分析硬化性胆管炎(SC)应用免疫组化,特染套染技术进行病理诊断的临床价

分析硬化性胆管炎 (SC)应用免疫组化 ,特染套染技术进行病理诊断的临床价

吉莉莉

大庆油田总医院 黑龙江 大庆 163000

【摘要】目的 探讨硬化性胆管炎（SC）采用免疫组化，特染套染技术实施病理诊断的效果。方法 随机抽选本院接收的64例硬化性胆管炎患者，采集所有患者组织标本，并展开免疫组化及特染套染技术，分析结果。结果 免疫组化联合Masson染色套染阳性率是98.44%，与单一的免疫组化（81.25%）及单一的Masson染色（82.81%）比较更高，差异明显（P<0.05）。结论 免疫组化与特染套染技术在硬化性胆管炎诊断中应用效果明显，其能够更好的观察病变组织胆管和周围纤维化。

【关键词】免疫组化；特染套染技术；硬化性胆囊炎

[Abstract] Objective To investigate the effect of immunohistochemical, special staining and nested staining in the pathological diagnosis of sclerosing cholangitis (SC). Methods 64 patients with sclerosing cholangitis received in our hospital were randomly selected. The tissue samples of all patients were collected, and the immunohistochemical and special staining techniques were carried out to analyze the results. Results the positive rate of immunohistochemistry combined with Masson staining was 98.44%, which was higher than that of single immunohistochemistry (81.25%) and single Masson staining (82.81%) (P < 0.05). Conclusion immunohistochemistry and special staining are effective in the diagnosis of sclerosing cholangitis, which can better observe the fibrosis of bile duct and surrounding tissues.

[Key words] immunohistochemistry; Special dyeing technology; Sclerosing cholecystitis

肝脏穿刺法是肝脏病理检测方法中常用的一种，肝脏组织病理已经不再只是诊断方法，同时也是现阶段具有重要作用的一种检测技术，主要用于疾病诊断、预后及治疗效果评估【1】。CK7又被称为“胆管型细胞角蛋白”，其能够表达胆管上皮细胞，但是并不在肝细胞上表达。Masson染色能够将胶原纤维染色显示出来，从而更好的判断疾病【2】。

1 资料与方法

1.1 资料

本次研究64例硬化性胆管炎患者均为本院2019年5月-2020年5月接收，其中有34例男，30例女；最小年龄21岁，最大年龄70岁，均值（51.64±2.13）岁。

1.2 方法

组织标本采集，固定应用10%中性福尔马林，对组织展开石蜡包埋及脱水等处理，切片厚度控制在4μm，然后进行免疫组化，特染套染技术。免疫组化：实施常规脱蜡，采用EDTA8.0进行修复，于室温环境下，利用3%双氧水进行10分钟孵育，主要是为了阻断内源性过氧化物酶活性，利用PBS洗涤，并添加第一抗体，但是表面无液体，通过抗体覆盖组织面，使其与组织全面接触。通过PBS洗涤鼠抗人单克隆抗体，添加抗体增强剂，在37℃环境中，利用黄色液体孵育，一般孵育15-20分钟，而后利用PBS洗涤，并添加辣根酶方法，标记羊抗小鼠/兔IgG，聚合物，与此同时，于37℃环境下在红色液体中进行15-20分钟的孵育。在DAB显色后实施复染，结合苏木素，脱水过程中，结合酒精，二甲苯具有透明功效，然后采用中性树胶封固。Massonranse 染色：常规脱蜡切片并脱水，利用铁苏木素进行5-10分钟染色，采用流水洗涤，同时结合1%盐酸酒精实施洗涤，利用丽春红酸性品红染液实施染色，时间3-5分钟，然后利用流水清晰，之后的处理采用磷钼酸溶液，将载玻片上溶液倒掉后，通过结合苯胺蓝染液进行复染，倒掉后，利用1%冰醋酸水溶液对切片洗涤，一直到没有蓝色，采用95%酒精进行洗涤，结合无水酒精脱水，应用中性树胶实施封固【3】。套染技术：免疫组化后，利用水洗涤，大约10分钟，省去苏木素染色，直接进行Masson染色，采用95%酒精洗涤，应用无水酒精脱水，最后应用中性树胶封固。

1.3 观察指标

准确记录单一免疫组化、单一Masson及套染方法诊断阳性率。免疫组化阳性标准：根据组织学原则，细胞浆表现黄色为CK7阳性；Masson阳性标准：细胞核呈现蓝黑色、胶原纤维呈现蓝色、红细胞及肌纤维呈现红色。

1.4 统计学方法

本次研究数据的处理均应用统计学软件SPSS20.0，计数资料率（%）表示， x²检验；差异显著（P<0.05）。

2 结果

免疫组化联合Masson染色套染阳性率是98.44%，与单一的免疫组化（81.25%）及单一的Masson染色（82.81%）比较更高，差异明显（P<0.05），见表1。

表1 不同诊断方法阳性率对比[n(%)]

3 讨论

硬化性胆管炎是当前发生率较高的一种疾病，临床特征以闭塞性纤维及慢性胆管炎为主，随着疾病的发生，导致胆管狭窄，胆管受损，最终引起胆汁性肝硬化【4】。根据病情变化分为两种，分别是继发性与原发性，临床上主要根据肝功能慢性胆汁淤积指标ALP对原发性硬化性胆管炎进行判断，自身抗体，尤其是ANCA阳性，同时合并胆道造影，结果表现为肝内外胆管扩张与狭窄相间而表现为串珠样变化，累及肝外胆管及肝内胆管【5】。临床上，主要利用Masson染色及CK7染色对病变组织进行观察。CK7属于胆管型细胞角蛋白，其表达在胆管上皮细胞，而且能够仔细观察界面小胆管及小叶间胆管管腔等。现阶段，Masson染色是诊断肝脏纤维化的金标准。以上两种方法操作简单，可以在短时间内完成诊断。

总而言之，免疫组化与特染套染技术在硬化性胆管炎诊断中应用效果明显，其能够更好的观察病变组织胆管和周围纤维化，以便更好的诊断和治疗，值得临床采纳、推广。

参考文献： 
　　[1]张淦梅.肿瘤病理诊断中特殊染色联合免疫组化技术的应用效果及检测阳性率评价[J].临床检验杂志（电子版），2019，8（04）：262-263. 
　　[2]宋中岳.特殊染色联合免疫组化技术在肿瘤病理诊断中的效果及价值分析[J].临床医药文献电子杂志，2018，5（94）：152. 
　　[3]伍树强.免疫组化技术和常规技术在肿瘤病理诊断中的效果对比观察[J].全科口腔医学电子杂志，2018，5（23）：111-112. 
　　[4]王凯，杨爽，冯珊珊.肿瘤病理诊断中特殊染色联合免疫组化技术的价值分析[J].现代医学与健康研究电子杂志，2018，2（12）：20. 
　　[5]陈惠芹.特殊染色、免疫组化技术结合用于肿瘤病理诊断中的价值[J].中国医药指南，2017，15（34）：75-76.