180℃，检测器温度240℃；理论板数按薄荷脑峰计算不低于10000。

2.2.5专属性

分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液与阴性对照溶液各1μl，注入气相色谱仪，测定，结果表明薄荷脑和薄荷素油阴性对照无干扰，结果见图6～8

图8薄荷脑和薄荷素油双阴性对照样品色谱图

2.2.6线性关系考查

精密称定薄荷脑对照品0.63026g，置25mL量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度。分别精密量取0.5、1、1.5、3、4.5mL，分别置25mL量瓶中，分别加无水乙醇稀释至刻度,即得。

分别取上述对照品溶液各1μL，注入气相色谱仪中，以对照品溶液浓度（mg•mL-1）为横坐标（X），峰面积为纵坐标（Y），绘制标准曲线，得回归方程为y=881.905182x-55.200255，R=0.999，结果表明在0.5mg•mL-1～4.5mg•mL-1浓度范围内呈良好的线性关系。

2.2.7重复性试验

供试品溶液的制备：取同一批骨中宝（批号0939），精密称取6份，每份100mg，按拟定的含量测定方法制备，即得。按上述色谱条件分别测定平均含量为34.4720%，RSD为0.35％（n=6），表明重复性较好。

2.2.8稳定性试验

取精密度（重复性试验）的供试品溶液，分别在0、1、2、3、8、24小时进样，以峰面积计算稳定性。供试品溶液在24小时内测定结果的RSD为0.5%，说明该方法在24小时内测定含量稳定。

2.2.9加样回收率试验

对照品母液的制备：精密称定对薄荷脑照品0.50230g，置50mL量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，即得薄荷脑对照品母液（即：每1mL含薄荷脑10.046mg的溶液）。

对照品溶液的制备:按2.1.1项下制备对照品溶液。

加样回收溶液的制备：取同一批号已知含量的供试品（批号0939，含薄荷脑为34.472%）6份，精密称定，分别精密加入对照品母液（每1mL含薄荷脑10.046mg的溶液）1mL，置10mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度。按拟定的含量测定方法测定，计算薄荷脑的回收率。结果平均回收率为99.5%（n=6），表明回收率较高。

2.2.10样品含量测定：按上述方法操作，测定3批样品，薄荷脑含量分别为0.34、0.35、0.35g/g。

3、讨论

3.1骨中宝是由松节油、桉油、樟脑，水杨酸甲酯、薄荷脑和薄荷素油六味药组成，我们曾作了松节油、桉油GC法的实验研究，由于样品中松节油、桉油的含量很低，松节油、桉油的色谱峰不易察见，故未对这两个成分进行鉴别。

3.2经试验比较不同的气相色相柱，最后选择HP-5毛细管柱（柱长30m，内径0.32mm，膜厚度0.25μm），选择柱温为85℃，使樟脑、水杨酸甲酯的鉴别和薄荷脑的含量测定条件最优化。

3.3根据处方中薄荷脑和薄荷素油的量，参照《中国药典》2010年版一部的薄荷素油限度为28.0%～40.0%，薄荷脑限度为95.0%～105.0%，暂制定本品每1g含薄荷脑、薄荷素油以薄荷脑(C10H20O)的总量计，不得少于0.10g。

3.4樟脑、水杨酸甲酯定性鉴别及薄荷脑含量测定同时完成，方法简便，各批次含量较稳定，适用于本产品的质量控制。

参考文献

[1]国家药典委员会.《中国药典》[S].2010版.部.北京：中国医药科技出版社，2010.