STK11基因在宫颈癌细胞中的表达研究

STK11基因在宫颈癌细胞中的表达研究

王轶婷

黑龙江省医院  150036

【摘要】目的 分析在宫颈癌组织细胞中STK11基因的表达情况。方法 研究对象为30例宫颈癌患者，另选取30例正常宫颈患者，内参基因选取GAPDH，所有患者均接受RT-PCR技术检测，分析STK11基因在组织中的表达情况，讨论STK11基因与宫颈癌发生发展的关系，研究起止时间为2021年1月-2023年5月。结果 正常宫颈组较宫颈癌组的STK11基因表达量相比，存在明显差异（P<0.05）；两组经对比，在STK11QX、STK11HY、STK11总的位点中，甲基化率经对比，差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 在宫颈癌的发生过程中，STK11基因参与其中，与起到子甲基化有关。

【关键词】STK11基因；宫颈癌；基因表达

【 Abstract 】 Objective To analyze the expression of STK11 gene in cervical cancer cells. Methods Thirty patients with cervical cancer and another 30 normal patients with cervical cancer were selected. The internal reference gene was GAPDH. All patients were tested by RT-PCR to analyze the expression of STK11 gene in tissues and discuss the relationship between STK11 gene and the occurrence and development of cervical cancer. The study will start and end from January 2021 to May 2023. Results There was significant difference in STK11 gene expression between normal cervical group and cervical cancer group (P<0.05). The methylation rates of STK11QX, STK11HY and STK11 sites were compared between the two groups, and the differences were statistically significant (P < 0.05). Conclusion STK11 gene is involved in the pathogenesis of cervical cancer and is related to methylation.

【 Key words 】STK11 gene; Cervical cancer; Gene expression

宫颈癌是继乳腺癌后最常见的妇科恶性肿瘤，死亡率位居妇女恶性肿瘤首位。高危型人乳头瘤病毒（human papilloma virus，HPV）是导致宫颈癌的关键致病因子，其发病原因与发生过程被多种因子综合影响。研究显示，基因启动子甲基化的研究，在恶性肿瘤生物学领域研究与发展中发挥着关键作用，可用于判断患者预后的预测指标，认为与宫颈癌的发生关系密切【1】。STK11基因是肾母细胞瘤蛋白，定位于染色体11p13，属于重要的转录调节分子，通过对靶基因的表达起到抑制与激活，能够产生不同的生物学作用，比如可调控细胞的增殖、生长、分化、凋亡等，具有抑癌与致癌的双重效果。研究指出，STK11作为高度保守的转录因子，在泌尿生殖系统的生长与发育起着重要影响，并且与多种肿瘤疾病的发生发展密切相关【2】。故本次研究深入探讨了STK11基因在宫颈癌组织细胞中的表达情况，以期为宫颈癌的早期诊断与疾病治疗提供参考，现做如下报告：

1 资料和方法

1.1一般资料

所获患者宫颈组织标本均获患者知情同意且签署知情同意书,患者至少取样前半年未使用其他药物,排除其他妇科肿瘤及生殖道炎症

宫颈癌组织标本30例，为门诊就诊活检后确诊为宫颈癌的患者的癌组织或已确诊宫颈癌患者手术治疗时术中切除病理切取得宫颈癌组织,另选取30例正常宫颈组织，为门诊就诊患者行宫颈常规检查时取得健康宫颈组织伴或不伴有慢性宫颈炎症。:研究起止时间为2021年1月-2023年5月。30例宫颈癌患者年龄36-67岁，均值（52.47±3.81）岁；病程0.5—2年，均值（1.19±0.28）年；其中Ⅰa期19例，Ⅰb期8例，Ⅱa期3例；30例正常宫颈组织患者年龄42-68岁，均值（53.36±3.44）岁。一般资料对比无统计学意义（

