HCV基因分型在丙肝诊断及医学检验中应用价值分析

HCV基因分型在丙肝诊断及医学检验中应用价值分析

王晓莹

哈尔滨市传染病院黑龙江哈尔滨150036

摘要：目的：建立HCV基因分型方法，研究HCV基因型与肝病程度的关系，为丙肝诊断和治疗提供理论依据。方法：HCV基因组NS5区PCR扩增产物酶切分型。结果：酶切分型证实，53例为HCVⅡ型（1b），37例为HCVⅢ型（2a）。未发现Ⅰ型（1a）、Ⅳ型（2b）以及其他基因型。根据诊断标准，确诊为慢性丙肝46例，丙肝后肝硬化44例，未发现急性肝炎。HCV基因型与不同肝病程度的，按预定治疗方案对所确定的病例进行治疗，疗程期满，其治疗效果为：CR34例，PR24例，NR32例。结论：HCV基因型同肝病严重程度关系密切，并对抗病毒治疗影响重大。HCV基因分型对于患者的诊断及治疗具有重要指导意义。

关键词：HCV基因分型；丙肝；干扰素；聚合酶链反应

ApplicationofHCVgenotypinginhepatitisCdiagnosisandmedicalexamination

Abstract：Objective：ToestablishamethodofHCVgenotypingtostudytherelationshipbetweenHCVgenotypesandthedegreeofliverdisease，andtoprovideatheoreticalbasisforthediagnosisandtreatmentofhepatitisC.Methods：PCRamplificationproductsofNS5regionofHCVgenomeweredigestedbyrestrictionenzymedigestion.Results：Enzymedigestionconfirmedthat53caseswereHCVtypeII（1b）and37caseswereHCVtypeIII（2a）.NotypeI（1a），typeIV（2b）andothergenotypeswerefound.Accordingtothediagnosticcriteria，46caseswerediagnosedaschronichepatitisCand44caseswerehepatitisCcirrhosis.Noacutehepatitiswasfound.HCVgenotypeanddegreeofdifferentliverdisease，accordingtothescheduledtreatmentofthetreatmentoftheidentifiedcases，thecourseoftreatment，thetreatmenteffectis：CR34cases，PR24cases，NR32cases.Conclusion：ThegenotypeofHCViscloselyrelatedtotheseverityofliverdiseaseandhasasignificantimpactonanti-virustreatment.HCVgenotypinghasimportantguidingsignificanceforthediagnosisandtreatmentofpatients.

Keywords：HCVgenotyping；HepatitisC；Interferon；Polymerasechainreaction

前言

丙型肝炎病毒（HCV）是引起慢性肝炎和肝硬化的主要病原体之一，感染率一般在0.5%～2.0%之间，我国为3.2%。感染者的肝病程度和治疗效果存在较大差异，究其原因，人们发现HCV的基因型是导致这些差异的主要因素之一。HCV为单股正链RNA病毒，其全基因序列已基本被阐明。由于HCV复制时所依赖的多聚酶缺乏校对功能，加上其本身为适应环境和逃避宿主的免疫监视作用而易发生突变，因此在长期的演化过程中逐渐形成了众多突变株，即基因型。HCV感染者的肝病严重程度与治疗效果存在较大差异，HCV的基因型是造成此类差异的重要因素。为探讨HCV基因型同肝病严重程度的关系，研究HCV基因型同干扰素抗病毒疗效的关联，现报告如下。

1资料与方法

1.1试剂

抗-HCV检测试剂盒，用于筛选病例。

逆转录酶、限制性内切酶（AluⅠ，BalⅠ，Cfr10Ⅰ，ApaⅠ，MboⅠ）。

CR相关试剂、聚丙烯酰胺凝胶。

1.2资料

选取我院2015年1月-2017年6月期间收治的90例抗－HCV阳性患者作为研究对象，男36例，女54例，年龄（21-75）岁，平均年龄（40.75±12.52）岁。所选取患者的诊断均符合我国2001年《中华传染病杂志》的病毒性肝炎诊断标准。

1.3方法

应用抗-HCV检测试剂检测血清丙肝抗体，筛选病例。同时去除乙肝病毒等其他病毒合并感染者。用HCV基因组NS5区PCR检测方法确定研究病例。PCR阳性者为本文研究病例，并依据1995年5月北京第五次全国传染病寄生虫病学术会议修订的《病毒性肝炎诊断标准》对病例进行临床诊断，分为急性肝炎、慢性肝炎和丙肝后肝硬化。

依据血清ALT的变化判断疗效，分为三种治疗效果：

a.完全应答（CR）用药期间ALT水平在4周内降至正常（<40U/L），并持续16周无反复者。

b.部分应答（PR）：用药期间ALT水平低于正常上限的1.5倍（≤60U/L），但异常时间超过16周者。

c.无应答（NR）：用药期间ALT水平持续高于正常上限的1.5倍（>60U/L）者。

1.4疗效判定标准

疗效评定标准参考2015年新版《丙型肝炎防治指南》。无应答（NullresponseNＲ）：治疗第12周HCVＲNA较治疗前下降＜2log。部分应答（PartialresponsePＲ）：治疗第12周HCVＲNA较治疗前下降≥2log，且第12周和第24周HCV、ＲNA可测。快速病毒学应答（ＲapidvirologicalresponseＲVＲ）：治疗第4周HCVＲNA不可测。

1.5统计学方法

应用SPSS13.0统计软件，计数资料采取X2检验或Fisher确切概率法，P＜0.05为差异有统计学意义。

2结果

经筛选，确定90例患者为本文研究病例。酶切分型证实，53例为HCVⅡ型（1b），37例为HCVⅢ型（2a）。未发现Ⅰ型（1a）、Ⅳ型（2b）以及其他基因型。根据诊断标准，确诊为慢性丙肝46例，丙肝后肝硬化44例，未发现急性肝炎。HCV基因型与不同肝病程度的，按预定治疗方案对所确定的病例进行治疗，疗程期满，其治疗效果为：CR34例，PR24例，NR32例。

3讨论

HCV感染后，大多易转变为慢性肝炎，若不进行合理治疗，很容易发展成肝硬化甚至原发性肝癌。近年来，HCV基因分型越来越得到大家关注，并成为研究热点。一些研究发现，丙型肝炎病毒基因型在分布上存在较为显著的地域差异，我国以1b型与2a型为主，南北方城市差别并不是很大，但南方的1b型多于东北城市，在少数民族地区型别的分布差异较大。应用IFN-α2b进行抗病毒治疗时Ⅲ型HCV感染者的疗效好于Ⅱ型HCV感染者，在治疗上要考虑基因型的影响。

综上所述，HCV基因型与肝病严重程度有着密切关系，并且对抗病毒治疗产生很大影响。因此，HCV基因分型检测可为HCV感染者的诊断和治疗提供重要的科学依据。

参考文献：

[1]高丽，杨绍敏.HCV基因分型进展及临床意义.[J]传染病信息，2013，2：122-125．

[2]黄超群，王福祥．丙型肝炎病毒基因分型的研究进展.[J]世界华人消化杂志，2012，35：3529-3535．