药物检验分析中应用超高效液相色谱法的研究

药物检验分析中应用超高效液相色谱法的研究

张朋翠 1 李述溪 2

1.青岛黄海制药有限责任公司 山东青岛 266000

2.浙江普利药业有限公司 浙江杭州 310000

摘要：本文主要目的就是对超高效液相色谱法（UPLC，Ultra Performance Liquid Chromatography）在药物检验中的应用效果进行分析。采用的方法就是，选择利福平、吡嗪酰胺与异烟肼样品，以高效液相色谱法（HPLC，High Performance Liquid Chromatography）方法为对照组，以UPLC为研究组，对比相应检验的方法。发现，相比于HPLC方法的分析时间，UPLC方法的分析时间更短，而检验结果的差异具有统计学意义。最终确定，借助UPLC方法能够充分提高检验效率。

关键词：药物检验；UPLC；研究分析

前言：UPLC主要是基于HPLC发展而来的技术。检测效率非常突出，并增加了色谱峰容量、灵敏度以及分析通量等优势，同时在液相实验中得到广泛应用。基于社会快速发展以及民众生活水平提升过程中，民众在药物、食品质量等方面要求不断提升，相关分离解析技术得到快速更新与发展。UPLC能够快速检测样品中各种组分，便捷地处理样品，进行自动化检测，具有广泛应用范围，可以快速分离，为药品监测以及食品质量安全等方面提供良好检测方法^[1]。

1 方法与资料

1.1资料

样品选择常州制药公司生产的利福平、成都锦华公司生产的吡嗪酰胺、沈阳红旗公司生产的异烟肼，结合相关检验方法设计研究组与对照组，同时比较两组资料，P＞0.05差异没有统计学意义。

1.2方法

对照组选择HPLC方法开展检测工作，具体操作如下：选择10g利福平、10g吡嗪酰胺、10g异烟肼，将样品磨成粉末，将适量粉末装入500ml量瓶中，在溶解、稀释以及过滤等操作之后，在200—400mm紫外波长条件进行扫描（在210mm波长进行测定，选择Waters Sunfire C18色谱柱，规格为：5um，250×4.6mm；以乙腈-0.075mol/L磷酸二氢钾溶液（5:5）为流动相，取样品溶液（20ul），注入HPLC中，并记录色谱图^[2]。

研究组选择UPLC方法开展检测工作，具体操作如下：选择10g利福平、10g吡嗪酰胺、10g异烟肼，将样品磨成粉末，将适量粉末装入500ml量瓶中，溶解、稀释以及过滤等操作之后，在200—400mm紫外波长条件进行扫描（在210mm波长进行测定，选择Waters BEH C18色谱柱，规格为：1.7um，2.1×50mm；以乙腈-0.075mol/L磷酸二氢钾溶液（5:5）为流动相，取样品溶液（20ul），注入HPLC中，并记录色谱图。

最后，借助SPSS22.0软件处理本研究数据，选择x2开展检验作业，计量资料选择（ ）进行表示，选择t进行检验，如果低于0.05，那么表明数据差异具有统计学意义。

2 结果与讨论

2.1结果

全面记录以及分析研究组和对照组的色谱图，在柱温为30℃情况下，HPLC方法的进样时间都是25min，UPLC方法进样时间都是2min。在柱温为60℃条件下，HPLC方法的进样时间都是24min，UPLC方法的进样时间是1min。HPLC方法和UPLC方法之间具有明显差异。具体见下表-1。

表1 HPLC与UPLC技术药检结果分析

另外，使用UPLC方法能够将研究对象达到100%的分离效果，而HPLC方法仅能够达到80%的分离，所以UPLC方法与HPLC方法比优势显著。

2.2讨论

（1）UPLC技术发展。在现代色谱法中，液相色谱技术具有广泛应用，在食品、药品、农业以及环境等领域中均具有良好适用性。在科技进步和工业发展背景下，相关行业在液相色谱法方面也具有较高要求，需要快速分析大批量样品，同时部分天然产物与生化样品等分析工作中对于液相色谱的要求也不断提升。基于此种情况，衍生出UPLC技术具有一定优势。UPLC技术属于新型HPLC技术，在该技术不断广泛应用过程中，充分强化液相色谱法分离能力，促使色谱技术得到进一步发展。由于UPLC可以进行自动化检测以及快速吸收样品组分等特点，所以在药剂、微量药物等检验工作中也具有广泛应用。UPLC技术主要原理就是选择超高压与亚2um小颗粒填料技术，促使色谱柱柱效、分离检测灵敏度得到有效强化，充分缩短分析时间

^[3]。

（2）药物检验中UPLC技术应用分析。开展药物杂质检验工作时，样品杂质含量可能较小或个数比较多，开展工作时比较难以检出或者难以分离，需要花费大量时间才能够完成检验工作。需要研发一种分离效率高以及分析速度快的技术。UPLC技术能够保证相关要求得到充分满足，具有精度高以及灵敏度高等特点，所以近年来在药物检验方面的应用较为广泛。由于UPLC技术具有自动化水平高、检测快速、重复性突出以及分辨率高等优势，对药品含量及杂质进行检测过程中，选择UPLC技术对样品进行抽检，可以充分检测出假劣药品，为药品安全提供良好保证。同时分析常规药物时，UPLC的的检验结果能够满足美国食品与药品管理局（FDA）的准确度标准与精密度标准。基于相关临床研究结果显示，相比于HPLC技术，UPLC技术的分离能力更加突出，促使药物检验中的分离度以及速度慢（运行时间长）得到充分解决。选择UPLC技术可以基于较快的流速、线速度以及反压条件实现高效分离，同时可以保证最终结果真实性。UPLC技术在成品药、中间体以及原料药等杂质、含量检测工作均具有良好适用性，可靠、准确、快速。当前，《中国药典》开始逐渐应用UPLC技术开展相关项目检测工作，所以UPLC技术未来具有广阔发展空间，可能会逐渐成为主流检测技术。

结语：总而言之，UPLC技术属于一种应用广泛、常用药物检验方法，相比于常规HPLC检验方法，UPLC技术的检验速度以及灵敏度等性能更加突出，同时在高速、高压条件下也具有良好适用性，可以有效开展药物检验工作。UPLC技术在药物检验高效率要求方面具有良好适应性，可以用于药物检验工作中。

参考文献：

[1]张宇,包小兵,王冬梅,王书舟,李俊玲,张伟.超高效液相色谱串联质谱法同时测定小麦及其制品中玉米赤霉烯酮和伏马毒素的方法优化[J].河南预防医学杂志,2021,32(08):612-615.

[2]侯玉格,宋彦廷,高宇航. QuEChERS结合高效液相色谱法测定中药口服液中的拟除虫菊酯农药的含量[A]. 中国化学会.中国化学会第二十届全国有机分析及生物分析学术研讨会论文摘要集[C].中国化学会:中国化学会,2019:1.

[3]吴远波,吴克勤,刘宇政,王伟,吴靓,张鸿.高效液相色谱法同时测定和肝利胆颗粒中3种黄酮类成分含量[J].中国药业,2021,30(15):71-73.