P>0.05）。1.2 方法

所有患者均接受RT-PCR技术检测。提前准备检测仪器与试剂，包括RNAiso Plus提取试剂、ReverTra Ace-α-反转录试剂盒、10×定量PCR buffer、dNTPs、Taq酶、移液器、EP管、荧光PRC仪。查找组织STK11基因、CAPDH的mRNA，设计特异性引物针。为了降低外源RNase导致的RNA降解问题，所有材料应经过0.1%DEPC溶液的处理，并过夜，经高压灭菌30分钟后使用。按照说明书提取RNA，经过处理后，进行逆转录反应体系配制，准备好反应液进行逆转录，并选取4μlcDNA，进行PCR反应扩增，剩余低温保存，配置PCR反应体系，进行荧光定量PCR反应。

1.3 指标观察

1.3.1STK11基因表达情况

统计正常宫颈组、宫颈癌组的STK11基因表达情况，并进行组间对比。

1.3.2 宫颈组织STK11基因甲基化情况

统计与对比在STK11QX、STK11HY、STK11总的位点中，正常宫颈组、宫颈癌组的甲基化情况。

1.4 统计学分析

SPSS 25.0版本软件处理数据，变量资料以“t”计算，定性数据用x2核实，分别以（±s）与（%）表示，P＜0.05为统计学意义。

2 结果

2.1 STK11基因表达情况对比

    正常宫颈组较宫颈癌组的STK11基因表达量相比，存在明显差异（P<0.05）；见表1。

表1两组STK11基因表达情况对比（±s）

2.2 宫颈组织STK11基因甲基化情况对比

两组经对比，在STK11QX、STK11HY、STK11总的位点中，甲基化率经对比，差异均有统计学意义（P＜0.05）。详见表2：

表2 宫颈组织STK11基因甲基化情况对比（n，%）

3 讨论

宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，主要起源于宫颈的上皮细胞，通常发展缓慢，开始时可能没有明显的症状，但随着病情的进展，患者可能出现异常阴道出血、性交疼痛、盆腔疼痛等症状【3】。宫颈癌是由正常宫颈、CIN到宫颈癌演变是个逐渐发展的过程，早期发现和监测肿瘤的发生、发展对其治疗起关键作用。宫颈癌的发生发展与多种基因和蛋白质的表达密切相关，是一个复杂的多步骤的过程。据报道，宫颈癌的信号传导途径中蛋白酪氨酸激酶(PTK)起着关键作用，其功能的失调会导致肿瘤的发生，并与肿瘤侵袭和转移、肿瘤新生血管的生成、肿瘤的化疗抗性等密切相关。宫颈癌的主要原因是人乳头瘤病毒（HPV）感染，特别是高危型HPV（如HPV16和HPV18），其他危险因素包括吸烟、多个性伴侣、免疫系统衰弱、长期使用口服避孕药等。预防宫颈癌的最有效方法是接种HPV疫苗，这可以提供长期保护免疫力。此外，定期进行宫颈筛查也是重要的预防措施，包括宫颈细胞学检查（常称为涂片检查）和HPV DNA检测【4】。一旦确诊为宫颈癌，治疗方法将根据病情的严重程度和患者的整体健康状况而定，常见的治疗方式包括手术切除、放射治疗、化疗和靶向治疗等。早期诊断和治疗可以显著提高患者的生存率和生活质量。

