顶空气相色谱法同时测定右兰索拉唑中6种残留溶剂

顶空气相色谱法同时测定右兰索拉唑中6种残留溶剂

梁璐王敏赵一朗吴国生凌飒(通讯作者)

梁璐王敏赵一朗吴国生凌飒(通讯作者)

（湖北省医药工业研究院有限公司湖北武汉430061）

【摘要】目的：建立同时测定右兰索拉唑中甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、环己烷、甲苯6种残留溶剂的顶空气相色谱方法。方法：采用CB624(30m*250μm*1.4μm)毛细管柱，载气为氮气，FID检测器，顶空进样，通过外标法测定6种残留溶剂的含量。结果：在该色谱条件下，6种有机溶剂均能得到良好分离，各溶剂在所考察的质量浓度范围内与峰面积线性关系良好（R2≥0.9934），平均回收率为93.50％104.27％（n=9）。结论：本方法可应用于测定右兰索拉唑中甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、环己烷、甲苯的残留量。

【关键词】右兰索拉唑；顶空气相色谱法；残留溶剂

【中图分类号】R91【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2018）20-0377-02

右兰索拉唑为质子泵抑制剂，即H+-K+-ATP酶抑制剂，多为苯并咪唑类衍生物，具有抗炎、抗氧化、抗凋亡及抗癌等多重药理作用，主要用于糜烂性食管炎急性期及维持期的治疗，以及非糜烂性胃食管反流疾病烧心症状的控制[1]。右兰索拉唑是兰索拉唑的右旋对映体，平均滞留时间更长、消除速率远小于消旋体[2]。右兰索拉唑在合成过程中使用了6种有机溶剂，这些溶剂会对人体健康和环境造成危害，因此有机溶剂的残留量控制对保证药品质量和用药安全具有十分重要的意义。目前尚未见右兰索拉唑有机溶剂残留检测方法的报道。本研究利用顶空气相色谱法，建立了同时测定右兰索拉唑中6种残留溶剂的新方法，为右兰索拉唑的质量控制提供参考。

1.仪器与试药

1.1仪器

Agilent7890A气相色谱仪；Agilent7694E型自动顶空进样器；MetlerAL204型电子天平（MetlerToledo公司）。

1.2试药

右兰索拉唑（湖北省医药工业研究院有限公司，批号：20171220、20171221、20171222、20180109、20180110、20180111）；甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、环己烷、甲苯、DMF均为分析纯。

2.方法与结果

2.1色谱条件

色谱柱：AgilentCB624毛细管色谱柱（30m×250μm，涂层厚1.4μm）；柱温：40℃（保持5分钟），以10℃/min升至160℃（保持5min）；进样口温度：200℃，分流比：5:1；检测器温度：250℃；载气：氮气，流速1.5ml/min；顶空平衡温度：100℃（平衡时间15min）；定量环温度：110℃；传输线温度：120℃。

2.2溶液配制

样品溶液的配制：精密称取右兰索拉唑0.3g，置10ml顶空瓶中，加入3mlN，N-二甲基甲酰胺（DMF），溶解。

对照品溶液的配制：精密称取甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、环己烷、甲苯适量加DMF稀释制成每1ml中含289μg甲醇、503μg丙酮、65μg二氯甲烷、486μg乙酸乙酯、377μg环己烷、98μg甲苯的溶液。

2.3专属性试验

取2.2项下对照品和样品溶液分别进样，各组分之间分离度均大于1.5，溶剂及样品对检测样品中残留溶剂均无干扰，色谱图见图1。

A空白溶液；B对照品溶液；C供试品溶液。1.甲醇；2.丙酮；3.二氯甲烷；

4.乙酸乙酯；5.环己烷；6.甲苯。

图1GC色谱图

2.4定量限与检测限试验

取对照品溶液逐级稀释，分别进样，检测限以信噪比为3左右计算，定量限以信噪比为10左右计算。甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、环己烷、甲苯检出限分别为：1.30、0.91、0.70、1.60、0.24、1.00μg·ml-1；定量限分别为4.34、3.02、2.34、5.35、0.79、3.33μg·ml-1。

