补肾安神片中2，3，5，4，-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定

补肾安神片中2，3，5，4，-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定

谢晓燕

谢晓燕（长春中医药大学吉林长春130117）

【中图分类号】R969【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）47-0203-02

【摘要】目的建立补肾安神片的质量标准。方法采用高效液相色谱法测定何首乌中2，3，5，4，-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量。结果2，3，5，4，-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷在0.2224～1.1120μg之间线性关系良好，R＝0.9998。平均回收率为98.23%，RSD=1.26%（n=5）。结论该方法简单快速，灵敏准确，重复性好。

【关键词】补肾安神片高效液相色谱2，3，5，4，-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷

补肾安神片由制何首乌、女贞子、远志等十四味药组成，具有补肝益肾，养血安神的作用。用于肝肾不足所致的头痛眩晕，心悸不宁，失眠多梦，健忘。本实验采用高效液相色谱法对何首乌中2，3，5，4，-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量进行了测定，为提高制剂质量标准奠定了基础。

1仪器与试药

仪器：LC-10Atvp型高效液相色谱仪（日本岛津），SPD-10Avp紫外检测器，7725i手动进样器。UV-3000型紫外分光光度仪（日本岛津）。

试药：2，3，5，4，-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品由中国药品生物制品检定所提供（批号0944-2000013）；乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1色谱条件色谱柱选择Shim-PackVP-ODS柱；乙腈-水（14.5：45.5）为流动相；检测波长320nm；流速0.6mL/min；柱温30℃。

2.2对照品溶液的制备称取2，3，5，4，-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品约10mg，精密称定，置100mL棕色量瓶中，加稀乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取5mL，置10mL棕色量瓶中，用稀乙醇稀释至刻度，摇匀，即得。

2.3供试品溶液的制备取本品20片，除去包衣，研细，取约0.4g，精密称定，置烧瓶中，精密加入稀乙醇25mL，称定重量，水浴上加热回流30分钟，取下，放冷，称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4线性关系考察分别精密吸取对照品溶液4、8、12、16、20μl注入液相色谱仪，测定峰面积，以进样量为横坐标，峰面积积分值为纵坐标绘制标准曲线，得回归方程Y=3319497.527X+28542.67499，r＝0.9998，结果表明对照品在0.2224～1.1120μg范围内，呈良好线性关系。

2.5稳定性试验精密吸取同一供试品溶液，每隔一定时间进样10μl,依法测定，RSD为1.48%（n=5）。

2.6精密度试验精密吸取2，3，5，4，-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品溶液10μl，分别进样5次，依法测定，记录峰面积积分值，计算，考察精密度，RSD分别为0.86%（n=5）。

2.7重复性试验精密称取同一批样品，共5份，依法独立测定，RSD为1.17%。

2.8回收率试验精密称取同法测定的已知含量样品，精密加入2，3，5，4，-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷对照品适量，依法测定，平均回收率为98.23%，RSD为1.26%（n=5）。

2.9样品测定取三批样品，依法制备供试品溶液，每批二份，分别精密吸取对照品溶液及供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定峰面积，计算十批样品中2，3，5，4，-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量，结果见表1。

表1三批样品的含量测定结果

样品批号含量(mg/片)平均含量（mg/片）

1108010.90490.80720.8561

1108020.88050.87760.8791

1108030.97120.95160.9614

3讨论

含量测定曾参考文献[1-2]及经过反复试验选择用乙腈-水（14.5：45.5）为流动相，流速为0.6mL/min。在室温条件下样品中2，3，5，4，-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷峰与其相邻峰分不开，经考察柱温影响分离度，将柱温升到30℃，再以同样的流动相可使其完全分离，R>1.5，故柱温选择30℃。

参考文献

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典：一部[S]北京化工出版社，2010，164.

[2]武剑峰，姜晓冬，滕义生，等.高效液相色谱法测定降脂宁颗粒中2，3，5，4，-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定.中国药事，2006，20（11）：693～694.