在女性的生殖器官中子宫颈癌属于最常发生的恶性肿瘤，其发病机制尚不明了，但是从流行病学的方面研究，发现子宫颈癌的发生与地理环境、不当的性行为、吸烟、子宫糜烂、抑癌基因的失活等方面有着密切的联系。宫颈癌按照病理类型可分为鳞癌、腺癌和小细胞癌等【5】。目前宫颈癌的治疗主要是根据患者的年龄、病理阶段及生育需求，以手术治疗或放射疗法为主，化学疗法为辅助的综合治疗方式。STK11基因是一种抑癌基因，该基因编码的蛋白质是一种转录因子，具有控制细胞周期的作用，如细胞需要分裂则由STK11基因编码蛋白决定，若细胞受损不能修复，STK11基因编码蛋白则会使该细胞凋亡【6】。因此，STK11基因又被称为分子警察，具有监督DNA变异程度的职责，如果细胞的DNA变异较小，则促使细胞进行自我修复，如果细胞的DNA变异较大，那么STK11基因会诱导细胞凋亡。如果STK11基因发生基因突变，则会失去控制细胞和抑制肿瘤细胞生产的功效。研究发现，STK11基因在胚胎发育过程中也起着重要的作用，参与调控胚胎器官的形成和发育【7】。在正常成人组织中，STK11基因的表达量较低，主要存在于一些特定组织如肾脏、生殖系统、脾脏和心脏等，在这些组织中，它的功能是维持正常细胞的生长、分化和功能。然而，STK11基因异常表达或突变与疾病的发生和发展密切相关。例如，在肿瘤中，STK11基因通常发生突变或缺失，导致细胞增殖失控和肿瘤的发生，此外，STK11基因在宫颈癌中也扮演着重要的角色。研究发现，STK11基因的异常表达与宫颈癌的发生和发展密切相关，在宫颈癌组织中，STK11基因的表达水平通常显著升高【8】。这种异常的表达可能与肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移有关。STK11基因的异常表达还与宫颈癌的预后和治疗反应有关，研究发现，STK11基因的高表达与预后不良和化疗耐药性相关联，意味着STK11基因可能成为宫颈癌患者预后评估和治疗方案制定的重要标志物。因此，STK11基因的研究对于深入了解相关疾病的发生机制、诊断和治疗具有重要意义。通过研究STK11基因的功能和调控机制，希望能够找到新的治疗方法和药物靶点，为相关疾病的治疗提供更有效的手段。

本次研究分别从STK11基因、宫颈组织STK11基因甲基化情况三个角度，讨论了STK11基因在宫颈癌组织细胞中的表达情况，结果发现正常宫颈组较宫颈癌组的STK11基因表达量相比，存在明显差异（P<0.05），表明STK11基因在宫颈癌转移过程中的重要作用，STK11基因是转录因子，参与了许多生物学过程，包括细胞增殖、分化和凋亡等，STK11基因是重要的调控基因，在许多肿瘤中，STK11基因表达异常，并且与肿瘤的发生和发展密切相关。在宫颈癌中，STK11基因的表达水平也已被证实与预后相关【9】。因此，尽管未观察到其表达量的差异，但仍有可能存在其他机制或因素在调节宫颈癌的转移过程中起着重要作用。所以进一步的研究和深入的机制研究是必要的，以了解STK11基因在宫颈癌转移过程中的确切作用，探究是否可能存在其他相关基因或信号通路，与STK11基因共同参与宫颈癌的转移过程【10】。未来的研究可以通过结合其他临床和实验数据，进一步探索STK11基因与宫颈癌转移的关系，并寻找潜在的治疗靶点。STK11基因表达量与临床分期的关系并不显著，在同一分期中，STK11基因表达量与肿瘤是否发生转移的关联不高，意味着STK11基因对宫颈癌转移的影响不显著，但也可能与本次研究样本量少有关。另外，两组经对比，在STK11QX、STK11HY、STK11总的位点中，甲基化率经对比，差异均有统计学意义（P＜0.05）。说明在宫颈癌疾病中，STK11基因启动子甲基化的发生率更高，对宫颈癌的形成具有促进作用，也进一步提示STK11基因在宫颈癌形成中可能为DNA转录抑制因子。

综上所述，STK11基因在宫颈癌中的表达情况对于该疾病的早期诊断、治疗和预后评估具有意义。STK11基因的异常表达可能与宫颈癌细胞的增殖、侵袭和转移有关，高表达的STK11基因可能与预后不良和化疗耐药性相关，这提示STK11基因可能成为宫颈癌患者预后评估和治疗方案制定的一个标志物。因此，未来可通过深入了解STK11基因的功能和调控机制，提高宫颈癌的早期诊断率，为宫颈癌患者提供个体化治疗，为宫颈癌的研究和治疗提供新的方向。

参考文献：

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黑龙江省卫生健康委科研课题，课题名称：TP53和STK11基因在宫颈癌细胞中的表达研究(课题编号：2020-236)