不同浓度葛根煎剂对离体蟾蜍心脏功能的影响

不同浓度葛根煎剂对离体蟾蜍心脏功能的影响

刘芸1谭悦2王玉玲3王芳1李玲玲4张俊清(通讯作者

刘芸1谭悦2王玉玲3王芳1李玲玲4张俊清(通讯作者)1

（1川北医学院医学影像学系四川南充637007;2川北医学院护理学系四川南充637000

(3川北医学院中西医临床医学系四川南充637007;4川北医学院临床医学系四川南充637007）

【摘要】目的观察不同浓度葛根煎剂对离体蟾蜍心脏心率和心肌收缩力的影响。方法采用改进的斯氏蛙心插管法，在保持总剂量为1．0ml的情况下，分别以不同浓度葛根煎剂对离体蛙心脏进行灌流，经BL-410生物机能实验系统记录心肌的收缩活动。结果灌流低浓度葛根煎剂（0.2ml、0.4ml）时心率和心肌收缩力下降，但不具有统计学意义（P>0.05）。而高浓度葛根煎剂（0.6ml、0.8ml、1.0ml）使心肌收缩迅速受到抑制，心率和心肌收缩力下降影响明显，具有统计学意义（P<0.05）。一定浓度范围内，浓度越大抑制越强烈，具有剂量依赖性，但超过一定浓度，剂量依赖性明显下降甚至消失。结论一定剂量范围内葛根煎剂对心脏有降低心率和心肌收缩力作用，但超过一定浓度并未加强作用。

【关键词】葛根煎剂心率心肌收缩力

葛根，性凉、味甘辛,传统用于发散风热类药物,现是用于心脑血管病的主要药物之一。现代药理学研究证实,葛根素（普乐林Puerarin，Pue）是豆科植物野葛的干燥根中的提取物，其主要成分为8-beta-D-葡萄吡喃糖-4',7-二羟基异黄酮，具有明显的心血管药理作用[1-3]，临床应用非常广泛。本实验以两栖类动物蟾蜍为实验对象，用不同浓度的葛根煎剂对离体蟾蜍心脏进行灌流，探讨葛根煎剂对心率和心肌收缩力的影响。希望通过本实验的进行能对葛根煎剂的作用作进一步补充，同时对于临床疾病的治疗提供一定的实验依据。

1材料和方法

1.1动物30只蟾蜍雌雄兼备，体重90～130g，精神良好，川北医学院动物实验中心提供。

1.2药品葛根，购与南充药业集团中药材公司，任氏液:现配现用。

1.3实验仪器BL-410生物机能实验系统(成都泰盟有限公司产品），机械—电换能器，移液枪，蛙类手术器械。

1.4方法

1.4.1实验分组

30只蟾蜍随机分成1、2、3、4、5组，每组6只。

1.4.2葛根煎剂溶液的配制

取葛根90g，准确称取，加水量410mL，用冷水浸泡30min，用煎药机煎煮,待煎药机温度达到110℃时,保持温度在(110±5)℃,继续煎煮30min后榨渣取汁，待冷却置常温待用。

1.4.3离体蛙心的制备

取蟾蜍一只，捣毁脑、脊髓于木板上固定，暴露心脏。左主动脉下方穿一线，于动脉圆锥处结扎，再从左右两主动脉下方穿一线，并打活结备用。眼科剪在结扎线下方、沿向心方向将动脉上壁剪一斜口。选择大小适宜的蛙心插管，然后将盛有少量任氏液的蛙心插管，从开口处插入到达动脉圆锥，经主动脉瓣插入心室腔内，可见血液冲入插管，液面随心脏搏动而上下移动，用滴管吸去套管中的血液，更换新鲜任氏液。结扎固定。于静脉窦下方剪断有牵连的组织使心脏离体(切勿损伤静脉窦)，仅保留静脉窦与心脏的联系。用任氏液反复冲洗心室内余血，使插管内灌流液不再有残留血液。保持套管内液面高度一致(2cm)，即可进行实验[4]。

