高效液相色谱法在药品成分分析中的应用及优化研究

高效液相色谱法在药品成分分析中的应用及优化研究

章棋、李金玲、吴文安

杭州希科检测技术有限公司，浙江省杭州市310000

摘要：随着我国经济社会的不断发展，各行各业都在进步。这一切进步都和科学技术密切相关。近年来，药品的质量和安全问题备受关注，各国政府在加强监管的同时，对未取得《许可证》而生产、经营药品的企业和个人进行了严厉的处罚。因此对药品成分的准确分析和监测变得至关重要。高效液相色谱法（HPLC）作为一种广泛应用于药物和化学分析领域的分析技术，因其高灵敏度、分离效果好和研究广泛等优势，成为药品成分分析中最常用的方法之一。

关键词：高效液相色谱法；药品成分分析；应用及优化

引言

药品对于人们的身体健康具有重要的影响，为了确保其生产质量合格就要对其成分进行系统全面的有效检测，为药品质量的鉴定提供数据支持。传统的药品检测方法需要耗费大量的检测时间，对药品的顺利上市造成不小的阻碍，严重影响了新药的有效推广。因此，需要将效率高、检测精度高的检测方法运用于药品检测工作中，进而提高药品检测的工作水平，为人们吃上放心药提供可靠保障。将高效液相色谱法运用于药品的检测工作中，能够大大缩短整个检测工作所用的时间，进而促进工作效率的不断提高，并且其还具有较高的监测精度，极大地改善了药品检测的工作现状。

1 高效液相色谱法简介

高效液相色谱法又被简称为HPLC，是一种色谱法的重要组成部分之一，这种方式可以通过高压输液泵、色谱柱、进样器以及检测器、馏分收集器等环节实现药品信息的检测与反应工作。高效液相色谱法最初应用可以追溯到20世纪的70年代，因此就当下的应用发展水平来说，具有较为深厚的使用经验，因此可以在应对各种工作状况时具有比较充足的解决应对措施。高效液相色谱法相较于传统经典的液相色谱检验法来说，能够更加固定地进行检测，并且检测的过程中可以保障检测物的细化。并且高效液相色谱法进行工作的过程中，还能够实现检测的自动化，利用计算机的程序，降低对人力的消耗，并且提升检测结果的准确性，降低由于人员操作过程中带来的误差，促使检验结果更加趋向于准确。

2高效液相色谱法的分析原理及特点

2.1原理

在高效液相色谱法实际的检测过程中，选用了液体作为检测样品的载体，并通过高压输液泵的有效传输，大大提高了液体的传输速度，进而缩短了整个检测过程的用时。高效液相色谱法在本质上与经典液相色谱法保持一致，前者是在后者的基础上对其进行了改良创新，引入了多种先进的检测设备和仪器，进而大大提高了检测的精度和范围。

2.2特点

高效液相色谱法具有高压、高速、高效、高灵敏度以及适应范围宽等优点，下面将分别进行论述：（1）高压，在其检测过程中选用了液体作为流动相，当其在色谱柱中进行流动时，会受到非常大的流动阻力，因此，为了确保流动相的顺利通过，就需要对流动相施以极高的驱动压力，一般高达（150~350）×105Pa；（2）高速，相较于经典色谱法而言，高效液相色谱法柱内液体的流速非常快，高达1~10mL/min，这就能够在一定程度上减少检测时间，通常来说可以节约1h左右；（3）高效，该种检测方法的样品分离效率较高，并且在检测过程中还采用了新型的固定相，这就大大提高了分离效率；（4）高灵敏度，在检测过程中，采用了灵敏度非常高的检测仪器，能够有效改善样品的检测精度；（5）适应范围宽，通过将样品制成溶液，能够有效限制样品的挥发，进而大大增加了检测样品的范围，能够适应不同样品的检测要求。

