(福建科胜司法鉴定所 福建 莆田 351100)
关键词:法医遗传学;亲子鉴定;多步突变;STR
1案例
1.1案情
因户口申报需要,一男子(假设父)携带一自称为其女儿的孩子来本鉴定所要求进行亲子鉴定。本鉴定所采集两位被鉴定人指尖血备检。
1.2检验过程
采用MicroreaderTM 21 Direct ID System(苏州阅微基因技术有限公司)进行复合扩增,发现D12S391基因座不符合孟德尔遗传规律,随后采用PowerPlex21 System试剂盒(Promega公司)对20个STR基因座进行了检验。同时采用MicroreaderTM 23sp-D ID System试剂盒(苏州阅微基因技术有限公司)对常染色体STR基因座加测到39个位点,Goldeneye17X(基点认知技术有限公司)对X染色体上17个STR基因座进行复核扩增,又发现D21S1270基因座不符合孟德尔遗传规律。
1.3检验结果
在D12S391基因座,假设父的基因型为“17”,孩子的基因型为“20”,存在多步突变的可能。在D21S1270基因座假设父的基因型为“11,14”,孩子的基因型为“10,12”,为较常见的一步突变。39个常染色体STR基因座的累计亲权指数CPI为2.1249×1011(注:大于10000),亲子关系相对机会RCP大于99.99%。常染色体STR基因座分型结果如(表1)显示。
表1 常染色体STR基因座分型结果
STR基因座 | 假设父 | 孩子 | 亲权指数PI | ||||
D19S433 | 13.2 | , | 14.2 | 13 | , | 13.2 | 6.7204 |
D5S818 | 11 | , | 13 | 11 | , | 13 | 2.5352 |
D21S11 | 29 | , | 30 | 30 | , | 31.2 | 0.8948 |
D18S51 | 16 | , | 18 | 18 | , | 18 | 10.9890 |
D6S1043 | 11 | , | 18 | 11 | , | 11 | 4.5704 |
D3S1358 | 17 | , | 17 | 16 | , | 17 | 2.4248 |
D13S317 | 9 | , | 11 | 11 | , | 11 | 2.1115 |
D7S820 | 9 | , | 12 | 8 | , | 12 | 1.0192 |
D16S539 | 11 | , | 12 | 12 | , | 12 | 2.4295 |
CSF1PO | 11 | , | 12 | 11 | , | 12 | 1.6819 |
PentaD | 9 | , | 11 | 10 | , | 11 | 2.0292 |
D2S441 | 10 | , | 11 | 10 | , | 14 | 0.9984 |
vWA | 14 | , | 14 | 14 | , | 16 | 1.9478 |
D8S1179 | 13 | , | 15 | 13 | , | 13 | 2.2512 |
TPOX | 8 | , | 11 | 11 | , | 11 | 1.6739 |
PentaE | 12 | , | 13 | 12 | , | 13 | 5.8332 |
TH01 | 7 | , | 7 | 7 | , | 8 | 1.8769 |
D12S391 | 17 | , | 17 | 20 | , | 20 | 0.0001 |
D2S1338 | 18 | , | 25 | 18 | , | 25 | 7.8962 |
FGA | 22 | , | 23 | 23 | , | 23 | 2.2351 |
D6S477 | 15 | , | 16 | 15 | , | 15 | 1.6529 |
D18S535 | 10 | , | 14 | 10 | , | 10 | 11.9332 |
D19S253 | 11 | , | 12 | 12 | , | 12 | 1.5101 |
D15S659 | 15 | , | 15 | 11 | , | 15 | 2.8377 |
D11S2368 | 18 | , | 23 | 17 | , | 23 | 5.7737 |
D20S470 | 17 | , | 19 | 14 | , | 19 | 30.1205 |
D1S1656 | 14 | , | 15 | 14 | , | 16 | 3.1807 |
D22-GATA198B05 | 17 | , | 17 | 17 | , | 21 | 3.2113 |
D7S3048 | 22 | , | 24 | 20 | , | 24 | 1.5985 |
D8S1132 | 16 | , | 21 | 16 | , | 22 | 17.8571 |
D4S2366 | 10 | , | 11 | 10 | , | 10 | 9.3110 |
