中药薄层色谱鉴别检验中的影响因素及对策研究

中药薄层色谱鉴别检验中的影响因素及对策研究

王润璇

广州白云山中一药业有限公司，广东广州510530

摘要：本文主要研究重点为中药薄层色谱鉴别检验工作，结合既往工作经验，对检验影响因素展开讨论，并提出相应的解决对策，确保检验工作高质量开展。本文研究结果表明，在该检验方法中，涉及影响因素相对较多，应切实加强针对

性对策，做好检验管理工作，进而确保检验结果的可靠性。

关键词：中药薄层色谱鉴别；鉴别检验；影响因素

引言：随着薄层板点样技术、展开技术方面的快速发展，仪器设备精密度的提高，薄层色谱检验技术在中药检验中得到了广泛应用[1]。由于存在灵敏度高、鉴别专属性强的优势，薄层色谱鉴别在《中国药典》中的应用比例逐步增高。但是该技术的应用易受到相关影响因素干扰，存在检验结果重复性和稳定性不高的情况。因此，加强对检验影响因素控制工作，可更好缩短检验周期，降低检验成本[2]。

1.检验影响因素和解决对策

1.1 点样技术

    点样过程中，当点样量过小，则易造成斑点不清晰，影响结果判断；点样量过大时，易造成拖尾现象，影响分离度。此时可采用更换点状或带状点样方式，调节合适点样量[3] [4]。若存在原点残存溶剂残留，也会对展开剂的选择性产生影响，故点样后应根据供试品成分的热稳定性对其选择合适的干燥方式：吹风机冷风吹干，避免高温加热，防止热不稳定成分被破坏或样品变成固态后，促成硅胶的活性表面固态化学反应[3]。

1.2 展开剂

展开剂的比例、用量、溶剂蒸汽都对薄层色谱的展开效果有着较大影响。展开过程，配制展开剂应严格控制比例的准确度；放置展开剂的用量，在展开缸中深度应距原点 5 mm 为宜，切勿将原点浸没，避免成分被展开剂溶解而不随展开剂在板上分离[4]。溶剂蒸汽处理不到位可能会造成影响斑点分离度、产生第二前沿、边缘效应等影响薄层色谱质量的现象[5]。操作人员可根据具体的薄层色谱效果选择合适的饱和方式,如调整往展开缸中放置展开剂和薄层板的顺序；在展开缸中贴上与展开缸高、宽同样大小的滤纸辅助饱和[3]；根据展开效果调整预饱和时间 [4]；在分离生物碱时，置于氨蒸气饱和的展开环境中展开[6]等。

1.3 湿度

在其他条件相同的情况下， 实验环境的相对湿度对薄层板的活性有直接影响，对色谱质量影响明显。薄层板常常需要在105~110℃活化，使水合硅醇基变为游离硅醇基[3]。大多数成分对相对湿度有较宽适应性，但有部分样品在不同湿度环境中，分离效果有较明显变化[4]。控制相对湿度的方法有：加装空气加湿器或者除湿器；转移到加入五氧化二磷或者硫酸的干燥器；在展开缸中放入变色硅胶；选择自动展开设备[5]。

1.4 温度 

   在相对湿度恒定的条件下，一般斑点的RF值随温度呈现增长趋势。而温度主要与有机溶剂蒸发密切相关，且在蒸气比例受到影响的情况下，展开剂比例也会出现变化。因此，为有效降低温度作用影响，应以展开温度控制作为重点，在试验过程中，该部分操作可放置在密封控温装置中。

1.5样品处理

    中药在成分方面往往具有较高的复杂性，并且在成分不同的情况下，存在的干扰情况也同样较为严重，这将会导致分离效果受到负面影响。因此，在样品处理工作中，应注意使用合理方法，减少实验误差干扰。如在液-液萃取法中遇到乳化现象，可采取长时间静置分离、水平旋转摇动或电吹风加热加速分层、高速离心使分层等[3]。

1.6人为操作问题

    结合鉴别工作的开展，操作人员的处理水平同样会对鉴别结果造成负面影响。特别是在操作人员操作不规范的情况下，没有做好对操作方法的控制，将会导致最终检验质量下降。同时，由于操作人员经验不足，同样无法确保操作的准确性，导致斑点无法进行准确的显示。因此，应加强操作人员培训工作，以多方面着手，加大对检验流程的梳理力度，提高各项操作规范性。

2.检验管理措施

    结合上文可知，无论是温度、湿度，还是点样操作技术、展开环境、薄层板质量均会对检验质量产生一定的影响。因此，要求在采取该技术完成检验工作的过程中，应以药品具体情况展开思考，在明确检验要求的基础上，合理选择提取方法，并做好展开剂配制工作，提升检验准确性。同时，针对残留溶剂，应在有效避免高温的基础上，加强干燥去除处理，以免出现拖尾情况。经过展开处理后，样品多需要使用显色剂，完成显色处理，建立在喷雾显色基础上，确保气雾的均匀度。同时，如果采取碘显色，并注意对容器进行保持密闭状态，并注意做好对熏蒸时间的控制，经处理后，在显色适宜的情况下，可将其进行取出。结合实际检验，要求应选择具有丰富经验的工作人员，完成检验工作，加强对检验流程的有效管理，确保检验准确性[7]。

结论：在中药鉴别中，可积极引进薄层色谱鉴别技术、设备，进而获取到更加准确的检验结果。结合实际操作，薄层色谱技术受到包括温度以及湿度在内的诸多影响因素限制，不可避免影响到最终检验效果，因此，应借助专业手段，并进一步总结经验，判断实际检验中存在的负面因素，加强针对性处理，做好检验流程规范工作，进而提高检验质量。

参考文献：

[1]向金莲,王 伟,任飞宇.薄层色谱技术在中药检验中的应用[J].中国医药指南，2018,16(11):237-238.

[2]邓 哲,荆文光,刘 安.薄层色谱法在当前中药质量标准中的应用探讨[J].中国实验方剂学杂志,2019,25(7):201-206.

[3]王秀芹,林 彤,江英桥.薄层色谱法标准化操作要点及实例分析[J].中成药,2018,40 (7):1655-1659.

[4]颜晓航.薄层色谱法操作技术控制要点分析[J].安徽医药,2012,16(9):1271-1272.

[5]刘冰,刘松雁,高庆辉,张蕾,谢亮,吕洁.浅议薄层色谱及中药成方制剂的方法建立[J].今日畜牧兽医,2021,37(03):1+8.

[6]李 杨,姜慧莹,陈嘉兴,杨 爽,黄 帅.薄层色谱法的操作要点及影响因素[J].北方药学,2020,17(6):1-2.

[7]刘爱香.中药及中成药薄层色谱鉴别检验中的问题分析[J].光明中医，2020,33（22）:3437-3439.