3高效液相色谱法在药品检验中的应用

3.1鉴别方面

利用高效液相色谱法能够在一定程度上对药品的保留时间以及具体成分结构性质进行鉴别。药品的成分鉴别是一种较为平常的工作内容，根据药品的性质和成分对其种类进行区分。我国在对药品进行成分划分规定的相关标准中，针对药品进行了准确的细化，例如在《中国药典》当中就记载了关于各种药品的概念，其中针对头孢的具体鉴别进行了详细的规定。在含量测定项方面所保存的色谱图当中，需要保证供试品主峰保留时间以及对照品的主峰保留时间能够保持一致。药典中对于各种药物的的含量测定都有较为明确的规范，并且通过高效液相色谱法进行具体的鉴别。

3.2抗生素的检测

为了避免人或动物对抗生素类药品产生耐药性，国家对含抗生素的药品有非常严格的要求，确保其中的抗生素含量不会导致耐药性的出现。在临床上抗生素的滥用，会给患者带来诸多的不良反应，不仅不利于患者身体的康复，而且部分的药品原材料中还可能含有导致患者产生不良反应的中间体、降解产物以及聚合物等。通过采用高效液相色谱法对药品中的抗生素含量进行系统全面的有效检测，不仅能够避免抗生素药品的滥用，防止患者对抗生素产生耐药性，确保抗生素药品的有效性，而且还能够检测出其中所含有的引起患者产生药物反应的物质，进而能够对抗生素中的杂质采取有针对性的控制措施。

3.3药品杂质含量监测

药品质量有着明确的标准，是由药品质检部门制定，在检验药品有效成分含量同时，也要检验药品中有害物质含量，是否属于违禁物质。在药品过程期间，如果药品生产环境的温度和湿度变化，可能导致原料产生附加成分，产生一些有害物质，如果超出标准则会导致药品有效成分降低，导致药物质量不合格。故此，应该严格控制药物附加成分，使用高效液相色谱法检验附加物含量，具有常规检验方法所不具备的优势。制药市场规模不断扩大，市场上的厂家良莠不齐，部分厂家为了谋求更大的利益，在药品生产中加入一定违禁成分，以次充好，即便降低生产成本，却对人民群众的身体健康带来了严重危害。所以，在质量监管中高效液相色谱法的应用起到了重要作用，精准确定其中的违禁成分含量，为药品质量提供保障，提升药品质量检验效率。

3.4药物有效成分检出中高效液相色谱法的应用

每一种新型药品上市前，均需要进行严格检测，对其有效成分含量密切监测，在有效成分符合相关标准后，方可上市使用和销售。高效液相色谱法能够对药品组成成分有效准确判别，该方法具有较高的灵敏度和准确度，避免药物中附加剂干扰检测结果。如检测凤尾茶中黄酮含量过程中，通过高效液相色谱技术，可有效检测含量，检测方法方便、简单。测定结果相对平稳，出口凤尾茶期间，通过该技术检测，有助于推动我国药物出口进一步发展。据有关资料显示，通过高效液相色谱法可以检测不同地区、不同成熟度的黄芪药材成分，从而比较不同时期黄芪药物效果，与此同时，可以将质量较好的黄芪反映出来。换言之，通过高效液相色谱法有助于更好的开展药物检测。

3.5药品含量检测中高效液相色谱法的应用

实验原料中每种杂质及每种成分含量检测过程中，均可以通过高效液相色谱法进行，其能够在短时间内进行检测，而且具有较高的准确性和可靠性。如检测吡罗昔康含量期间，因为该药物是常见酰胺类化合物之一，极易被水解、氧化，致使水溶液化学稳定性较差，因此，可通过高效液相色谱法实施检测。实际操作期间，将0.01mol/L的盐酸甲醇溶液视为容积，不仅有助于容积溶解性提高，同时也可促进吡罗昔康溶液稳定性提高，确保良好的检测结果。检测四环素类药物过程中，利用高效液相色谱法可分离检测四环素类康立体异构体和自身；检测螺旋霉素发酵溶液中机酸含量过程中，可通过高效液相色谱法对机酸类型进行检测，以便对螺旋霉素代谢机制进行分析；盐酸萘甲唑啉是盐酸萘甲唑啉鼻用剂型凝胶主要成分，通过高效液相色谱法检测，通过乙腈有效析出凝胶基质中的高分子物质，以便将高分子物质堵塞液相柱问题解决，避免对检测进行干扰。由上述内容分析，通过高效液相色谱法抽样检查药品，能够对原药品中的杂质、成分、中间体含量准确检查，避免流通假冒伪劣产品，进而达到用药品安全性及质量的提高的目的。

