低温蒸汽甲醛灭菌应用于管腔器械灭菌效果的验证

低温蒸汽甲醛灭菌应用于管腔器械灭菌效果的验证

赵怀华1侯纪民2王均胜3

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摘要  目的  寻找一种验证低温蒸汽甲醛灭菌管腔器械灭菌效果的方法。方法  将5套低温蒸汽甲醛灭菌化学验证装置（内含化学指示卡）、5套低温蒸汽甲醛生物验证装置（内含生物指示剂）、5套不锈钢管模拟代替物（内含染菌不锈钢针）、5套聚四氟乙烯管模拟代替物（内含染菌不锈钢针）、5套腹腔镜器械同时放入甲醛灭菌器中进行检测，程序运行结束后取出验证装置，观察装置内化学指示卡变色情况，将生物指示剂和模拟代替物中的不锈钢针放入含10mL溴甲酚紫蛋白胨液体培养基的试管中，56℃培养48h，并将腹腔镜器械进行采样之后使用琼脂糖的培养方法进行培养，将结果进行对比分析。结果  通过对比分析低温蒸汽甲醛灭菌化学验证装置和生物验证装置内的指示物大于模拟替代物和腹腔镜器械的灭菌难度，即低温蒸汽甲醛灭菌化学验证装置和生物验证装置灭菌合格时，则模拟替代物和腹腔镜器械一定合格。结论  甲醛灭菌器灭菌管腔器械时，可使用低温蒸汽甲醛灭菌化学验证装置或低温蒸汽甲醛灭菌生物验证装置验证管腔器械的灭菌效果。

关键词：低温蒸汽甲醛灭菌；化学验证装置；生物验证装置；验证

随着医疗技术的不断进步，内镜技术由于其创伤小的优点，应用范围不断扩大，但其不耐高温材质，仅能使用低温灭菌技术。低温蒸汽甲醛灭菌能力强于过氧化氢，其灭菌时间少于环氧乙烷灭菌，其具有高穿透性优点非常适合管腔器械灭菌，目前仅能监测器械表面灭菌效果，管腔内的灭菌效果难以监测，故低温蒸汽甲醛灭菌过程无法得到有效的验证使医疗器械存在二次感染的风险。本研究通过化学验证装置、生物验证装置模拟管腔器械，对低温蒸汽甲醛灭菌过程进行灭菌效果监测，寻找一种验证管腔器械灭菌效果的方法。

1材料和方法

1.1材料

新华牌低温蒸汽甲醛灭菌过程化学验证装置、新华牌低温蒸汽甲醛灭菌过程生物验证装置、甲醛抗力仪、甲醛灭菌器专用甲醛灭菌剂、腹腔镜器械、不锈钢管（直径2mm、长度1500mm）、聚四氟乙烯管（直径1mm、长度1500mm）、染菌载体（不锈钢针，嗜热脂肪杆菌（ATCC 7953）芽孢，直径0.4mm、长度30mm）、纸塑包装袋、溴甲酚紫蛋白胨液体培养基。

1.2具体操作方法

1.2.1．灭菌程序测试分组及条件：

第1组测试温度60℃，脉动次数8次，灭菌时间15min，甲醛浓度0%；

第2组测试温度60℃，脉动次数4次，灭菌时间8min，甲醛浓度2%；

第3组测试温度60℃，脉动次数8次，灭菌时间15min，甲醛浓度2%。

1.2.2．制备染菌载体：将不锈钢针固定于无菌物表上，用适宜浓度的嗜热脂肪芽孢杆菌悬液均匀滴染于钢针表面，置于56℃培养箱中干燥30min备用。进行灭菌使用前，要取2支不锈钢针进行菌量回收。

1.2.3．启动甲醛抗力仪，使检测器预热至指定温度，设定灭菌参数后，启动测试程序。空载试运行2次。

1.2.4．检测时，每组试验各取5套新华牌低温蒸汽甲醛灭菌过程化学验证装置（内含化学指示卡）、5套新华牌低温蒸汽甲醛灭菌过程生物验证装置（内含生物指示剂）、5套不锈钢管模拟代替物（内含染菌不锈钢针）、5套聚四氟乙烯管模拟代替物（内含染菌不锈钢针）、5套腹腔镜器械同时放入抗力检测器柜室中进行检测，程序运行结束后取出验证装置，观察装置内化学指示卡变色情况，将生物指示剂和模拟代替物中的不锈钢针放入含10mL溴甲酚紫蛋白胨液体培养基的试管中，56℃培养48h，并将腹腔镜器械进行采样之后对细菌进行培养，使用琼脂糖的培养方法，将结果进行对比分析。