2.5线性和范围

精密称取579mg甲醇、989mg丙酮、132mg二氯甲烷、984mg乙酸乙酯、770mg环己烷、207mg甲苯加DMF稀释至100ml，作为线性储备溶液；分别量取线性储备溶液2.5，4，5，6，7.5，10ml，置100ml量瓶，用DMF稀释至刻度，即分别为50%、80%、100%、120%、150%、200%线性溶液，取3ml置顶空瓶，分别进样，以浓度为横坐标，响应值为纵坐标，求得线性回归方程，结果见表1。

2.6精密度试验

分别取2.2项下对照品溶液80%、100%、120%作为低、中、高精密度溶液，分别进样3次，计算各不同浓度下RSD，甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、环己烷、甲苯分别为4.57%、4.39%、4.14%、4.83%、4.05%、4.95%。

2.7回收率

称取右兰索拉唑样品0.3g，分别加入2.2项下对照溶液80%、100%、120%各3ml，分别进样，结果得甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、环己烷、甲苯的平均回收率分别为104.27%、103.34%、102.88%、102.12%、93.50%、100.27%。

2.8耐用性

取2.2项下对照品溶液3ml，置于10ml顶空进样瓶中，进样，并分别改变顶空时间±5min，顶空温度±5℃，初始柱温±5℃，载气流速±0.2ml/min，考察方法耐用性。顶空时间改变对峰面积无影响，顶空温度升高峰面积增大，但对检测结果无明显影响；改变初始柱温以及流速，峰面积无影响，出峰时间会提前或延后，但各组分间分离度仍满足要求，对检测结果无影响。

2.9样品检测

分别取6批右兰索拉唑样品0.3g，按2.2项下配制，分别进样，6批样品中甲醇、丙酮、二氯甲烷、甲苯均未检出，乙酸乙酯0.034%～0.045%，环己烷0.032%～0.062%。

3.讨论

3.1进样方式的选择

顶空进样可减小样品干扰，增大方法灵敏度，故选用顶空方式进样。

3.2溶剂的选择

样品浓度100mg/ml较高，应选择对右兰索拉唑溶解性好的溶剂。DMSO毒性较小且比较稳定，但实验过程中发现样品用DMSO溶解后在GC色谱条件下会发生降解产生未知峰，故采用偏碱性稀释剂DMF试验，样品易溶，且在GC条件下样品稳定，不会产生降解杂质。

3.3顶空条件的选择

耐用性试验顶空10min、15min与20min对照品溶液峰面积无变化，表明顶空15min后，顶空进样瓶中已达到气液平衡，不需要增加顶空时间，以实现快速高效分析。

3.4结论

方法专属性、灵敏度及线性均良好，精密度、准确度、耐用性均满足要求，本方法可应用于测定右兰索拉唑中有甲醇、丙酮、二氯甲烷、乙酸乙酯、环己烷、甲苯的残留量。

【参考文献】

[1]邢爱敏.用于胃食管反流症状的药物右兰索拉唑[J].药学进展，2010,34（8）:377-378.

[2]房超，包泳初,陈庆华.右旋兰索拉唑双相控缓释剂的药动学研究及其临床疗效[J].中国医药工业杂志，2011,32（7）:429-430.

[3]韩薇，赵丽云，燕强勇，等.顶空气相色谱法测定埃索美拉唑钠中溶剂残留量[J].沈阳药科大学学报，2012,29（4）:276-279.

[4]任英，刘延凤.顶空气相色谱法测定吡非尼酮中有机溶剂残留量[J].药学研究,2013,32（5）:271-272.

[5]HKatsuki,HYagi,KArimori;DeterminationofR(+)-andS(-)-Lansoprazoleusingchiralstationary-phaseliquidchromatographyandtheirenantioselectivepharmacokineticsinhumans[J].PharmaceuticalResearch,1996,13(4):611-5.

[6]胡育军,杨玥凤,叶永昌.右兰索拉唑与埃索美拉唑治疗胃食管反流病的疗效比较[J].2015,32(6):739-745.

作者简介：梁璐（1986.3-），女，汉族，籍贯：广西桂林，职称：工程师，研究方向：新药质量研究.