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  • 简介:目的阐明压力负荷诱导的大鼠心脏松弛素受体(relaxin/insulinlikefamilypeptidereceptor,RXFP1)表达下调的意义及机制。方法利用大鼠主动脉弓结扎(transversaortaconstriction,TAC)方法建立压力负荷模型,WesternBlot检测RXFP1表达水平,并检测siRNA敲减RXFP1的乳大鼠成纤维细胞在松弛素作用下胶原的分泌水平。进一步采用WesternBlot检测不同浓度TGFβ1孵育乳大鼠心脏成纤维细胞RXFP1的表达变化。结果TAC组心脏松弛素受体RXFP1表达下调,敲减RXFP1后松弛素抑制乳大鼠心脏成纤维细胞胶原分泌的作用显著减弱,TGFβ1呈剂量依赖性地下调乳大鼠心脏成纤维细胞RXFP1表达。结论在压力负荷诱导的心室重塑模型中,TGFβ1介导了心脏RXFP1下调,并抑制松弛素发挥抗纤维化作用。

  • 标签: 心室重塑 松弛素受体 TGFΒ
  • 简介:摘要目的观察Necrostatin-1对压力诱导的大鼠髓核细胞自噬及凋亡的影响。方法从3月龄大鼠腰段脊柱提取髓核细胞,选取第2代细胞进行实验,分为对照(生理盐水)组和Necrostatin-1组,1.0 Mpa压力条件下培养0、24、36 h。单丹黄酰尸胺(MDC)染色荧光显微镜观察自噬泡及细胞膜上MDC荧光表达情况,流式细胞仪检测MDC阳性率。膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素(Annexin V-FITC)/碘化丙锭(PI)染色流式细胞仪定量Annexin V阳性率;Hoechst 33258染色荧光显微镜观测细胞凋亡。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测自噬相关基因Beclin1、LC3B和凋亡相关基因半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)的表达水平。组间比较采用t检验。结果压力作用24、36 h,荧光显微镜观察显示,与对照组比较,Necrostatin-1可明显下调细胞MDC及Hoechst 33258的荧光强度。流式检测显示,与对照组24、36 h的MDC阳性率(13.97±0.85、23.52±1.92)%及Annexin V阳性率(12.72±0.89、22.13±1.46)%比较,Necrostatin-1可明显下调MDC阳性率(t=5.530、4.977,P<0.05)及Annexin V阳性率(t=4.702、4.970,P<0.05),差异有统计学意义。RT-PCR结果显示,与对照组24、36 h的Beclin1(2.76±0.13、2.65±0.14)、LC3B(3.62±0.18、4.54±0.65)及Caspase-3(2.04±0.15、3.28±0.39)、bax(3.56±0.42、4.82±0.66)基因表达比较,Necrostatin-1可明显抑制24、36 h压力诱导Beclin1(t=8.192、2.836,P<0.05)、LC3B(t=9.013、3.072,P<0.05)及Caspase-3(t=3.048、3.277,P<0.05)、bax(t=4.241、2.850,P<0.05)的基因表达,差异均有统计学意义。结论Necrostatin-1可明显抑制压力诱导的髓核细胞自噬及凋亡。

  • 标签: 压力 髓核细胞 自噬 凋亡
  • 简介:摘要目的探讨粪肠球菌培养上清液诱导人牙周膜细胞(human periodontal ligament cell,hPDLC)的炎症反应及其在压力状态下的表达变化。方法噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测不同体积分数[0%(对照组)、1%、2%、5%、10%和20%]的粪肠球菌上清液对hPDLC增殖活性的影响,采用流式细胞术检测粪肠球菌上清液刺激24 h后hPDLC表面Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR-2)表达的改变;依据MTT及流式细胞术结果,将hPDLC分为不含粪肠球菌上清液的非诱导组与含5%粪肠球菌上清液的诱导组,每组均分别加载0、49及196 Pa的静压力,非诱导组和诱导组均以未加力(0 Pa)状态为对照。24 h 后观察hPDLC的形态变化,通过反转录PCR(reverse transcription-PCR,RT-PCR)和酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测hPDLC肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)的mRNA和蛋白表达水平。结果MTT法结果显示,培养48 h时,与对照组相比体积分数≥5%的粪肠球菌上清液能显著降低hPDLC的增殖活性(P<0.05)。流式细胞术结果显示,粪肠球菌上清液刺激hPDLC 24 h后其表面TLR-2阳性细胞率随上清液体积分数的增加而增加,0%、1%、2%、5%、10%和20%体积分数的上清液TLR-2阳性细胞率分别为(2.12±0.07)%、(2.41±0.32)%、(2.65±0.27)%、(4.76±0.46)%、(9.91±0.92)%、(12.01±1.35)%,体积分数≥5%时与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。RT-PCR结果显示,非诱导组施加49 Pa压力时,hPDLC IL-1β和TNF-α mRNA表达与对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05),施加196 Pa压力时,hPDLC IL-1β和TNF-α mRNA表达与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);而诱导组施加49和196 Pa压力时,hPDLC IL-1β和TNF-α mRNA表达均显著升高,与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。ELISA结果与PCR结果趋势一致。结论高浓度的粪肠球菌上清液能抑制hPDLC的增殖活性;粪肠球菌上清液可以促进hPDLC表面TLR-2的表达;过度的机械压力可引起hPDLC细胞的炎症反应,导致hPDLC对压力不耐受,引起炎症反应加重。

  • 标签: 肠球菌,粪 细胞,培养的 根尖周炎 牙周膜成纤维细胞 压力
  • 简介:时文祥与出版社签了约,须在一年内交出一部长篇小说.为逃避市内的喧闹,他去郊区选择了一座二层小楼,楼下是汽车库,楼上只三家:房东,他,还有一位退休的庞姓老工人.这位老工人因为住房被拆才搬到这儿,等一年后新楼建成再搬回去.据说老工人还爱好文学,发表过一些小说、散文.有这样的邻居做伴,闲时可以交流谈心,真是再理想不过.时文祥经过考察,对这儿的环境十分满意,就按房东要求,交了一年的房租,第二天就迫不及待地搬了进来.

