高效液相色谱法测定白花丹参3种炮制品中5种酚酸类成分的含量

高效液相色谱法测定白花丹参3种炮制品中5种酚酸类成分的含量

宋海东

（榆中县马坡乡卫生院甘肃兰州730115）

【摘要】目的：观察高效液相色谱法运用到评定白花丹参3类炮制品中的5类酚酸类成分的总量。方法：借助大连依利特C18（4.6mm×250mm，5μm）柱；流动相甲醇-5%的冰醋酸，梯度施以洗脱；流速是：1.0mL·min-1，监测波长是：286nm，进样总量是：20μL。结果：样本中5类酚酸类成分的加样收回率都＞98%，RSD都＜1.6%。结论：这一方式便利且迅捷，反复性较优，灵活程度较大，能够被当作白花丹参类药材中酚酸类成分总量的评定方式。评定成果指出了，3类炮制品中都未含原儿茶酸，剩下4类成分的总量都体现为生品＜酒制品＜炒炭。

【关键词】白花丹参；高效液相色谱法；酚酸类成分

【中图分类号】R284【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2018）07-0344-02

白花丹参是丹参的一类白花变型，在山东地区中是独特的药材，大多来自于山东的丘陵区域。当代医学证实了，白花丹参在对心脑血管类病症、癌症等施以治疗中具备较优的成效。同时，其运用到治疗肝硬变与慢性肝炎等，也具备较优的成效[1]。文章调研了高效液相色谱法运用到评定白花丹参3类炮制品中的5类酚酸类成分的总量，并总结结果如下。

1.相关资料与方式

1.1相关资料

1.1.1设施岛津高效液相色谱仪（型号是：LC-10ATvpPlus），SPD-10AVP型监测器；KQ600DB式超声波清洗器（生产厂商是：昆山市超声仪器有限公司）；电子分析天平（生产厂商是：上海恒平科学设备有限公司）。

1.1.2药品原儿茶酸（批号是：110809-200503）、丹参素（批号是：110855-200809）、原儿茶醛（批号是：110810-200506），来自于中国药品生物制品检定所，迷迭香酸（批号是：1231-050419），来自于中国固体制剂制造技术国家工程研究中心，丹酚酸B（批号是：SAB-E060720），来自于上海泸云医药开发有限公司；甲醇（生产厂商是：天津市彪仕奇科技发展有限公司），是一类色谱纯，冰乙酸（生产厂商是：天津市富宇精细化工有限公司），是一类分析纯，试验运用的水源是纯化水；白花丹参来自于泰山医学院中的药材种植基地，并通过了专家施以的鉴别。酒制品、生品与炒炭来自于泰山医学院中生药学教研室依据《中国药典》所公布的方式施以炮制。

1.2方式

1.2.1标准溶液的配备精准称量10.3mg的原儿茶酸、11.7mg的丹参素、14.95mg的迷迭香酸、16.2mg的原儿茶醛，借助纯化水配备为10mL的储藏液。精准称量如上样本适宜的储藏液，放进10mL的量瓶，加进精准称量的13.52mg的丹酚酸B对照品，借助纯化水施以定容到10mL，配备为混合对照品贮备液，浓度是234、216、52.8、149.50、1352mg·L-1，封闭放到4℃的温度之下施以避光储藏。

1.2.2样本溶液的配备精准称量2.0g的炮制品粉末，加进20mL的蒸馏水，处于60℃的恒定温度之下，施以1h的振荡后，处于100℃的温度之下煮沸30min。借助4000r·min-1的速率施以5min的离心，搜集上清液。把药渣加进20mL的蒸馏水，煮沸30min，施以离心后，搜集上清液，混合两次的上清液，施以定容到50mL。

2.结果

把配备的样本溶液，酒制品施以3倍的稀释，生品施以3倍的稀释，炒碳施以10倍的稀释，处于一致的评定条件之下，评定白花丹参炮制品的原儿茶酸、丹酚酸B、中丹参素、迷迭香酸、原儿茶醛5类成分的总量，样本中各类分析物的评定成果如表1。

表1白花丹参样本中4类成分的评定[%（n）]

3.讨论

此次试验研究中，所构建的同等评定白花丹参中的原儿茶醛、丹参素、丹酚酸B、迷迭香酸总量的高效液相色谱法，其施以监测的灵活程度较大，方式便捷、精准，能够被当作白花丹参类药材中的水溶性成分总量的评定方式[2]。评定成果指出了，3类炮制品中都没有监测到原儿茶酸，剩下4类成分的总量都体现为生品＜酒制品＜炒炭，给药品制剂与临床方面的运用予以了理论凭据。

此次试验研究中，对于评定原儿茶酸、丹参素、迷迭香酸、原儿茶醛与丹酚酸B的流动相梯度施以了选取，在6～10min期间，流动相（B）的甲醇变换到40%后，迷迭香酸与丹酚酸B无法分开，在6～10min期间，流动相（B）的甲醇变换到35%后，迷迭香酸与丹酚酸可以施行基线分开，所以，最终明确的梯度是0～6min，30%的B，在6～10min期间，B的线性变换到35%，在10～30min期间，B的线性变换到40%[3]。

有相关的调研指出了，原儿茶醛与丹参素的最长吸收波长是281nm，迷迭香酸的最长吸收波长是330nm，原儿茶酸的最长吸收波长是260nm，丹酚酸B的最长吸收波长是286nm[4]。所以，5类化合物的吸收光谱与最长吸收波长具备较大的差异，5类化合物处于286nm的位置信号较优，且基线平稳，所以，将286nm当作了监测波长。

总之，高效液相色谱法便利且迅捷，反复性较优，灵活程度较大，能够被当作白花丹参类药材中酚酸类成分总量的评定方式。

【参考文献】

[1]张琳琳,王淳,宋志前.等.HPLC同时测定白花丹参中丹参酮ⅡA、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和二氢丹参酮Ⅰ的含量[J].中国实验方剂学杂志,2015,21(6):62-65.

[2]秦增贵,柳克浩,高长青.等.一测多评法测定白花丹参中丹参酮ⅡA、隐丹参酮和丹参酮Ⅰ的含量[J].药学研究，2016,35(8):457-459.

[3]陶如,冯蕾,赵法兴.等.白花丹参毛状根诱导体系的建立与其内生真菌提高毛状根中丹酚酸含量的研究[J].时珍国医国药,2015,26(6):1469-1473.

[4]蔺伟,刘金钊,杜金瑞.白花丹参熏洗与玻璃酸钠关节腔内注射治疗膝关节骨性关节炎对比研究[J].中国继续医学教育,2015,7(4):263-264.