4高效液相色谱法在药品成分分析中的优化方案设计

4.1样品处理优化

药品成分分析采用固相萃取、液-液萃取、蒸馏等技术，可以将药品样品中的目标成分从复杂的样品基质中提取出来，并达到一定的浓缩效果。提高目标成分的测定灵敏度，消除某些干扰物质的影响，提高峰形对称性和信噪比[2]。药品样品处理过程中，可能会发生物化变化、光敏变化或降解，从而影响样品中目标成分的含量和测定结果。为了解决这些问题，高效液相色谱法的样品处理、安全、操作过程简便，处理效率高，能够实现联机操作，常见的样品处理技术主要包括液-液萃取、固相萃取等。第一，液-液萃取是利用不相溶的溶剂体系，将目标成分从水溶液中抽提至有机相中的过程。这种技术可使目标成分从复杂的样品基质中分离出来，并富集浓缩，提高检测灵敏度。通常，有机相可以通过挥发性溶剂的挥发使其浓缩，减少溶剂用量和对操作人员的危害。也可以使用离子液体作为萃取剂，以减少对操作人员的危害并提高目标成分的回收率；第二，固相萃取法是指将柱色谱和液相-固萃取法相结合的样品处理工艺。它通过选用合适的吸收物（正相、反相、离子交换等），使目标成分吸附于稳定相上，然后再通过特殊的洗脱溶液除去试样中的非目标化合物，从而实现了目标元素的富集与提纯。固相萃取具有样品量少、耗溶剂少、操作简单等优点，广泛应用于基质复杂、目标成分含量低的样品处理。

4.2检测参数优化

高效液相色谱法（HPLC）是一种广泛应用于药品成分分析的分离技术。其优点包括高分离效能、高灵敏度、高选择性等。然而，为了得到准确且可靠的检测结果，参数优化是必不可少的步骤。对于不同的药品成分，流动相的组成和比例需要进行调整，以达到最佳的分离效果。在分析药材中的黄酮类化合物时，采用甲醇-水-磷酸体系作为流动相，同时调整甲醇的比例以改善分离效果。在测定抗生素类药物时，通常选择254nm作为检测波长；而在测定多肽类药物时，则可能需要选择214nm或280nm作为检测波长。在黄酮类化合物的分析中，采用了甲醇-水-磷酸作为流动相，并将甲醇的比例调整为40:60:0.1，以达到最佳的分离效果。检测波长选择为360nm。柱温设定为30℃，流速为1mL/min，进样量为20μL。通过这些参数优化，获得了良好的分离效果，其中R2值表示分离效果的相关性，越接近1表示分离效果越好。通过对不同药品成分的分析和对优化参数的调整，得到了适用于黄酮类化合物、抗生素类药物和多肽类药物的最佳分析条件。这些优化后的条件能够实现目标成分的高效分离和准确测定，为药品分析提供了准确性和效率性的保证。

结语

高效液相色谱法在药品成分分析中的应用及优化研究对于提高药品分析的准确性和效率具有重要的意义。优化后的分析条件能够实现目标成分和杂质的高效分离和准确测定，提高了分析效果和准确性。同时，高效液相色谱法具有操作简便、分辨率高并且灵敏度好等优点，使其在药品成分分析中得到广泛应用。未来，新型柱材料和新的分离机制的开发将进一步提升分析性能。分离机制的研究也将拓宽高效液相色谱法在药品成分分析中的应用范围，并提供更灵敏的检测方法。

参考文献

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