滤膜法和多管发酵法在生活饮用水微生物检验中的应用对比

滤膜法和多管发酵法在生活饮用水微生物检验中的应用对比

陈亚军

乐至县疾病预防控制中心四川资阳641500

【摘要】目的：生活饮用水微生物检验方法及评价标准研究。方法：以50例生活饮用水为研究对象，按《生活饮用水标准检验方法》GB/T5750-2006分别采用多管发酵法和滤膜法进行微生物总大肠菌群的检测。结果：多管发酵法50例水样中40例合格，10例不合格；滤膜法50例水样中35例合格，15例不合格。多管发酵法合格率高于滤膜法，差异具有统计学意义（P<0.05）。结论：多管发酵法、滤膜法检验饮用水中的总大肠菌群均有效，多管发酵方法更加精准，优于滤膜法，值得进一步推广与应用。

【关键词】生活饮用水；微生物检验方法；评价标准

现如今，生态环境污染严重，给人们饮水健康、安全带来极大的威胁，成为社会广泛关注的焦点问题。于是，有关部门对生活饮用水经过滤、沉淀、消毒从而降低微生物危害。但是，饮用水污染现象仍然存在。对此，文章以50例生活饮用水为研究对象，分析饮用水微生物检验方法与评价标准。

1资料与方法

1.1一般资料：

以50例生活饮用水为研究对象，根据《生活饮用水标准检验方法》GB/T5750-2006分别采用多管发酵法和滤膜法进行微生物总大肠菌群的检测。

1.2方法

两种方法均为同一个人操作。主要检测饮用水总大肠菌群，这种菌为革兰氏阴性菌，属于无芽孢杆菌，在37℃下培养24h可出现产酸产气、发酵乳糖，具有厌氧和需氧特点。本实验器材有高压灭菌器、培养箱、平皿、试管、小倒管、抽滤设备、无齿镊子、显微镜、天平、分度吸管、冰箱、锥形瓶等。多管发酵法实验步骤：将10ml、1ml水样放在10ml的双料乳糖蛋白胨培养液与10ml单料乳糖蛋白胨培养液内。同时，1ml样品放在9ml无菌生理盐水并混合，选择1ml放在单料乳糖蛋白胨培养液中，将每一种稀释度进行5管接种。水样污染严重时需加大稀释度，选择适宜3个稀释度接种水样，每稀释度选择5管接种，共15管。接种后放在37℃环境下培养24h，产酸产气的接种管转种至伊红美蓝琼脂板并放在培养箱内。观察菌落，把紫黑色合并金属光泽与淡紫红色且中心颜色较深的菌落革兰氏染色，显微镜检验观察。若染色镜染色确定为革兰氏阴性无芽孢杆菌，则可对其进行单料乳糖蛋白胨培养，放在恒温箱内37℃，24h，产酸产气的接种管为大肠菌落群阳性。

滤膜法实验步骤：水样使用0.45微米的微孔滤膜过滤，检验总大肠菌群。火焰灭菌，灭菌时间约25min。烧杯内放置滤膜，在烧杯中添加蒸馏水，水煮沸3次灭菌，一次为20min。夹取灭菌滤膜后滤膜粗糙面向上放在无菌滤床，抽滤100ml水样。水样过滤完后再抽气5s，将滤器阀门关闭。将滤膜夹至品红亚硫酸钠培养基上，滤膜截留的细菌向上方，平皿倒置，放在恒温箱内37℃，24h。

1.3评价指标

比较两种方法检测的水样检测结果。

1.4数据处理

通过SPSS13.5统计学软件显示，计数资料用百分比表示（%），两种方法对比使用x2检验，计量资料通过（x±s），组间对比使用t检验，P<0.05为统计学意义。

2结果

比较两种方法合格率，多管发酵法合格率为80%，滤膜法合格率为70%，多管发酵法优于滤膜法，差异具有统计学意义（P<0.01），详见表一。

表一，比较两组水样检测检出率（n，%）

3讨论

生活饮用水不仅供日常饮用，也需供日常生活使用。因此，生活饮用水是人们在一生中都需使用的水[1]。在确定有毒物质限值时必须基于饮用者终生用水安全来考虑健康防护，也就是说，饮用者终生使用饮用水，不会带来明显的健康危害。伴随着人们生活水平的提高，对身体健康越来越重视。饮用水作为人们生存发展重要物质，水的健康安全关系着人们身体健康，一旦饮用被污染的水就会增加各种疾病发生几率[2]。对此，各部门加大对饮用水检验，通过多管发酵与滤膜法进行饮用水生物检验。在职责范围中重视水质净化消毒和饮用水安全推广，特别是对饮用水进行沉淀、过滤、消毒，降低微生物含量。微生物检测作为水质生物性污染主要指标，选择的水样均根据标准要求[3]。

水体是微生物生长和滋生的天然良好培养基，特别是污染的水体中存在大量的有机物质，更适合于各种微生物的生长。水体中的微生物主要来源于土壤以及人类和动物的排泄物及污染；其中的致病性微生物往往是从外界环境污染而来，特别是人和其他温血动物的粪便污染。

本研究中，没有其他人为因素和器材因素影响，设备全部经过检定合格且在周期内。多管发酵法合格率为80%，滤膜法为70%，多管发酵法优于滤膜法，差异具有统计学意义（P<0.05）。在检测准确性上也优于滤膜法，差异具有统计学意义（P<0.05）[4]。由此可见，生活饮用水微生物检验建议采用多管发酵法。因为生活饮用水关系着人们身体健康，需要疾控中心给予高度关注，重视对饮用水的检验并制定可行性方法确保饮用水安全、健康，为人们身体健康保驾护航。

结语

综合分析，多管发酵方法与滤膜法生物检验中，多管发酵方法在检验方法与准确性方面优于滤膜法，建议选择多管发酵方法进行生物检验，效果显著，值得进一步推广应用。

参考文献：

[1]肖彬彬.浅谈生活饮用水微生物检测的影响因素[J].化工管理，2018（32）.

[2]刘成风，钟敏，陈茜茜.石河子团场生活饮用水微生物检测结果分析[J].中国卫生检验杂志，2018（21）.

[3]张瑞华，纪桂霞，楚文海.微生物对饮用水典型消毒副产物前体物的降解效能及其群落特征[J/OL].环境科学研究：1-11[2019-01-29]..

[4]程贺.生活饮用水微生物检验方法及评价标准探讨[J].食品安全导刊，2018（30）.