关于水质环境监测中微生物检测的质量控制探究

关于水质环境监测中微生物检测的质量控制探究

刘建华

（禄丰县疾病预防控制中心）

【摘要】水质环境监测，对于保护水资源，预防水污染及制定水环境指标有极大影响。水质监测质量好坏与否直接关系着监测数据的科学准确性，是监测阶段要重视的。这篇文章通过对水质监测微生物样本收集、实验室检测装置、结果评价等环节对水质环境监测中微生物检测的质量控制展开了探讨，从而为后期监测工作提供参考条件。

【关键词】水质监测；微生物检测；质量控制

[中图分类号]R2[文献标号]A[文章编号]2095-7165（2018）21-0467-01

前言

在水质监测阶段，在实验室中对水中微生物取样分析，要做好准备工作，如试验指标，已知加入量、参比物等，因条件有限，往往难以获取这些数据，就只能通过个人经验来判断。一个系统健全的质量保证程序，对实验过程中任何一种对结果会产生影响的数据，都要能加以控制，这些因素一般有采样技术、实验器材与工具、材料性能、培养基、试验内容和流程等。接下来我们就对水质检测过程中对微生物检测的质量控制加以论述。

1水质监测微生物样品采集

1.1无菌采样玻璃容器

在实验室内要有符合要求的无菌采样玻璃器皿，由于水体会受到外界很多因素的影响，而产生质的变化，所以一定要有科学全面的采样方案。采样对象一定要具备典型性，采样阶段要严格选择取水点，确保在同一时间段，取水量满足容器的80%，确保检验过程中能混匀；采样要用普通容器直接采集，严禁用特定的无菌采样瓶，还要防止手指与其他物品对瓶口的误触；采样期间不能晃动底部沉淀物；对管网水进行样品提取时，有必要提前对水龙头消毒，就是利用火焰，灼烧3秒，高温消毒。农村地区对蓄水池进行水样提取，首先要清洁水桶，静置在水池内片刻，不考虑表层水，进而将水盛入无菌瓶中，要避免手对瓶口的误触。

1.2妥善保存水样，抑制微生物的繁殖

利用低温环境来存储，提取全部水样后及时送达实验室内；在运输阶段，要避免玻璃容器受损，要有相应的固定措施，避免样品撒漏。

2实验室检测系统

2.1对实验设施的管理控制

①对温度计或其他测试温度的仪器，确保半年检查校对一次，确保实验室内的培养箱、冰箱、冷冻箱及干燥箱能为试验提供精准的温度环境。②天平要按照操作要求使用，加强监管检查。③对于PH测量仪器，要运用超过两种的标准缓冲液来校准。④一般使用离子水或蒸馏水进行试验，不能用渗透水。⑤电热灭菌箱要利用孢子试条，每隔三个月来检测其性能，确保稳定保持在160℃~180℃范围内，已进行灭菌的容器要有标记。⑥高压灭菌器一般运用孢子试条或孢予悬浮液，检测其灭菌性能，做好对温度、气压和灭菌时间的记录。⑦膜滤设备，要提前检查，将各部件统一组装，确保无渗漏，可以的话再利用硅酮，从而实现过滤排放的作用。要注意的是彻底清洗不可少。⑧紫外灯要保持每月一次的频率进行擦拭，对其光度测量则是每三月一次，保证实验过程中紫外灯的光照能满足最初光照的70%以上。⑨培养箱对其温度的控制，要保持2次/天的频率，培养箱对房间的温度要求在16℃~27℃为宜。⑩试验要用的玻璃容器必须要完好无渗漏，彻底清洗，仔细检查，若是洗后还要很多水珠，一定要重洗。使用的洗涤剂，要确保其中元素不会对生物造成其他影响。严格要求的话，就要用溴麝香草酚兰试剂对其进行PH测试。

2.2实验室环境的把握

①实验室通常要满足通风要求，还要防止灰尘的侵袭，温度的变化等，集中式空调较为适宜，如此就能避免杂菌的侵入，还能维持培养箱的有序运行和避免培养基、分析天平的受潮情况。②设计实验室。通常要尽量保持实验室内安静无嘈杂影响，要满足工作过程中将访客的干扰降低到最小的要求，要有系统化的区域供配置培养基和无菌操作室。③实验室墙壁，要使用便于清洗和消毒的材质，地面材质，要抗腐蚀、光滑、便于清洁，工作台材质要避免透水，有抗腐蚀性。④要严格控制室内空气标准，要足够清洁。一般利用RODAC平皿、细菌密度平皿来对空气和台面进行试验检测。

3.水质微生物样品检测质量控制

完成微生物水质取样后，及时拿到水质检测室，要确保试验用具都是完全灭菌的状态，要全面彻底的清洁后再进行灭菌操作。培养基和稀释液要按照要求采取高压蒸汽灭菌操作。

3.1检测菌落数量

首先对水样进行摇匀操作，使得细菌能够与水充分接触，对水样进行稀释，要顺着管壁缓缓倒入，要避免触碰管壁液，防止其他检液误入，把水样滴入器皿内，注意要从侧端注入，皿盖保持不动，只需将吸管保持直立即可，另外在皿底处，擦拭吸管尖导出余液，尽量不要吹出。为了避免出现片状菌落，将水样注入平皿，要确保在20分钟内再加入营养琼脂培养基，及时混匀，待琼脂凝固后，及时的翻转平皿，防止菌落蔓延生长。

3.2检测大肠杆菌的质量控制

在接种之后，对试管进行摇匀，让水样与乳糖发酵管能够充分混合；乳糖发酵时，一般会出现产气量少或产酸不产气的现象出现，或者倒管中无气体存在，然而管壁出现了小气泡，这些都是正常现象，可以进行下一环节的论证分析了。初发酵阳性就要进行深入的染色和继续观察。选择菌落数直接关系着大肠菌群的检出率，选择的菌落务必要有典型性特征，或者多选择几种避免出现假阴性。

4.结果评价系统的质量控制

4.1对操作方法的控制

①对特种型式的水样对象中，对其中15个阳性水样，进行双样分析。②核对各数据的对数，若是双样结果中出现有一个为零，就要加1再计算其对数。③分析各双数的差城，再得出其平均值。④对例行水样中的10%进行双样研究，若是差值超过3.27R，则说明其精密度不准，就要再回溯到上一环节，分析原因，再重新试验分析，直到准确为止。

4.2无菌性检测

①在试验前，一定要将灭菌水作为水样进行分析，要彻底检查培养基、滤膜各种试验容器的无菌性，若是有杂菌出现，那么这次试验数据与结果就作废。②试验过程中要对不少于一个的水样进行重复分析，规定是要对10%的水样进行重复分析。③要对不少于一个的阳性水样进行平行分析。

5.总结

这些年我国在水质环境监测方面有了突破性进展，常规监测不断完善，水质自动监测在循序渐进的发展。通常我国水环境监测有三种：应急监测、常规监测、自动监测，不管是哪种监测，水中微生物的检测都是其检测的重要环节，所以对其检测质量控制的分析有着积极的战略意义。

参考文献：