1.4.4心肌收缩活动的记录

将插好离体心脏的套管固定在支架上，用蛙心夹夹住心肌尖部肌肉。再将蛙心夹上的系线绕过心动杠杆与张力换能器相连，然后将张力换能器接入BL-410生物机能实验系统，通过BL-410生物机能实验系统处理，在显示器上显示蛙心心肌收缩活动的变化。各组均记录1.0ml任氏液时的正常曲线作对照，加药前先用移液枪吸取相应任氏液再相应加入同剂量的葛根煎剂溶液，使液面保持1.0ml，以保持加药前后心肌的负荷一致，通过BL一410系统记录加药后稳定的心搏曲线[5]。

1.4.5统计方法

数据是以平均数±标准差(X±s)表示，采用t检验，P<0.05，整个统计资料采用SPSS软件处理完成。

2结果

2.1不同浓度葛根煎剂对离体蛙心心率的影响

由表1可知，0.2ml和0.4mlPue浓度组分别与正常组相比，心率下降,但不具有统计学意义（P>0.05）。0.6mlPue浓度组与正常组相比,心率下降明显具有统计学意义（P<0.05）。0.8ml,1.0mlPUE组浓度与正常组相比,心率下降明显具有统计学意义（P<0.01）。

2.2不同浓度葛根煎剂对离体蟾蜍心脏心肌收缩力的影响

由表1可知，0.2ml和0.4mlPue浓度组分别与正常组相比，心肌收缩力下降，但不具有统计学意义（P>0.05）。0.6mlPue浓度组与正常组相比，心肌收缩力下降低明显具有统计学意义（P<0.05）。0.8ml、1.0ml浓度组与正常组相比，收缩力下降明显具有统计学意义（P<0.01）。

表1不同浓度葛根煎剂对离体蟾蜍心率和心肌收缩力的影响（n=6，X±s）

ΔP>0.05comparedwithcontrolgroup；*P<0.05comparedwithcontrolgroup；**P<0.01comparedwithcontrolgroup；

3讨论

以任氏液灌流蛙心，心搏幅度曲线处于正常的稳定水平。以此为对照组的基础之上实验结果表明，当灌流液中葛根煎剂浓度由低升高时，心率和心肌收缩力下降幅度由小变大，呈现出剂量—效应依赖性变化趋势。已有研究证明,葛根能扩张冠脉血管,增加冠脉血流量;葛根总黄酮能降低心肌耗氧量;葛根有广泛的受体阻滞作用[6],本实验与此结果相似，呈现出葛根煎剂能降低离体蛙心心率和心肌收缩力的现象，这可能是葛根煎剂能降低血压的原因之一。而不同浓度葛根煎剂对心肌的保护机制，可能是由于Pue：一则其本身对心室肌细胞Ca2+通道有阻断作用，可使心肌细胞内的Ca2+浓度减低；二则通过其β受体阻断作用进而阻断β－受体的细胞内信号转导通路或者磷酸化过程，减少外钙内流和内钙释放，确切机制还有待进一步探讨［7］。

实验组（1、2、3、4、5组）换洗过程中，因葛根煎剂浓度被稀释，可见心率和收缩力基本能完全恢复，这虽说明高浓度葛根煎剂不会导致心肌细胞损伤，但浓度增加到一定程度对心肌的抑制作用并无加强，故临床上应用该类制剂时，应注意其对心脏收缩力和心率的浓度—效应的变化规律，在控制疾病的前提下，尽量减少用药剂量，减轻病人身体负担。至于葛根煎剂对心肌收缩力和心率的具体作用机制涉及到细胞及分子生物学等更微观的领域。目前，关于葛根煎剂在这方面的报道还很少，还有待进一步研究。

参考文献

[1]潘洪平,杨嘉珍,李吕力,等.葛根素注射液对血瘀证大白鼠血液高粘滞性的作用研究[J].中成药,2004,26(8):651-653.

[2]赵新芳,边文贵,张俊卿.葛根素治疗心血管疾病的药理和临床研究[J].陕西中医,2006,27(8):1018-1020.

[3]刘再宇.葛根素注射液治疗心绞痛25例临床观察[J].疑难病杂志,2005,4(1):28.

[4]张俊清,丁雪峰,李旭伟,等.不同浓度辣椒碱对离体蟾蜍心脏功能影响的研究[J].中外健康文摘.2011,08（36）：19-20.