对比金标法、酶联免疫法用于抗 -HIV 测定的实际效果

(整期优先)网络出版时间:2020-07-22
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对比金标法、酶联免疫法用于抗 -HIV 测定的实际效果

杨全翠

四川省阿坝州藏医院藏医药研究所 四川 阿坝 624000

摘要:目的:研究在抗-HIV测定中采用金标法和酶联免疫法的应用效果。方法:选取2016年10月~2019年5月我院收治的924患者作为研究对象,对这些患者进行血液样本采集,均于晨起空腹状态下采集5mL血液,采血严格按照无菌操作来执行,分别采用酶联免疫法以及金标法进行检测,对比两种方法的检测结果。结果:金标法和酶联免疫法确诊血样的阳性率分别是1.30%、0.65%,采用免疫印迹法确诊的阳性例数为11例,阳性率为1.19%(11/924)。结论:酶联免疫法与金标法在抗-HIV检测中均有一定的测定效果,金标法快捷、方便、可行性高,临床上根据实际使用情况,选择恰当的检测方法。

关键词酶联免疫法;金标法;抗-HIV测定;检验效果

艾滋病(AIDS)就是获得性免疫缺陷综合征的简称,机体感染人类免疫缺陷病毒也就是艾滋病毒所致的,可导致全身性疾病,机体也会发生不同程度的免疫功能缺陷,若不及时进行治疗,在晚期可伴有各种感染以及恶性肿瘤,导致患者死亡[1]。HIV是导致艾滋病的传染源,HIV病毒检测的方法较多,如免疫蛋白印迹法(WB)、酶联免疫法、双抗原夹心ELISA法、明胶颗粒凝集实验(PA法)、金免疫层析试验,WB法不仅检测成本高,操作也复杂,因此,快速、合适的检测方法就尤为重要[2]。本文就不同免疫检验方法用于检测抗HIV结果的可靠性进行研究,现报告如下。

1.资料及方法

1.1一般资料

选取2016年10月~2019年5月在我院治疗的924例患者参与本次研究,男性445例、女性479例,年龄20~49岁,平均年龄(33.17±5.38)岁。

1.2方法

在患者空腹状态下,采集5mL静脉血,保证血样检测前后均没有被污染,也无溶血发生,严格按照无菌操作标准来进行。

金标法:在金标法试剂中加入25μL血清,再加一滴缓冲液,放置20min用肉眼观察,若试纸上有两条红线,可将此次检测结果确定为阳性,若为一条红线,则为阴性,并记录产生红线的时间。

酶联免疫法:采用Gene company limited公司生产的ELX800自动化酶分析仪,采用美国Bio-Rad提供的HIV抗体诊断试剂盒,严格按照仪器以及试剂盒的说明书完成所有操作方法,结果采用酶标仪进行判定,检测标准a值:检测波长和参考波长分别为450nm、630nm,超过a值1时,表示检测结果为阳性,a值小于1时,则表示为阴性。

两种检测方法中初次检验确定为阳性的血液标本需再次检查,实施确认试验,将确认的阳性血样送到疾控中心进行免疫印迹法检测,所有仪器操作均由相同的检测人员来开展。

1.3观察指标

对比金标法和酶联免疫法的确诊阳性率以及全部血样中阳性血样所占比例。

1.4统计学分析

采用统计学软件SPSS21.0处理研究数据,计量资料:“5f17e38beb9fd_html_2a9f86e3b9f24440.gif ”,5f17e38beb9fd_html_c4663d3461a9e14a.gif 检验;计数资料:(5f17e38beb9fd_html_601d8a1d9632fdcf.gif ),c2检验。P<0.05:差异有统计学意义。

2.结果

两种检测方法初次检验和确诊检验相比,无统计学差异,P>0.05,经免疫印迹法确诊11例为抗-HIV,如表1所示:

1 两种检测方法对抗-HIV检测结果对比表[n%]

检测方法

例数

初次检验

确诊检验

免疫印迹确诊(%)

金标法

924

15(1.62)

12(1.30)

11(1.19)

酶联免疫法

924

9(0.97)

6(0.65)

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-

1.520

2.020

P

-

0.218

0.155

  1. 讨论

艾滋病是因为感染HIV病毒所致的一种非常严重的传染病,主要传播途径为性接触、血液、母婴等,因此,临床上对潜伏在机体的艾滋病毒及时进行检测,有助于控制艾滋病的传播和发展[3]。临床上对HIV病毒常用的检测方法为抗体检测,机体感染HIV时,就会出现免疫反应和抵抗性抗体。当HIV病毒侵入机体T淋巴细胞,T淋巴细胞作为免疫系统最主要的细胞受到破坏,造成免疫力下降。HIV感染后,最开始的数年至10余年可无任何临床表现。一旦发展为艾滋病,病人就可以出现各种临床表现。一般初期的症状如同普通感冒、流感样,可有全身疲劳无力、食欲减退、发热等,随着病情的加重,症状日见增多,如皮肤、黏膜出现白念球菌感染,出现单纯疱疹、带状疱疹、紫斑、血疱、淤血斑等;血液、精液、性接触均可感染HIV病毒,感染HIV病毒后若得艾滋病就有非常高的死亡率,临床上对此病毒的重视度极高。由于无特效治疗药物,临床预防和控制就非常重要了

[4]

酶联免疫法需借助精密仪器完成监测,操作相对复杂,成本也高,虽然作为临床基础检测方法,准确度也高,但是检测耗时,对发病危急的患者并不适用,而且操作步骤繁琐,检测时间长,对样本量少的检测不太适用[5]。金标法是我一种近些年临床上才采用的检测手段,有很高的灵敏性,操作便捷、检测准确率也高,可在较短时间内获得检测结果,且试剂可以保存一年甚至更长时间。但是金标法也存在一定的局限性,此方法发展较晚,临床应用不成熟,特异性较低,出现假阳性的几率较大[6]。本研究结果显示,两种检测方法初次检验和确诊检验相比,P>0.05。

综上所述,金标法和酶联免疫法均可用于抗-HIV的检测中,酶联免疫法检测的假阳性率低,可用于大量血液标本检测;金标法操作方便、快捷,适用于病情危急的患者,根据具体情况进行选择合适的检测方法。

参考文献

[1]隋丽红,王芳.两种抗-HIV酶联免疫试剂在无偿献血人群中筛查结果比较[J].检验医学与临床,2019,16(23):3486-3487.

[2]李坤,汤霞.化学发光免疫分析法与酶联免疫吸附试验法检测乙肝病毒感染标志物比较[J].基层医学论坛,2019,23(35):5127-5128.

[3]余艳艳,谭云洪,陈振华,陈忠南,刘彬彬,王珏.酶联免疫吸附试验在诊断HIV感染并发结核病患者中的价值[J].结核病与肺部健康杂志,2018,7(04):288-292.

[4]吴乔羽.用荧光定量PCR及金标法、酶联免疫法检测不孕妇女生殖道沙眼衣原体感染的比较[J].中国现代药物应用,2017,11(06):39-40.

[5]冯大超.使用金标法和酶联免疫法检测抗-HIV的效果探析[J].当代医药论丛,2016,14(12):19-20.

[6]谢云峥,祝宏,朱绍文.HBsAg、Anti-HCV、Anti-HIV酶联免疫吸附法筛查反应性献血者屏蔽与归队程序建议[J].临床输血与检验,2013,15(04):398-402.