C反应蛋白的检测与临床应用进展

C反应蛋白的检测与临床应用进展

陆祝广

广西柳州市中医医院 广西 柳州 545001

C反应蛋白( CRP) 是人体急性时相蛋白( APP) 中最主要、最敏感的标志物之一。在临床上常作为一种检测感染过程和自身免疫疾病的工具, 如病毒与细菌的鉴别诊断、疾病治疗监测、系统性红斑狼疮( SLE) 等。近年来, 随着研究的不断深入和 CRP 检测手段的不断改善, 特别是运用高敏感方法测出的超敏C反应蛋白( hs CRP) 可作为冠状动脉疾病( CVD)的一种独立危险因素, 也可作为心血管疾病和动脉硬化的预测指标^] , CRP已逐渐引起临床的重视。现对 CRP 的生物化学特征、检测方法及临床应用等进行综述如下。

1 CRP 的生物化学特征

1. CRP的发现 CRP是1930年由Tillett和Francis发现的肺炎患者血清中一种与肺炎球菌(现称肺炎链球菌)非特异性的菌体多糖成分C多糖(CPS)发生沉淀反应的物质。 CRP的来源与分布 CRP主要由肝细胞在白细胞介素6、白细胞介素1、肿瘤坏死因子刺激下合成, 炎性反应局部巨噬细胞也可少量产生。正常合成率 1~ 10 mg/ d, 急性炎性反应时每天合成大于1 g。CRP不能通过胎盘, 在体内分布甚广, 除血液外, 胸腔积液、腹水、心包液、关节液中均可测出。

2 常用检测方法

目前, CPR 的检测方法一般分为定性和定量两类。常用的检测方法有免疫扩散法, 乳胶凝集试验, 放射免疫法测定( RIA) 及酶联免疫吸附试验( ELISA) 等。

2. 1 ELISA 法 该检测采用双抗夹心法, 将检测缓冲液和血液样本在检测瓶中进行混合, 荧光标记缓冲液中的抗CRP抗体和血液中的CRP抗原结合形成抗原抗体复合物, 当混合样品被放到检测板的样本上并且通过毛细血管作用扩散到硝化纤维基质的测试带上, 该复合物被测试带上的抗CRP抗体所捕获, 荧光抗体的信号强度反映了被捕获的CRP数量, 经过免疫荧光分析仪的检测, 能够反映出血中CRP的浓度。ELISA法的灵敏度可以达到0. 007 mg / L( hs CRP) 。

2. 2 免疫散射比浊法 其原理是包被抗CLIP单克隆抗体的胶乳颗粒与血清中CRP起凝集反应, 引起光散射强度改变, 通过散射比浊法测定散射光强度取决于CRP含量, 根据标准液浓度计算出血清中CRP含量。该方法的灵敏度在3 mg / L以上。

2. 3 乳胶增强免疫散射法 本法是利用抗原抗体反应原理测定血清中CRP的含量。样品中 CRP抗原的与包被的胶乳颗粒上的抗人CRP抗体形成免疫复合物, 产生的浊度与样品中的 CRP含量呈正比, 用比浊法进行测定, 从而求得样品中的CRP的含量。其方法的灵敏度可达到0. 15 mg/ L。

3 CRP 的临床应用

CRP 与炎性反应 急性炎性反应时 CRP 每天合成1 g,在感染发生后6~ 8 h开始升高, 24~ 48 h达到高峰, 比正常值高几百倍甚至上千倍, 升高的幅度与感染的程度呈正相关, 在疾病治愈后, 其含量急速下降, 1 周内可恢复正常。病毒感染时CRP不增高( 除了一些严重侵袭导致组织损伤的病毒, 如腺病毒、疱疹病毒) ; 外科损伤患者血中 CRP 水平 8~ 10 h 可增加 10倍; 一般新生儿血清CRP< 2 mg / L, 大于此值即与细菌感染的严重程度有关, 儿童和成人小于或等于 10 mg/ L, 10~99 mg/ L 提示局灶性或浅表性感染, 大于或等于100 mg/ L提示败血症或侵袭性感染等。临床上CRP一般作为鉴别细菌或病毒感染的首选指标, 用于自身免疫性及感染性疾病的诊断与监测, 以及抗生素疗效观察等。

4 hs CRP的临床应用

CRP与心血管事件的关系运用乳胶凝集比浊法或速率散射比浊法等敏感方法测出的较低浓度的血清CRP称为hs CRP。hs CRP已是公认的预测未来心血管事件(急性冠状动脉综合征、心肌梗死、卒中等) 发生危险性的有效指标。

实验室和临床数据已证实, 动脉粥样硬化并不是一种简单的脂质沉积疾病。炎性反应在动脉粥样硬化的起始和进展过程中也扮演着一个关键性的角色。在动脉壁的粥样硬化中主 要有单核细胞、T淋巴细胞的大量浸润。在斑块的表面即斑块最脆弱的位置, 炎性反应细胞大量渗入, 使斑块不稳定而爆裂。此过程中的细胞因子引起肝脏合成CRP增加。CRP在动脉粥样硬化的形成和发展中有以下几个方面的作用: (1) 调节巨噬细胞摄入低密度脂蛋白胆固醇有助于泡沫细胞的形成; (2) 刺激巨噬细胞产生血栓前组织因子; ( 3)激活粥样斑块内的补体系统, 导致斑块不稳定, 增强不稳定斑块的血管活性; ( 4) 诱导粘连分子表达; ( 5) 致敏内皮细胞, 产生CD4+ T细胞介导的细胞毒作用造成损坏, CRP 水平升高与内皮细胞功能衰竭和动脉粥样硬化的进程相关。

压、空腹血糖、糖化血红蛋白等同时测定, 其在各相关疾病中的应用价值将大大提高。

CRP可以作为冠心病的一个危险因子, 判断冠心病患者的预后。在排除引起CRP增高的其他因素, 如各种急慢性炎 症、免疫性疾病等, CRP 测定在冠心病尤其是急性冠状动脉综 合征的早期诊断和预后判断上具有重要意义, 是一个具有新意和前途的指标, 值得临床推广使用。

参考文献

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