1.3结果判定

灭菌处理以后所得的化学指示卡由红色变为灰绿色，即颜色达到标准色则将其判断为合格。对于生物指示剂、染菌载体和腔镜采样，灭菌以后严格按照规程要求进行培养，颜色从紫色转变成黄色则被定义为阳性，紫色不发生改变则即阴性，即合格。

2结果

2.1．第1组（测试温度60℃、脉动次数8次、灭菌时间15min、甲醛浓度0%）

2.2.1．验证装置内化学指示卡的指示色块颜色无明显变化、仍为红色；

2.2.2．验证装置内生物指示剂经培养全部为阳性、有嗜热脂肪芽孢杆菌生长；

2.2.3．聚四氟乙烯管中的染菌载体经培养全部为阳性、有嗜热脂肪芽孢杆菌生长；

2.2.4．不锈钢管中的染菌载体经培养全部为阳性、有嗜热脂肪芽孢杆菌生长；

2.2.5．腹腔镜器械经采样培养全部为阳性、有嗜热脂肪芽孢杆菌生长；

2.2．第2组（测试温度60℃、脉动次数4次、灭菌时间8min、甲醛浓度2%）

2.2.1．验证装置内化学指示卡的指示色块全部由红色变为灰绿色、变色程度未达到标准色；

2.2.2．验证装置内生物指示剂经培养全部为阳性、有嗜热脂肪芽孢杆菌生长；

2.2.3．聚四氟乙烯管中的染菌载体经培养8支为阴性、无嗜热脂肪芽孢杆菌生长，7支为阳性、有嗜热脂肪芽孢杆菌生长；

2.2.4．不锈钢管中的染菌载体经培养5支为阴性、无嗜热脂肪芽孢杆菌生长，10支为阳性、有嗜热脂肪芽孢杆菌生长；

2.2.5．腹腔镜器械经采样培养3支阴性、无嗜热脂肪芽孢杆菌生长，12支为阳性、有嗜热脂肪芽孢杆菌生长；

2.3．第3组（测试温度60℃、脉动次数8次、灭菌时间15min、甲醛浓度2%）

2.3.1．验证装置内化学指示卡的指示色块全部由红色变为绿色、变色程度与标准色一致；

2.3.2．验证装置内生物指示剂经培养全部为阴性、无嗜热脂肪芽孢杆菌生长；

2.3.3．聚四氟乙烯管中的染菌载体经培养全部为阴性、无嗜热脂肪芽孢杆菌生长；

2.3.4．不锈钢管中的染菌载体经培养全部为阴性、无嗜热脂肪芽孢杆菌生长；

2.3.5．纸塑袋中的染菌载体经培养全部为阴性、无嗜热脂肪芽孢杆菌生长。

附表对比试验测定结果

3讨论

第一组与第三组对比表明：低温蒸汽甲醛灭菌具有很好的杀灭效果，并且穿透管腔器械能力强。第二组结果表明：化学验证装置与模拟替代物及腹腔镜器械在甲醛灭菌过程中，化学验证装置内的化学指示物变色不完全，大于模拟替代物及腹腔镜器械内染菌载体的阳性个数，化学验证装置相较于模拟替代物及腹腔镜器械有更高的灭菌难度；且生物验证装置与标准测试包在甲醛灭菌过程中，生物验证装置内的生物指示剂全部阳性，大于模拟替代物及腹腔镜器械内染菌载体的阳性个数，生物验证装置相较于模拟替代物及腹腔镜器械有更高的灭菌难度，即当化学验证装置内化学指示卡变色合格（或生物验证装置内生物指示剂全部阴性）时，管腔器械内外均灭菌合格，可通过化学验证装置和生物验证装置验证低温蒸汽甲醛灭菌管腔器械的灭菌效果。

结束语：

目前规范仅能监测甲醛灭菌器械表面灭菌效果，管腔内的灭菌效果难以监测，本研究通过化学验证装置、生物验证装置模拟管腔器械，对低温蒸汽甲醛灭菌过程进行灭菌效果监测，寻找了一种验证管腔器械灭菌效果的方法，对低温蒸汽甲醛灭菌推广应用具有重要的研究意义。

参考文献：

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[2]赵怀华, 王文波, 韩宝福. 一种低温蒸汽甲醛灭菌过程验证装置

[3]陈越英, 孙巍, 陈文森,等. 低温蒸汽甲醛灭菌器灭菌效果鉴定方法研究[J]. 中国消毒学杂志, 2013(9):3.

[4]崔树玉, 田忠梅. 低温蒸汽甲醛灭菌技术及其发展[J]. 中国消毒学杂志, 2015(2):3.