[摘要] 目的 分析不同汇集规格、汇集时间对混合浓缩血小板质量的影响，为制备混合浓缩血小板提供依据。方法 选取1～2天内采集的300ml规格全血84袋和400ml规格全血97袋，采用白膜法制备成单袋浓缩血小板，随机汇集单袋浓缩血小板并过滤去除白细胞制备成混合浓缩血小板，对混合浓缩血小板质量进行检查，分析不同汇集规格、汇集时间对混合浓缩血小板质量的影响。结果 共制备混合浓缩血小板30袋，质量符合率为83.3%；利用300ml和400ml规格全血制备的混合浓缩血小板质量符合率无显著性差异（P﹥0.05），利用1～2天内采集的全血制备的混合浓缩血小板质量符合率无显著性差异（P﹥0.05）。结论 1～2天内采集的300ml和400ml规格全血在48小时内随机制备的混合浓缩血小板质量符合国家标准，不同汇集规格和汇集时间对混合浓缩血小板质量无影响。
[关键词] 混合浓缩血小板；制备技术；质量
[中图分类号] R457.1
Effects of different mixed specifications and times on the quality of mixed platelet concentrate
TANG Zuo-hong, FENG Xia, HE Hong, ZHU Ding-rong, ZUO Tao, CAI Lan△
(Panzhihua city central blood station, Sichuan 617000, China)
[Abstract] Objective To analyze the effects of different mixed specifications and times on the quality of mixed platelet concentrate, and to provide evidence for the preparation of mixed platelet concentrate. Methods The pooled platelets were prepared by buffy coat from 84 bags 300ml and 97 bags 400ml of whole blood collected within 1-2 days. The mixed platelet concentrates were prepared by mixing the single bag pooled platelets and filtering to remove the white blood cells. The quality of mixed platelet concentrates was inspected and the effects of different mixed specifications and times on the quality of mixed platelet concentrate was analyzed. Results 30 bags of mixed platelet concentrates were prepared and the quality compliance rate was 83.3%. There was no significant difference in the quality compliance rate of mixed platelet concentrates prepared with 300ml and 400ml whole blood (P﹥0.05), and there was no significant difference in the quality compliance rate of mixed platelet concentrates prepared with whole blood collected within 1 to 2 days (P﹥0.05). Conclusion The 300ml and 400ml whole blood collected within 1-2 days can be used to prepare mixed platelet concentrates randomly within 48 hours, and the quality of mixed platelet concentrates conform to the national standard. The quality of mixed platelet concentrates was not affected by different mixed specifications and times.
[Key words] The mixed platelet concentrate; Preparetion technology; Quality
