乳腺癌细胞凋亡指数、PCNA、PgP与乳腺癌预后相关性的研究

乳腺癌细胞凋亡指数、PCNA、PgP与乳腺癌预后相关性的研究

陈高辉1田寅2廉奇鑫2通讯作者：周昱2

1.佳木斯大学黑龙江佳木斯154007；2.佳木斯大学附属第一医院黑龙江佳木斯市154003

摘要：目的：对癌细胞凋亡指数（AI）、增殖细胞核抗原（PCNA）、P糖蛋白（PgP）几项指标在乳腺癌患者预后影响的作用进行探讨分析。方法：根据2005年至2010年我院的80例乳腺癌患者石蜡包埋病理标本进行研究分析，对患者的乳腺癌细胞凋亡指数（AI）及PCNA、PgP相关基因进行分析研究。结果：乳腺癌细胞凋亡的特征为，染色质在细胞核上，颜色棕黄，部分凋亡细胞核会缩小，核膜处于完整状态。此次研究中有7例没有出现凋亡，73例有不同程度凋亡，凋亡率是91.2%。此次研究中共出现了54例凋亡指数介于0到0.21的病例，其中有4例淋巴结转移；还有26例的凋亡指数介于0.25到0.57，其中有三例属于淋巴结转移，患者的增殖细胞核抗原阳性率是78.6%。P糖蛋白阳性表达率为28.7%。结论：肿瘤发病和细胞凋亡、增殖有直接联系，PCNA蛋白表达和组织分级以及淋巴结转移关系紧密，PgP在乳腺癌组织存在表达，该指标和患者生存期有关系，因此可以将AI、PCNA、PgP作为乳腺癌预后诊断指标。

关键词：乳腺癌；细胞凋亡指数（AI）；PCNA；P糖蛋白

[Abstract]Objective：Toinvestigatetheprognosticvalueofapoptosisindex（AI），proliferatingcellnuclearantigen（PCNA）andPglycoprotein（PgP）inpatientswithbreastcancer.Methods：from2005to2010inourhospital80casesofpatientswithbreastcancerparaffinembeddedspecimenswereanalyzed，theindexofapoptosisofbreastcancerpatients（AI）ofPCNA，PgPandrelatedgenes.Results：thecharacteristicsofbreastcancercellapoptosis，chromatininthenucleus，thecolorofbrown，partofcellapoptosiswillbereduced，thenuclearmembraneinintactstate.Inthisstudy，7casesshowednoapoptosis，and73caseshaddifferentdegreesofapoptosis.Therateofapoptosiswas91.2%.Thestudyonthe54casesofapoptosisindexrangedfrom0to0.21，ofwhich4casesoflymphnodemetastasisand26cases；apoptosisindexbetween0.25to0.57，ofwhichthreecasesbelongtothelymphnodemetastasis，PCNApositiverateofpatientsis78.6%.ThepositiverateofPglycoproteinwas28.7%.Conclusion：theincidenceandisdirectlylinkedtoapoptosis，tumorproliferation，PCNAproteinexpressionandhistologicalgradeandlymphnodemetastasisarecloselyrelated，PgPisexpressedinbreastcancertissues，thereisarelationshipbetweentheindexandsurvival，soitcanbeAI，PCNA，PgPasdiagnosticindicatorsoftheprognosisofbreastcancer.

[Keywords]breastcancer；apoptosisindex（AI）；PCNA；Pglycoprotein

乳腺癌是女性发病率较高的一类恶性肿瘤疾病，目前乳腺癌发病率越来越高，该疾病的治疗以及预后情况受到了较为广泛的关注，肿瘤发病和细胞凋亡之间的联系较为紧密，两者失衡，则导致了发病，凋亡是细胞自主的有序死亡，对其和肿瘤之间的关系具有较高研究价值。化疗是乳腺癌治疗的方式，但是其有效率不佳是一个比较大的问题，肿瘤细胞核化疗药物会有交叉耐药反应，这是肿瘤化疗失败的一个因素。对AI、PCNA、PgP在乳腺癌组织中的表达情况进行分析具有重要的意义。

1资料与方法

1.1一般资料根据2005年至2010年我院的80例乳腺癌患者石蜡包埋病理标本进行研究分析，对患者的乳腺癌细胞凋亡指数（AI）及PCNA、PgP相关基因进行分析研究。患者最小33岁，最大82岁，平均49.2岁。全部样本接受了病理诊断，使用世界卫生组织制定的乳腺癌组织分级标准进行分级。患者之前未接受过其他的治疗。

