ELISA法及胶体金法检测HCV抗体的应用分析

ELISA法及胶体金法检测HCV抗体的应用分析

樊少勇

樊少勇（广西玉林市第一人民医院检验科537000）

【摘要】目的探讨和研究酶联免疫吸附试验（ELISA法）检测HCV的特异性。方法采用ELISA法进行344例传染病筛查患者血清的检测，同时采用胶体金法对同组患者进行测定作为对比。结果ELISA法检测出抗HCV阳性率为4.07%（14/344），胶体金法检测出阳性率为2.62%（9/344）。结论ELISA法检测抗HCV的阳性率明显高于胶体金检测法，但其特异性及敏感性在本次试验中并未能完全体现，仍需观察取证。

【关键词】丙型肝炎酶联免疫吸附试验胶体金吸附试验

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）01-0156-01

丙型肝炎病毒（HCV）是导致慢性肝病的主要病原之一，由于在感染HCV之后病情多转入慢性，绝大多数的患者都会演变成慢性感染，最终引发肝硬化、肝癌等终末期疾病，目前临床上对于此类疾病的预防和治疗上尚没有特效药物，所以在对于此类疾病的筛查和早期诊断上就显得尤为重要[1～2]。胶体金法是临床上应用较早的一种非检测技术，目前已经广泛应用于临床的各个领域，虽然它具有方便、快捷、设备需求度低的优势，但是在准确度上仍存在一定的劣势，而酶联免疫吸附试验（ELISA法）则具有较好的评价。笔者就此两种方法对HCV游离抗原的检测效果进行了对比试验，现报道如下。

1临床资料与方法

1.1临床资料选择我院自2009年1月至2012年1月之间门诊及住院患者进行传染病筛查的344例作为研究对象，其中男性患者196例，女性患者148例，年龄在19～74岁之间，平均年龄49.1±12.4岁。

1.2仪器与方法实验仪器及试剂包括：酶标仪（美国产ELX800NB型酶标仪）、洗板机（芬兰产Wellwash4mk2型）、低温离心机、抗HCVELISA试剂（北京万泰生物制药有限公司提供）、抗HCV金标试纸条（厦门英科新创生物科技制药有限公司提供），确保以上所有一起运转正常，试剂均在保质期内使用。方法：所有受检者均在清晨空腹抽取静脉血4～6ml，用离心机进行血清分离之后分为两份，分别用ELISA法及胶体金法对标本进行检测，ELISA法比色采用双波长450nm/630nm，参考波长为630nm，s/co值≥1者视为阳性；胶体金法观察试纸条是否在检测线和对照线各出现紫红色线条，仅对照线条出现者为阴性，两者皆有则为阳性，未出现线条视为实验失败。整个实验过程严格按照说明书进行。

1.3统计学分析所有数据均采用统计学处理软件SPSS15.0进行统计学处理，组间对比采用t进行检验，方差值P＜0.05视为具有统计学意义。

2结果

ELISA法检测出抗HCV阳性率为4.07%（14/344），胶体金法检测出阳性率为2.62%（9/344）。

3讨论

目前临床上已经将HCV抗体检测作为输血、手术以及腔镜检查前的必做项目，这更好的防止了HCV的传播。胶体金法检测HCV具有特异性强、灵敏度高、方便、快捷且无需实验仪器的特点，在临床上被广泛应用。但是胶体金法作为HCV快检的方法仍存在有假阴性的可能，分析主要原因有人为因素及环境因素等，检测结果往往受到检测时间长短、反应是否充分、气温改变等因素的影响。此外，标本血量不足或过量、过滤膜破裂、血液渗出导致检测线模糊或不易观察产生主观判断失误等都是影响实验结果的原因。从本文数据中我们可以看出，ELISA法检测HCV抗体明显更由于胶体金法，从实验严密程度上而言ELISA也更胜一筹，但是由于实验过程较为复杂，而且对于实验仪器要求较高，故在基层医院的开展十分首先。所以建议胶体金法仅作为初筛之用，复检可用ELISA法进行对照，防止HCV的漏检和传染的发生，尤其是对于需要进行腔镜检查的患者更是应当做到防止疏漏[3]。在工作中检验人员应当规范操作步骤，避免主观因素造成错误检测结果，对于相关知识应当熟练掌握，避免出现对于仅一条阳性线而无阴性线（强阳性）判断为阴性结果等误判事件[4]。

综上所述，ELISA法检测抗HCV的阳性率明显高于胶体金检测法，但是由于其实验过程较为繁琐且实验时间较长，并不如胶体金法方便、快捷，故在临床应用方面比较受限。而胶体金法能够快速的对标本做出检测，但是由于其存在假阴性的概率较大，建议对疑似病例采用ELISA进行复检，防止造成传播。两者作为筛查HCV抗体的重要手段，对于此类疾病的早期发现和预防有着重要意义，恰当的使用能够更好的维护患者的健康。

参考文献

[1]陈坤,张贺秋,宋晓国,等.金表渗透法快速检测血清中丙型肝炎病毒抗体[J].现代检验医学杂志,2008,17(2):1.

[2]KimberlyB,,HerbertH,GrazynaL,etal.CirculatingDdimerlevelsarebetterpredicatorsofoverallsurvivalanddiseaseprogressionthancarcinoembryonicantigenlevelsinpatientswithmetastaticcolorectalcarcinoma[J].Cancer.2004,63(4):636～640.

[3]皮国华,何红英.胶体金免疫吸附试验检测丙型肝炎病毒抗体[J].中华试验和临床病毒杂志,2005,9(4):373.

[4]SadaE,BrennanPJ,HerreraT,etal.Evaluationoflipoarabinoman-nanforserologicaldiagnosisoftuberculosis[J].JClinMicrobiol.2000,28(12):2587～2590.