临床患者血小板减少或功能异常，可导致出血或止血困难，如果不及时治疗或治疗效果不好，临床患者会有死亡风险。临床治疗中，输注血小板制剂是治疗血小板数量减少和功能障碍的重要措施。临床常用的血小板制剂有单采血小板、浓缩血小板和混合浓缩血小板等[1]。由于单采血小板存在采集成本高、病人负担重、献血者招募困难、成功采集率低等缺点，造成临床供不应求，制备安全有效的浓缩血小板、尤其是混合浓缩血小板，对满足临床血小板需求将起到十分重要的作用。为有效利用血液资源，补充临床用单采血小板的不足，攀枝花市中心血站于2019年10～12月开展了混合浓缩血小板制备和质量检查，分析了不同汇集规格、汇集时间对混合浓缩血小板质量的影响。相关结果报告如下。
1 资料与方法
1.1 一般资料
选取符合《献血者健康检查要求》（GB 18467-2011）和《血站技术操作规程》所采集的300ml全血84袋和400ml全血97袋作为起始血液，随机制备成的混合浓缩血小板30袋。
1.2 仪器和耗材
大容量低温离心机（德国赛默飞，型号Cryofuge-16）、全自动血液成分分离机（深圳普特医学，型号LMB）、血液滤白柜（山东威高，型号MBC-60）、细菌培养仪（法国梅里埃，型号3D60）、全自动血细胞分析仪（Sysmex，型号XP100）、血小板恒温保存箱(意大利HELMER，型号PC1200i)、一次性使用塑料血袋（四川南格尔，400ml批号181004、300ml批号190728）、一次性使用白细胞过滤器（南京双威，规格FST-PL310，批号2019011）、一次性使用血小板常温保存袋（四川南格尔，批号180526）等。
1.3 方法
1.3.1 混合浓缩血小板的制备
（1）第1天采集的300ml和400ml规格全血于20℃～24℃保存和运输，当天下午（血液采集后10小时内），以相对离心力1700g（300ml）或1900g(400ml)、离心时间15min、离心温度22℃、加速9、减速3对采集血液进行重离心，分离出白膜成分，于20℃～24℃静置过夜保存。（2）第2天上午（血液采集后24小时内），以相对离心力200g、离心时间10min、离心温度22℃、加速9、减速3对白膜成分进行轻离心，分离出浓缩血小板（Platelet concentrate，PC），收集于血小板专用袋内20℃～24℃震荡保存。（3）第3天上午（血液采集后48小时内），将第2天所采集的全血分离出PC；待第1～2天所采集的血液检测合格后，将2天内的PC随机按治疗量汇集于一次性使用白细胞过滤器，过滤白细胞后制备成混合浓缩血小板，收集于血小板专用袋内20℃～24℃震荡保存。
制备成的混合浓缩血小板，按不同汇集规格分为A组（仅汇集300ml全血的PC）、B组（汇集300ml和400ml全血的PC）、C组（仅汇集400ml全血的PC）；按不同汇集时间分为甲组（仅汇集第1天全血的PC）、乙组（汇集第1天和第2天全血的PC）、丙组（仅汇集第2天全血的PC）。
1.3.2 混合浓缩血小板的质量检查
按《全血及成分血质量要求》（GB 18469-2012）和《全血及成分血质量监测指南》（WS/T550-2017）对混合浓缩血小板质量进行检查。
1.4 统计学处理
所有数据使用SPSS17.0进行统计分析。计量资料正态分布用
±s表示，组间比较采用t检验，多组间比较采用方差分析；计数资料用率/构成比表示，组间采用χ2检验，检验水准α=0.05，以P＜0.05为差异有统计学意义。
2 结 果
2.1 基本情况
随机制备混合浓缩血小板30袋，按汇集规格分为A、B、C组，各占20.0%（6/30）、40.0%（12/30）、40.0%（12/30）；按汇集时间分为甲、乙、丙组，各占50.0%（15/30）、36.7%（11/30）、13.3%（4/30）。不同汇集规格、汇集时间制备的混合浓缩血小板单位数均值无显著性差异，详见表1。
表1 不同汇集规格、汇集时间制备的混合浓缩血小板单位数均值比较（ ±s）
混合浓缩血小板单位数均值（U） | F | P | |
汇集规格分组 | 1.258 | ﹥0.05 | |
A组 | 10.500±0.9487 | ||
B组 | 10.292±1.8023 | ||
C组 | 11.333±1.7753 | ||
汇集时间分组 | 0.202 | ﹥0.05 | |
甲组 | 10.633±1.7471 | ||
乙组 | 10.727±1.8757 | ||
丙组 | 11.250±0.9574 |
2.2 质量符合率
制备的30袋混合浓缩血小板，全部检查项目均符合的25袋，质量（全部检查项目均符合）符合率为83.3%（25/30），详见表2。白细胞混入量均值为（32.207±22.8585）×106，低于5×108，差异有统计学意义（t=-112.090，P﹤0.05）；高于5×106，差异有统计学意义（t=6.519，P﹤0.05）。
表2 混合浓缩血小板的质量检查结果
