简介:目的建立面粉及其制品中偶氮甲酰胺的高效液相色谱检测方法。方法样品采用丙酮—二甲基甲酰胺(95∶5,v/v)超声提取,经乙腈饱和的正己烷脱脂,注入高效液相色谱后,以20mmol/L乙酸铵与乙腈(均含5%二甲基甲酰胺)为流动相,等度洗脱,经WatersXBridgeBEHAmide(3.5μm,4.6mm×150mm)色谱柱分离,二极管阵列检测器245nm检测,外标法定量。结果方法的线性范围为1.0~100.0mg/L,线性相关系数r为0.9999;在面粉、馒头、面包、油条和面条5种基质中高中低3个浓度水平的平均加标回收率为90.20%~99.74%,相对标准偏差(RSD)2.82%~6.31%;方法定量限(LOQ)为0.5mg/kg。结论该方法操作简单、灵敏快速、准确可靠,适用于面粉及其制品中偶氮甲酰胺含量的测定。
简介:目的探讨二甲基甲酰胺(dimethylformamide,DMF)致H9c2心肌细胞凋亡线粒体通路相关蛋白的影响。方法采用蛋白免疫印迹法(westernblot,WB)检测不同剂量DMF(0mM、50mM、100mM、200mM)染毒24h后胞浆内活化的Caspase-3(cleavedcaspase-3)、Bax、Bcl-2以及细胞色素C(Cyt-c)水平的改变。结果不同剂量DMF(0mM,50mM,100mM,200mM)染毒24h后胞浆Cleavedcaspase-3、Bax和Cyt-c水平升高,Bcl-2水平降低,组间差异均有统计学意义(Cleavedcaspase-3:F=23.33,P〈0.001;Bax:F=60.31,P〈0.001;Bcl-2:F=577.8,P〈0.001;Cyt-c:F=104.0,P〈0.001)。Cleavedcaspase-3和Cyt-c水平在100mM、200mM染毒组较对照组升高,差异均有统计学意义(均有P〈0.05)。Bax在50mM、100mM染毒组较对照组升高,差异均有统计学意义(均有P〈0.05),200mM染毒组与对照组相比差异无统计学意义(P=1.000)。Bcl-2水平在50mM、100mM、200mM染毒组较对照组均降低,差异均有统计学意义(均有P〈0.05)。Bax/Bcl-2比值增加,100mM,200mM组较对照组差异均有统计学意义(均有P〈0.05)。结论DMF染毒后可上调H9c2心肌细胞Cleavedcaspase-3、Cyt-c以及Bax/Bcl-2水平,下调Bcl-2水平。线粒体通路参与了DMF诱导的H9c2心肌细胞凋亡的过程。