1.2方法我们此次研究使用的是免疫组化技术，选择原位细胞凋亡检测（TUNEL）试剂盒，检验细胞凋亡情况，并进行量化分析。使用的TUNEL试剂盒是福建迈新生物技术开发公司生产，将PBS作为阴性对照，将已知阳性切片作为阳性对照，经二甲苯脱脂后，使用0.3%的H2O2甲醇溶液室温下孵育，经过苏木精复染后，于光镜下进行观察。

1.3PCNA、PgP免疫组化检测选取的样本使用10%福尔马林固定、石蜡包埋、常规连续切片等一系列的操作后，进行SP染色处理。经DAB显色，和已知乳腺癌阳性切片进行比对，以PBS做阴性比对。

1.4判定标准细胞凋亡阳性的判断：在光镜下观察，阳性细胞核是棕黄色和棕褐色，均匀染色，呈现颗粒状。对阳性细胞分布情况进行观察记录。将显微镜调整为40×10倍，对视野内的阳性细胞数量进行统计。随机计算5个高倍视野中阳性细胞百分比，所得结果为AI。当该数值低于10%，则为阳性，10%至20%则为弱阳性，20%至30%则为阳性++。超过30%位强阳性+++。

2结果

乳腺癌细胞凋亡的特征为，染色质在细胞核上，颜色棕黄，部分凋亡细胞核会缩小，核膜处于完整状态。此次研究中有7例没有出现凋亡，73例有不同程度凋亡，凋亡率是91.2%。此次研究中共出现了54例凋亡指数介于0到0.21的病例，其中有4例淋巴结转移；还有26例的凋亡指数介于0.25到0.57，其中有三例属于淋巴结转移，患者的增殖细胞核抗原阳性率是78.6%。P糖蛋白阳性表达率为28.7%。

3讨论

细胞凋亡是恶性肿瘤疾病自发的现象[1]，在基因影响下，细胞有序死亡，不管肿瘤处于何种阶段，细胞的凋亡都会存在[2，3]，乳腺癌患者在月经周期末的凋亡情况比较突出[4]。肿瘤细胞在转变过程中，有多个阶段，逐渐发展，有些还处于癌前细胞状态，有些已经出现浸润和转移，有些已经凋亡，肿瘤新陈代谢速度快，则凋亡细胞多[5]。癌细胞凋亡指数被作为癌预后依据之一，该指标较高的患者，预后效果比较好，此次研究中，癌细胞凋亡指数较高的患者，淋巴结转移度比较低。增殖细胞核抗原的合成表达与细胞周期密不可分，其阳性表达在DNA合成期，可以体现癌细胞增殖活性[6-8]。此次研究中，乳腺癌细胞凋亡的特征为，染色质在细胞核上，颜色棕黄，部分凋亡细胞核会缩小，核膜处于完整状态。此次研究中有7例没有出现凋亡，73例有不同程度凋亡，凋亡率是91.2%。此次研究中共出现了54例凋亡指数介于0到0.21的病例，其中有4例淋巴结转移；还有26例的凋亡指数介于0.25到0.57，其中有三例属于淋巴结转移，患者的增殖细胞核抗原阳性率是78.6%。P糖蛋白阳性表达率为28.7%。

根据本文探讨分析，癌细胞凋亡指数、PCNA、PgP指标和患者预后情况联系紧密，临床中对患者进行检测，能够有效为患者的临床治疗提供方向。

参考文献：

[1]张淑群，王西京，纪宗正，等.乳腺癌中端粒酶活性与细胞凋亡的研究.西安交通大学学报（医学版），2003，24（3）：230248.

[2]范宇，傅西林，王颖，等.细胞凋亡及其相关基因与乳腺癌预后关系的研究.中国肿瘤临床，2000，27（7）：524529.

[3]MikamiT，YanagisawaNBabaH，etal.Associationofbcl2proetinexpressionWithgallbladdercarcinomadifferentiationandprogressionanditsRelationtoapoptosis.Cancer，1999，85：318329.

[4]FergusonDJD，AndersonTJMorphologicalevaluationofcellturnoverinrelationtothemenstrualcycleinthe“resting”humanbreastBreast.BrCancer，1981，44：177179.

[5]ZhengWQ，ZhanRZ，Quantitative，comparisonofapoptosistocellproliferationandP53proteininbreastcarcinomas.AnalytQuantCytolhistol，1998，20（1）：16.

[6]韩静绮，王峰梅，冶俊玲.乳腺癌中的ER，PR，P53，CerbB2和PCNA的表达及临床意义.第四军医大学学报，2008，29（7）：663665.

[7]田斌，孙涛，牛虎，等.PTEN，PCNA，IV型胶原在乳腺癌中的表达及临床意义，第四军医大学学报，2008，29（5）：457.

[8]李杰，许良中，吴昊.三种耐药基因蛋白表达在乳腺癌中的临床意义.癌症，2001，20（8）：866868.