检查项目 | 检查结果 | 项目符合袋数[n（%）] |
标签 | 符合 | 30（100.0） |
外观 | 符合 | 30（100.0） |
容量（ml） | 283.38±49.338 | 30（100.0） |
储存期末PH | 7.28±0.127 | 26（86.7） |
血小板含量（×1011） | 2.622±0.6401 | 28（93.3） |
红细胞混入量（×109） | 0.386±0.1909 | 30（100.0） |
无菌试验 | 阴性 | 30（100.0） |
2.3 不同汇集规格的质量符合率
按汇集规格分组，血小板含量符合率无统计学差异（χ2=2.405，P﹥0.05），储存期末PH符合率无统计学差异（χ2=0.456，P﹥0.05），质量符合率无统计学差异（χ2=1.698，P﹥0.05），详见表3。
表3 不同汇集规格的质量检查结果
汇集规格分组 | 血小板含量符合袋数[n（%）] | 储存期末PH符合袋数[n（%）] | 质量符合袋数[n（%）] |
A组 | 5（83.3） | 5（83.3） | 4（66.7） |
B组 | 11（91.7） | 10（83.3） | 10（83.3） |
C组 | 12（100.0） | 11（91.7） | 11（91.7） |
2.4 不同汇集时间的质量符合率
按汇集时间分组，血小板含量符合率无统计学差异（χ2=0.646，P﹥0.05），储存期末PH符合率无统计学差异（χ2=1.846，P﹥0.05），质量符合率无统计学差异（χ2=1.591，P﹥0.05），详见表4。
表4 不同汇集时间的质量检查结果
汇集时间分组 | 血小板含量符合袋数[n（%）] | 储存期末PH符合袋数[n（%）] | 质量符合袋数[n（%）] |
甲组 | 14（93.3） | 12（80.0） | 12（80.8） |
乙组 | 10（90.9） | 10（90.9） | 9（81.8） |
丙组 | 4（100.0） | 4（100.0） | 4（100.0） |
3 讨 论
浓缩血小板从献血者采集的全血中提取，具有血液资源丰富、易提取等优点，是临床补充单采血小板供应不足的重要血液成分。但临床使用单袋浓缩血小板存在配血麻烦、临床使用意愿较低、容易造成浓缩血小板过期报废等现象；同时，混合浓缩血小板来源于多个献血者个体、白细胞含量高，易造成血小板输注无效及输血不良反应发生等问题。美国、英国、加拿大和欧洲各国先后采用单袋浓缩血小板汇集和去除白细胞制备混合浓缩血小板，临床推广使用比例较高，实现了血液资源的有效利用
[2,3]。国内出台《全血及成分血质量要求》（GB 18469-2012），规定了混合浓缩血小板的质量标准。国内也有相应的文献报道[4-8]，对混合浓缩血小板的制备、质量和临床效果进行了评价。但国内现有文献报道中，制备的起始血液为400ml规格，无利用300ml规格全血制备混合浓缩血小板的报道，血液资源有效利用不足；汇集时间多为利用同一天采集的同血型血液作为起始血液，而中小型采供血机构并不能确保同一天采集到足量的同血型全血、且不能确保当天出具血液检测结果。
本次研究共制备的30袋混合浓缩血小板，质量检查符合率为83.3%，表明血液采集、制备和储存等过程受控，质量符合《全血及成分血质量要求》（GB 18469-2012），可以投入临床使用。本次研究选取1～2天内采集的300ml和400ml规格的全血作为起始血液，采取白膜法制备单袋浓缩血小板，随机汇集单袋浓缩血小板并过滤白细胞制备成混合浓缩血小板。从汇集规格来看，利用300ml规格全血或400ml规格全血作为起始血液制备的混合浓缩血小板质量符合率无显著性差异，不同汇集规格对混合浓缩血小板质量无影响，可以充分利用现有血液资源制备混合浓缩血小板，满足临床使用需求。从汇集时间来看，利用1～2天采集的血液作为起始血液，在48小时内制备的混合浓缩血小板质量符合率无显著性差异，不同汇集时间对混合浓缩血小板质量无影响，可以克服中小型采供血机构同一天不能采集足量同血型血液、不能当天出具血液检测结果的困难。同时，本次研究中增加了去除白细胞措施9,10]，使白细胞混入量达到单采血小板标准，能减少输血不良反应的发生、提高临床治疗效果[11,12]。
根据《血站技术操作规程》要求，去除白细胞应当在采血后48小时内或根据白细胞过滤器要求完成白细胞过滤，所以本次研究汇集和过滤白细胞的时间控制在48小时内。但胡成义报道[13]，浓缩血小板制备保存5天内均可进行汇集制备成混合浓缩血小板。同时，本次研究虽然采取了去除白细胞措施，但白细胞混入量未达到去白细胞单采血小板标准。因此，选择合适的白细胞过滤器，在采血后5天内均能过滤去除白细胞，能更有效地利用血液资源，满足中小型采供血机构的工作实际需要；同时，可以积极探索白细胞混入量的影响因素，进一步降低白细胞混入量，提升混合浓缩血小板的临床治疗效果。
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