  • 标签: 失败诱导
  • 简介:摘要在小学数学教学中,教师应充分利用诱导与启发的教学模式,及时发现问题并正确解决。当学生遇到学习困难时,教师应做到引导学生独立思考,并在课堂上勇于发表自己的见解,不断丰富数学学习知识。本文分析了小学数学的教学现状,针对其存在的问题指出了具体的诱导启发办法,以其改进教学模式,获得更为理想的教学效果。

  • 标签: 诱导 启发 小学数学 教学方式 变革
  • 简介:目的:APJ受体是1993年发现的一种G蛋白偶联受体,与血管紧张素111型受体AT1有很高的同源性,其内源性配体为Apelim近来发现APJ受体在心肌肥厚形成中存在双重作用,心肌细胞中APJ受体的激活一方面可以改善心肌功能,另一方面却可以提高大鼠对压力诱导的心肌肥厚的敏感性。本文探讨APJ受体在压力诱导的心肌细胞肥大中的作用,并进一步探讨其自噬、P13K调节机制,为阐明APJ受体在压力诱导的心肌肥厚形成过程中的作用提供实验依据。

  • 标签: 心肌细胞肥大 APJ受体 压力诱导 PI3K 自噬 调节
  • 简介:摘要目的研究1-磷酸鞘胺醇(S1P)与其受体3(S1PR3)在压力超负荷诱导的病理性心肌肥厚的作用及其机制。方法将10~12周龄的雄性C57BL/6野生型小鼠和S1PR3基因敲除纯合子(S1PR3-/-)小鼠分为4组:假手术(sham)组、sham+S1P裂解酶抑制剂(THI)组、胸主动脉缩窄术(TAC)组和TAC+THI组。各组小鼠检测血浆和心脏组织中S1P的水平;测量心脏重量和胫骨长度;心脏超声检测心功能;苏木素-伊红(HE)染色与麦胚凝集素(WGA)染色观察心肌细胞横截面积大小;二氢乙啶(DHE)染色检测心脏组织活性氧(ROS)水平;蛋白质印迹法(Western blot)和反转录聚合酶链反应(qPCR)检测心脏组织中心肌肥厚标志物和磷酸化STAT3的表达变化情况。AC16人心肌细胞处理分为4组:对照组、AngⅡ/H2O2组、AngⅡ/H2O2+S1P组和AngⅡ/H2O2+S1P+S3I-201(STAT3抑制剂)组。鬼笔环肽(Phalloidin)染色观察各组心肌细胞横截面积大小;Western blot检测各组心肌肥厚标志物的表达变化;DHE染色检测各组ROS水平。结果动物实验结果显示,THI显著提高小鼠血浆和心脏中S1P水平,差异有统计学意义(均为P<0.001)。与野生型小鼠相比,THI并不能改善S1PR3-/-小鼠的心功能和病理性心肌肥厚,以及减少心脏组织中的ROS生成。此外,在S1PR3-/-小鼠中,THI不能逆转压力超负荷诱导的心脏组织中的磷酸化STAT3水平的降低。细胞实验结果表明,S1P能显著抑制AngⅡ诱导的心肌细胞肥大和心肌肥厚标志物的表达,且能显著减少H2O2诱导的ROS生成,差异有统计学意义(均为P<0.001)。但均可被S3I-201逆转,差异有统计学意义。结论S1P通过S1PR3改善压力超负荷诱导的病理性心肌肥厚并减少心脏组织中ROS的生成,可能是通过激活JAK/STAT3信号通路发挥该效应。

  • 标签: 1-磷酸鞘胺醇 1-磷酸鞘胺醇受体3 病理性心肌肥厚 压力超负荷
  • 简介:诱导公式是职高数学的教学重点,也是难点。教学要求是能熟练地把一个任意角的三角函数化为锐角(或其它任意角)的三角函数。旧版教材要求用三课时,而新版教材仅要求用两课时,内容与教学要求不变。本文针对传统教法的不当提出一种新的教学方法,以满足新教材的要求,供同行参考。传统教法是在单位圆上首先利用三角函数定义

  • 标签: 数学教学 诱导公式 三角函数
  • 简介:自古以来,大凡是学校里的识字教学,都是教师为主地传授,学生被动地接受,这种方法一直沿袭到今天.社会发展了,时代要求我们的教育要充分体现"以人为本","以学生为主体".

  • 标签: 识字教学 中国 潜能开发 主体识字 学生 教学心理学
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  • 简介:  我辞去报馆一职.不想再替华人打工,也不想再干清洁工什么的,于是,我报读了一门officeSkill(办公室技术)--至少也得对得起衣橱里那几套西装.……

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  • 简介:有一位讲师正在给学生们上课,大家都认真地听着。寂静的教室里传出一个浑厚的声音:“各位认为这杯水有多重?”说着,讲师拿起一杯水。有人说二百克,有人说三百克。“是的,它只有二百克。那么,你们可以将这杯水端在手中多久?”讲师又问。很多人都笑了:二百克而已,拿多久又会怎么样!

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