强力止咳宁胶囊中忍冬叶提取工艺的研究

强力止咳宁胶囊中忍冬叶提取工艺的研究

王辉1韩锁柱2李莉娜3

1.哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心150000；

2.哈尔滨市中医医院150000；3.哈尔滨市红十字中心医院150000

摘要：目的：选择强力镇咳宁胶囊中忍冬叶提取的最优工艺。方法：运用正交试验，考察三因素为煎煮时间、加水量、提取次数，评价标准为绿原酸含量，挑选出提取方案符合批量生产，工艺参数最优。结果：忍冬叶提取的最优工艺为A2B2C3，即共提取2次，每次加水量为11倍，2次煎煮时间均为1h。结论：提取次数、提取时间、加水量对金银忍冬叶的提取有显著性影响，其影响程度为提取次数>加水量>提取时间，此工艺合理可靠，可应用于批量生产。

关键词：强力止咳宁胶囊；提取工艺；绿原酸；正交实验

强力止咳宁胶囊由忍冬叶、满山红等中药材制成的胶囊剂型，功效为解毒、镇咳、祛痰、平喘等功效。用于伤风肺热咳嗽，支气管炎。忍冬叶应用于祛毒散风、祛风镇痛。现代研究显示，忍冬叶具有消炎镇痛、抗病毒、提高自身免疫、对抗氧化等功效[1-4]。

1仪器与药品

SYG-2双排数显恒温水浴锅（浙江力辰科技），RE-5220旋转蒸发仪（上海亚荣生化仪器厂），ML204型分析天平（METTLERTOLEDO），UV5bio紫外分光光度计（METTLERTOLEDO），LC-10ATVP高效液相色谱仪（日本岛津），JK-DUC-600VDE数控双频超声波清洗器（上海精科），绿原酸标准品（110753，中国药品生物制品检定所），忍冬叶（20140209，世一堂制药集团），其余试剂均为分析纯。

2方法与结果

2.1绿原酸含量测定

色谱条件色谱柱：WelchromC18（4.6mm×250mm，5μm）；流动相：乙腈：0.5%磷酸溶液（15：85）；流速：1ml/min；检测波长：327nm；柱温：28℃。

配制对照品溶液取50ml量瓶，精确称取绿原酸标准品6.10mg，倒入量瓶中，再倒入55%甲醇溶液，25分钟超声处理后，冷却，定容，制成对照品溶液（浓度为0.122mg/ml）。

配制供试品溶液取忍冬叶拣选过筛除尘后，挑出非药用部分异物和霉变部分，粉碎后过四号筛，称定忍冬叶粉末20g，加水量为8倍，煎煮2h，滤过提取液，将滤液在一定条件下浓缩，再进行干燥得忍冬叶粗品。取50ml容量瓶，精确称量忍冬叶粗品10.20mg加入其中，继续将55%甲醇溶液加入其中，经过25分钟超声处理后，冷却，定容，得到供试品浓溶液，浓度为0.204mg/ml。取50ml量瓶，精确移取10ml供试品浓溶液加入其中，再将55%甲醇加入其中，定容，得到供试品稀溶液，浓度为0.0408mg/ml。

线性关系将绿原酸对照品溶液（浓度为0.122mg/ml）精确移取2μl，4μl，6μl，8μl，10μl进样。Y表示峰面积，X表示绿原酸量，回归方程为：Y=2920.902X-209.2（R=0.9997，n=5），绿原酸进样量在0.244ug~1.220ug之间呈高度线性关系。

2.1.1重复性试验

取5个50ml量瓶备用，同一批样品称取5份，每份约5.0mg，精确称量后倒入其中，再将55%甲醇加入其中，25分钟超声处理后，冷却，定容，在上述色谱条件下测定，每次进样10μl，RSD=0.89%（n=5）。

2.1.2精密度试验

选择同一供试品溶液，精确吸取，在上述色谱条件下测定，10μl重复进样5次，绿原酸峰面积分值RSD=1.08%（n=5）。

2.1.3加样回收率试验

取6个100ml量瓶备用，已知绿原酸含量的样品称取6份，每份约10.0mg，精确称量后倒入量瓶中，再将55%甲醇加入其中，25分钟超声处理后，冷却，定容，制成样品溶液。取10ml量瓶6个备用，精确吸取已知浓度的样品溶液2ml加入其中，再精确吸取2ml浓度为0.122mg/ml绿原酸对照品溶液分别加入，定容，按上述色谱条件测定，每次进样均10μl，结果平均加样回收率为96.67%，RSD=1.01%（n=6）。

2.2忍冬叶提取工艺设计

2.2.1正交设计

考察标准：绿原酸含量，考察因素：加水量、提取次数、煎煮时间，建立出试验水平表（表1）。

3.讨论

金银忍冬叶的有效成分为绿原酸，其易溶于水，但不宜进行长时间提取，绿原酸在长时间提取条件下易分解量加大。运用正交试验，将煎煮时间、加水量、提取次数优化，联合批量生产需要，总结出忍冬叶提取的最优工艺，即共提取次数为2次，加水量均为11倍，第一次与第二次煎煮时间均为1h。

参考文献：

[1]王广树，周小平，袁升杰，等.金银忍冬果实中化学成分的研究[J].中国药物化学杂志，2010，20（3）：210-212.

[2]马俊利.金银忍冬叶化学成分的分离与鉴定[J].亚太传统医，2013，9（2）：31-33.

[3]武雪芬，白雁.金银花叶药用成分的提取及抑菌实验研究[J].中成药，2001，23（6）：446.

[4]赵彦杰.金银花叶提取物的抑菌效果研究[J].食品科学，2007，28（7）：63.