D21S1270 | 11 | , | 14 | 10 | , | 12 | 0.0068 |
D13S325 | 19 | , | 21 | 19 | , | 19 | 1.9623 |
D9S925 | 14 | , | 14 | 14 | , | 17 | 3.6684 |
D3S3045 | 9 | , | 13 | 9 | , | 13 | 1.8702 |
D14S608 | 6 | , | 12 | 12 | , | 12 | 4.4209 |
D10S1435 | 11 | , | 13 | 8 | , | 13 | 1.0478 |
D17S1290 | 10 | , | 22 | 10 | , | 16 | 6.0827 |
D5S2500 | 11 | , | 16 | 11 | , | 12 | 0.8432 |
对本案假设父和孩子X染色体上17个STR基因座进行复核扩增,X-STR基因座分型结果数据显出:孩子在17个X-STR基因座中的每个基因座都有一个等位基因与假设父相同。由于X染色体特有的遗传方式: 男性的X染色体只有一条,只能遗传给女儿。所以父女的亲权鉴定用 X-STR 比常染色体 STR 更有效[1] 。故这一案例在39个常染色体基因座基础上增加检测 X-STR 基因座。
1.4鉴定结论
在排除同卵多胞胎、近亲及外源干扰的前提下,支持假设父为孩子的生物学父亲。
2讨论
STR目前在亲子鉴定中被广泛应用。STR的高突变率使得亲生父(母)与孩子之间会出现不符合遗传规律的情况。[2]据李秋阳[3]调查统计,父源性突变率远高于母源性。在实践中,亲子鉴定STR发生突变的现象是普遍存在的,STR 突变是逐步突变的,即每次突变只改变一个重复单位,两个或更多个重复单位的变化是在前一次突变基础上发生的,也就是多步突变是逐步形成的。最终突变都表现为增加或减少一个或几个重复单位。90% 以上的 STR 突变均为增加或减少一个重复单位,即一步突变。二步突变者少于10% ,更多步突变的比例更少[4]。本案例中这对父女出现2个STR基因座突变,且一个是三步突变。查阅文献发现,亲子鉴定中同时存在 2 个STR基因座且有三步以上突变的只有报道过一例[5]。
经询问该男子的妻子失联13年多,男子的直系男性亲属只有一个父亲,因怀疑该孩子是否有可能与男子的直系男性亲属存在亲生血缘关系,经本所鉴定人采该男子的父亲(孩子的爷爷)指尖血备验。 发现20个STR基因座该男子的父亲与孩子有6个基因座不符合孟德尔遗传规律,累积亲权指数CPI小于0.0001,RCP小于0.01%。排除该男子的父亲为孩子的生物学父亲。
本案例采用常规亲子鉴定案件使用的20个STR基因座复核扩增体系进行检测时,发现D12S391基因座违反孟德尔遗传规律,增加检测19个STR基因座的分型,发现D21S1270基因座违反孟德尔遗传规律,检测假设父和孩子X-STR基因座,孩子的每个X-STR基因座上的等位基因都有一个与假设父相同。计算常染色体的CPI和RCP,已超过亲权认定的标准。在日常实践中,如果遇到多步突变的应换一种检测试剂盒验证分型是否正确,遇到可疑的需要检验性染色 STR 来辅助。对于发生于父亲和儿子之间的突变可以用 Y-STR 来验证,而对于某些父亲与女儿或母亲与孩子的鉴定可依靠检测X-STR或二代测序来完成。本案采用检测16个X-STR基因座,可为解决突变案例提供辅助手段。二联体亲子鉴定遇到2-3个STR突变的可以考虑直系亲属做排除验证。在本案中假设父的父亲是假设父唯一的男性直系亲属,经常染色体20个STR基因座检测结果与孩子为排除关系。提高鉴定结果的准确性。
参考文献:
[1] Szibor R. X-chromosomal markers: Past,present and future[J]. Forensic Sci Int( Genet) ,2007,1( 2) : 93-99.
[2] Brinkmann B , Klintschar M , Neuhuber F , et al. Mu-tation rate in human microsatellites : influence of the structure and length of the tandem repeat [J]. Am J Hum Genet , 1998 , 62 ( 6 ): 1408-1415.
[3]李秋阳,丰伟军,杨庆恩,等。常用STR基因座突变的观察与分析[J]。法医学杂志,2005,21(2):86-89
[4] 吕德坚,陆惠玲 . 亲子鉴定 STR 突变的考虑 [J]. 中国司法鉴定, 2009 , 45 ( 4 ): 43-45.
[5]张陈明,陶 胜. 亲子鉴定中 STR 基因座可疑多步突变 2 例 [J]. 法医学杂志,2017,33(4):451-452